飼糧中不同蛋白質類型及水平對蛋雞腸道消化酶活性及血漿總氨基酸含量的影響

趙麗艷 肖靜靜 林 海 焦洪超 宋志剛

(山東農業大學動物科技學院，泰安 271018)

我國蛋雞產業經過上個世紀七八十年代的快速發展，一躍成為養殖規模和雞蛋產量位居世界第一的生產大國［1］。隨著養禽業的迅速發展，我國蛋白質飼料資源日益短缺，研究開發蛋白質飼料資源已經成為目前的重要任務之一。豆粕營養價值高，但其飼料成本也較高。選擇來源豐富且價格低廉的蛋白質原料(如菜籽粕、棉籽粕等)代替部分豆粕，是降低飼料成本的主要途徑之一［2］。用雜粕代替部分豆粕，在不降低家禽生產性能的前提下，可降低成本，提高經濟效益［3］。不同的蛋白質水平對動物的生理也會有一定的影響，在水產飼料方面研究報道較多［4－7］，但在家禽飼料方面報道甚少。另外，飼糧的變化可影響機體的消化酶活性和腸道的pH，影響機體對飼料的消化，進而影響血漿總氨基酸，最終影響家禽的生產性能。因此，本試驗主要研究棉籽粕、菜籽粕替代部分豆粕以及飼糧中不同的蛋白質水平對蛋雞腸道pH、消化酶活性、血漿總氨基酸含量和平均日增重(ADG)的影響，旨在為生產中更好地、更科學地利用雜粕提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與試驗設計

選用68周齡的健康海蘭褐蛋雞50只，平均體重為(1.97±0.17)kg。將試驗蛋雞隨機分為5組，每組10個重復，每個重復1只雞。以玉米－豆粕型飼糧為基礎，配制不同粗蛋白質(CP)水平的試驗飼糧，分別為對照組(CP 15.50%，Control)，高蛋白質組(CP 18.00%，HP)、低蛋白質組(CP 13.09%，LP)、菜籽粕組(CP 15.50%，RM)和棉籽粕組(CP 15.50%，CM)。試驗期共8 d，其中預試期7 d，正試期1 d。

1.2 試驗飼糧及飼養管理

試驗飼糧參照雞飼養標準(NY/T 33—2004)產蛋雞營養需要，基礎飼糧組成及營養水平見表1。試驗雞單籠飼養，預試期于每天07:30—08:30和16:30—17:30分段飼喂，訓練雞只集中采食，以便在試驗期采食3 h后取樣時取得更多腸道食糜，正試期于07:30飼喂，自由飲水。

1.3 樣本采集與制備

正試期采食后3 h［8］(10:30)靜脈竇采血(用肝素鈉抗凝)，然后斷頸宰殺，迅速取小腸部分(起自肌胃幽門，止于回盲結合部)，擠出全部內容物，置于液氮保存。

血液3 000 r/m in離心10 m in后，取血漿，－4℃保存備用。

將小腸食糜混合均勻后，用0.9%的生理鹽水稀釋5 倍，勻漿1 min，離心20 min(4 ℃、1 3018 r/min)，得到20%小腸液樣本，分裝后 －80℃保存，待測酶活［9］。

1.4 測定指標與方法

用PB－10酸度計測定小腸食糜提取液pH;采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定血漿中總氨基酸和食糜提取液中淀粉酶、麥芽糖酶、胰蛋白酶、脂肪酶的活性;統計體重數據，計算ADG。

1.5 數據處理與分析

結果以平均值±標準差表示，數據處理與分析采用SAS 9.1進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，用 Duncan氏方法進行多重比較，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標準。

2 結果

2.1 飼糧中不同蛋白質類型及水平對蛋雞小腸液pH的影響

由表2可見，不同的蛋白質類型及水平的飼糧均高于提高小腸液pH，而其中棉籽粕組極顯著地提高了小腸液的pH(P＜0.01)。

表2 飼糧中不同蛋白質類型及水平對小腸液pH的影響Table 2 Effects of differents dietary protein sources and levels on pH of intestinal fluid

2.2 飼糧中不同蛋白質類型及水平對蛋雞小腸消化酶活性的影響

由表3可見，與對照組相比，高蛋白質組和菜籽粕組的小腸食糜提取液的淀粉酶活性有下降的趨勢，低蛋白質組和棉籽粕組的淀粉酶活性有上升趨勢，但差異均不顯著(P＞0.05)。與對照組相比，調高或調低飼糧的蛋白水平，麥芽糖酶和脂肪酶活性均有上升趨勢(P＞0.05)。與對照組相比，菜籽粕組淀粉酶和脂肪酶活性均有下降趨勢，麥芽糖酶活性有上升趨勢(P＞0.05)，棉籽粕組淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶活性均有上升趨勢，麥芽糖酶有下降趨勢(P＞0.05)。與對照組相比，低蛋白水平組的胰蛋白酶活性顯著上升(P＜0.05)，菜籽粕組胰蛋白酶的活性有所上升，但不顯著(P＞0.05)。

表3 飼糧中不同蛋白質類型及水平對消化酶活性的影響Table 3 Effects of different dietary protein sources and levels on the activities of digestive enzymes U/mg prot

2.3 飼糧中不同蛋白質類型及水平對蛋雞血液指標的影響

由表4可見，低蛋白質組血漿總氨基酸的含量高于對照組，但差異不顯著(P＞0.05)，高蛋白質組、棉籽粕組及菜籽粕組血漿總氨基酸的含量均低于對照組，差異也不顯著(P＞0.05)。

2.4 飼糧中不同蛋白質類型及水平對蛋雞ADG的影響

由表5可見，各組的ADG與對照組相比都沒有顯著差異(P＞0.05)，經過8 d的試驗期，菜籽粕組蛋雞的體重變化較小，但與對照組相比無顯著差異(P＞0.05);高蛋白質組、低蛋白質組和棉籽粕組有減小ADG的趨勢，但差異不顯著(P＞0.05)。

表4 飼糧中不同蛋白質類型及水平對血漿總氨基酸含量的影響Table 4 Effects of different dietary protein sources and levels on the plasma total am ino acid contentμmol/m L

表5 飼糧中不同蛋白質類型及水平對平均日增重的影響Table 5 Effects of different dietary protein sources and levels on average daily gain g/(d·只)

3 討論

3.1 飼糧中不同蛋白質類型及水平對蛋雞小腸液pH的影響

消化酶類屬于蛋白質，具有許多極性基團，在不同的pH環境下，這些基團的解離狀態不同，只有在處于一定的解離狀態時，消化酶才能與底物結合，發揮催化作用［10］。消化道pH環境是保證消化酶完成正常催化反應和消化道有益微生物繁殖的一個重要因素，尤其是胃和小腸的pH對飼料養分消化利用的影響更為關鍵。

本研究結果表明棉籽粕組與對照組相比存在極顯著的差異，可能是由于棉籽粕中的棉酚、環丙烯脂肪酸、植酸、α－半乳糖苷［11］等抗營養因子刺激小腸，促進了腸液中堿性物質的分泌，導致小腸食糜的pH升高。腸道pH的升高將影響消化酶的活性，在一定程度上降低機體對營養物質的消化率。不同蛋白質水平對消化道食糜的pH無顯著影響。

3.2 飼糧中不同蛋白質類型及水平對蛋雞腸道消化酶活性的影響

作為酶作用的底物，飼料中各養分含量往往引起消化酶的“適應性分泌”［12］。在本試驗中，低蛋白質組的玉米和麩皮含量均比對照組高，可能引起了淀粉酶的“適應性分泌”，但不足以引起其活性的顯著性變化。麥芽糖酶活性的數據顯示，各組之間差異不顯著，說明飼糧蛋白質水平和蛋白質類型的變化對麥芽糖酶的活性影響較小或沒有影響。但棉籽粕組麥芽糖酶活有降低的趨勢，推測可能與棉籽粕組小腸液pH的升高有關，但還有待考證。

肉仔雞、蛋公雞小腸食糜蛋白消化酶比活有按豆粕、菜籽粕、棉籽粕下降的趨勢［13］，在本研究中就不同的蛋白質類型而言，胰蛋白酶比活為菜籽粕組最高，豆粕組最低，這與袁建敏等［13］的研究結果類似，都差異不顯著。在本研究中低蛋白質組顯著提高了胰蛋白酶的活性，這與前人報道的低蛋白質水平飼糧有提高豬空腸液中胰蛋白酶活性的趨勢類似［14］。

脂肪酶分為胃脂肪酶、腸脂肪酶和胰脂肪酶，前兩者是對后者的補充，胰脂肪酶在膽鹽的共同作用下，將脂肪分解為脂肪酸和甘油一脂，其中膽鹽的乳化作用和脂肪酶活性決定了脂肪消化率的高低。本試驗表明，飼糧蛋白質類型和水平對脂肪酶的活性影響較小或沒有影響。

3.3 飼糧中不同蛋白質類型及水平對蛋雞血漿總氨基酸的影響

血漿作為機體內環境的一部分，在維持內環境穩定上起著重要作用。血液本身就是一個穩定的系統，具有很多的緩沖機制和體系，如有維持pH穩定的緩沖體系，可以減輕酸性代謝產物引起的pH變化。如果機體任何部位或任何時期發生生理生化過程異常，都將相應地引起血液某些成分和理化性質的異常改變［15］。血漿中總氨基酸的含量直接反映飼料氨基酸的消化情況。飼糧中不同的蛋白質類型和水平對血漿總氨基酸都沒有顯著影響，可能是由于本試驗飼糧的差異尚不足以引起血漿氨基酸的顯著變化。

3.4 飼糧中不同蛋白質類型及水平對蛋雞ADG的影響

飼糧中不同的蛋白質類型和水平會影響機體對營養物質的消化率，進而對ADG造成一定的影響。對本試驗而言，預試期每天2 h的分段飼喂在一定程度造成了體重的降低。低蛋白質組有降低ADG的趨勢。宋代軍等［16］研究表明增加飼糧中的CP水平，可以提高14～18周齡烏骨雞的ADG，與本試驗結果不一致。余紅心等［17］證實提高蛋白質水平可以提高ADG，但差異不顯著，與本試驗結果類似。張洋等［18］證實不同來源的蛋白對肉雞生產性能的影響差異不顯著，用棉籽粕、菜籽粕來代替飼料中部分豆粕，不會影響肉雞的ADG，與本試驗結果類似。

4 結論

①飼糧中不同蛋白質類型及水平對蛋雞消化道食糜的pH有一定的影響，棉籽粕組消化道食糜pH顯著升高，對大部分消化酶活性、血漿總氨基酸和ADG沒有顯著影響影響。

②低蛋白質水平的飼糧食糜胰蛋白酶活性升高可能是蛋白質消化率提高的原因之一。

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