倪青松,王 斌,李旭廷,龔 雪,謝良華
(1.四川省畜牧科學研究院獸藥研究所,四川 成都 610066;2.四川鼎尖動物藥業有限責任公司,四川 成都 610100)
川牛膝是莧科植物川牛膝的干燥根,為川產道地藥材,主產四川天全、金河口等地。其味苦、酸,性平,入肝、腎經,自古就有特殊的臨床應用價值:補肝腎、強筋骨、治腰膝酸麻和肝腸眩暈、散瘀血、消癰腫等。大量藥理、臨床研究表明,川牛膝多糖(ABP)是一種免疫調節劑,能夠促進細胞免疫和體液免疫。本研究擬通過研究川牛膝多糖對雞血清抗體和血液生化指標的影響,來探討其對體液免疫的影響,為川牛膝作為中草藥免疫增強劑及飼料添加劑的臨床應用提供理論依據。
1.1 川牛膝多糖 本實驗室自制。用四川天全產的道地藥材——川牛膝干燥粉碎,再回流提取,并用經典的“水提醇沉”法處理后得到精制的川牛膝總多糖。
1.2 試驗動物及分組 健康三黃雞60只,隨機分為3組,每組20只,分籠飼養,基礎日糧相同(基礎日糧配方見表1)。Ⅰ組作為對照組,Ⅱ組和Ⅲ組從7日齡開始分別在基礎日糧中按400mg/kg的比例加入川牛膝多糖添加劑,自由采食。環境溫度控制在23~25℃左右。

表1 基礎日糧配方
1.3 方法 試驗期間記錄臨床癥狀和剖解變化,分別在飼喂后第7、14、21d和28d頸靜脈采血,分離血清,檢測以下指標:
1.3.1 血清抗體IgG、IgA、IgM的含量 用免疫球蛋白IgG、IgA、IgM免疫透射比濁法檢驗試劑盒測定(購于四川省邁克科技有限責任公司)。
1.3.2 血清白蛋白含量 用白蛋白BCG法檢測試劑盒測定(購于四川省邁克科技有限責任公司)。
1.3.3 血清鈣含量 用OCPC法試劑盒測定 [購于柏定生物工程(北京)有限責任公司]。
1.3.4 血清谷丙轉氨酶和血清谷草轉氨酶活性 用轉移酶IFCC法檢測試劑盒測定(購于四川省邁克科技有限責任公司)。
1.3.5 血清堿性磷酸酶活性 用速率法試劑盒測定(購于北京中生生物制品有限公司)。
1.4 統計處理 所有數據均以“x±s”表示,采用SPSS12.0統計軟件進行方差分析。
2.1 血清抗體檢測結果 結果見表2。由表2可知,川牛膝多糖組與對照組相比,其IgG含量差異不顯著(P>0.05),但均有明顯的升高趨勢;IgA在21日齡和28日齡均差異顯著(0.01<P≤0.05),表現為明顯升高;而IgM在14日齡時表現為差異顯著(0.01<P≤0.05)。
2.2 血液生化指標檢測結果 結果見表3。由表3可知,川牛膝多糖組與對照組相比,其各項血液生化指標(白蛋白、鈣、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶以及堿性磷酸酶)均表現為差異不顯著(P>0.05)。

表2 川牛膝多糖對雞血清抗體的影響

表3 川牛膝多糖對雞血液生化指標的影響
3.1 分析與討論 血清免疫球蛋白含量的變化反映了機體體液免疫系統的功能狀態。血清IgM在初次應答的分泌抗體中占優勢,即在早期階段對機體的免疫調節具有重要作用。在20日齡后,因機體降解速度超過發育不成熟的免疫系統合成IgM的速率而出現IgM下降。IgM在大多數畜禽血清中的含量僅次于IgG,僅存于血液中,對組織液或外分泌液中的保護作用不及IgG。本試驗結果表明,川牛膝多糖組與對照組相比,在14日齡時可顯著升高血清中IgM的含量,而在21日齡后出現差異不顯著,其結果與上述理論相符,說明川牛膝多糖可在早期階段通過升高血清中IgM的含量來起到免疫調節的作用。
IgG是唯一見于雛禽血清中的母源抗體,在最初兩周逐漸分解,后隨著雛雞本身合成的結果,IgG水平迅速回升。本試驗結果表明,川牛膝多糖組的血清IgG含量雖然與對照組相比差異不顯著,但與同日齡相比均有所提高,說明川牛膝多糖可提高血清中IgG的含量。IgA與IgG結構相似,是外分泌液的主要免疫球蛋白,在保護腸道、呼吸道、泌尿生殖道、乳腺和眼睛抵抗微生物入侵方面起十分關鍵的作用。本試驗結果表明,川牛膝多糖可顯著提高血清IgA的含量,是否預示在飼料中添加川牛膝多糖后可增強動物機體對腸道疾病、呼吸道疾病和泌尿生殖道疾病的抵抗力,還需進一步研究。
血清白蛋白主要維持機體滲透壓平衡,它能很好地反映機體蛋白的吸收和代謝狀況,同時與雞的生長速度成正相關。本試驗結果表明,川牛膝多糖可通過增加機體蛋白的吸收來提高雞的生長速度,且對機體蛋白質的代謝無不良影響。血清中谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶是機體內重要的轉氨酶,在氨基酸的分解與生成代謝過程中起著十分重要的作用,同時又是反映肝臟健康狀況的重要指標。本試驗結果提示在臨床上使用川牛膝多糖時,對雞的肝臟無損傷或無不良影響。堿性磷酸酶是機體中催化磷酸脂水解的一組重要的酶,血清中堿性磷酸酶主要來自骨骼和肝臟,可反映動物機體骨骼與肝臟的生理機能狀況。本試驗結果表明,川牛膝多糖能夠通過升高堿性磷酸酶來促使體內鈣動用增強,從而促進骨骼生長,滿足雞快速生長的需要。
3.2 結論 川牛膝多糖能夠顯著提高雛雞血清抗體IgG、IgA、IgM的含量,對體液免疫具有積極作用,且對各項血液生化指標無不良影響,可將其作為一種新型免疫增強劑應用于畜禽養殖業。
[1]王書林,葉 冰,唐慶華,等.川牛膝最佳采收期的實驗研究[J].中國現代中藥,2006,8(3):15-16,31.
[2]劉鐘杰,許劍琴.中獸醫學[M].3版.北京:中國農業出版社,2002:236-237.
[3]申勁鋒,趙 俊.牛膝多糖的藥理研究進展[J].天津藥學,2006,18(1):59-61.
[4]呂小蘭,賴小平,郭 惠,等.牛膝多糖研究進展[J].實用臨床醫學,2005,6(2):137-138.
[5]杜念興.獸醫免疫學[M].2版.北京:中國農業出版社,2003,(2):47-51.
[6]蔣永芳,曠暉峰.慢性乙型病毒性肝炎患者血清HBV DNA水平和谷丙轉氨酶與肝組織病理的關系[J].重慶醫科大學學報,2005,30(4):578-580.
[7]夏中生,封偉賢,鐘 煒,等.3種添加劑對良鳳花雛雞生長性能及血液生化指標的影響 [J].畜牧與獸醫,2005,37(9):19-22.
[8]陳小鶯,張日俊.大豆生物活性肽對蛋雞生產性能和蛋白質代謝的影響及調控機理 [J].飼料工業,2005,26(23):33-36.
[9]侯慧麗,王慶豐,傅童生.提高豬肉風味的飼料對育肥豬血液生化指標的影響[J].養殖與飼料,2006,(8):14-16.
[10]李群道,單安山,馬得瑩,等.女貞子、五味子與寡糖配伍對肉雞抗氧化功能和血液生化指標的影響[J].動物營養學報,2005,17(1):45-48.