嗎替麥考酚酯對重型顱腦損傷兔血清ABAb水平的影響

李志濤,閆 華,薛 靜,劉 暌,只達石

(天津市環湖醫院,天津 300060)

研究證明,顱腦損傷后免疫功能會受到不同程度的影響[1,2]。抗腦抗體(ABAb)是由免疫系統針對腦組織抗原產生的自身抗體。2009年 11月 ～2010年 5月,我們觀察了嗎替麥考酚酯(MMF)對重型顱腦損傷大白兔血清ABAb水平的影響,并探討其意義。

1 材料與方法

1.1 材料 健康、成年新西蘭大白兔16只,雌雄不限,體質量(2.5±0.1)kg;20%氨基甲酸乙酯, MMF,兔ABAb試劑盒,動物立體定位頭架(DY-1型),電動磨鉆,液壓沖擊裝置。

1.2 造模與分組 經耳緣靜脈注入超濾的 20%氨基甲酸乙酯生理鹽水溶液 15～20 ml,動物麻醉后,俯臥位固定于動物立體定位頭架,保持頂骨左右位水平、前后位切線水平,采用液壓打擊法建立重癥顱腦損傷模型[3]。造模成功后隨即分為觀察組和對照組,各 8只。觀察組經胃管注入嗎替麥考酚酯 1 mg/kg、1次/d,連用3周;對照組經胃管注入等量生理鹽水,待其復蘇后放回籠內飼養。

1.3 兔血清ABAb檢測方法 兩組分別于造模前2 d及造模后3、7、14、21、28 d耳緣靜脈取血 4 ml,分離血清,-20℃保存。采用ELISA法檢測血清中的ABAb,按試劑盒說明書操作。

1.4 統計學方法 采用SPSS11.5軟件。組間比較采用t檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

兩組大白兔各時點血清ABAb水平比較見表1。觀察組造模后7 d達峰值(9.1 ng/ml),對照組造模后3 d達峰值(13.6 ng/ml)。兩組比較,P＜0.05。

表1 兩組大白兔各時點血清中ABAb水平比較(±s)

表1 兩組大白兔各時點血清中ABAb水平比較(±s)

注:與傷前2 d比較,＊P＜0.05;與對照組比較,#P＜0.05

組別ABAb(ng/ml)前2 d傷后3 d 7 d 14 d 21 d 28 d觀察組 10.0±3.2 7.1±1.8＊# 9.1±2.9＊# 5.5±1.4＊# 4.6±0.3＊# 4.2±0.5＊#對照組 10.0±3.2 13.6±0.2＊ 13.4±1.5＊ 12.1±0.3＊ 11.8±0.7＊ 11.5±1.5＊

3 討論

正常人血清ABAb濃度較低,機體不出現異常改變。ABAB的產生有以下途徑:①各種中樞神經系統疾病使腦組織及血腦屏障遭到破壞,腦組織抗原進入血循環,暴露于機體免疫系統,即可成為異常抗原而啟動免疫反應,產生 ABAb[4]。②呼吸道及消化道黏膜表面sIgA缺陷,使機體局部抗體的屏障作用減弱或消失,外界大量的異種蛋白有可能未經處理而進入機體,此時導致機體的自身免疫反應啟動,產生ABAb[5]。③A組 β溶血性鏈球菌感染導致機體自身免疫反應啟動,產生ABAb[6]。

本實驗證實,顱腦損傷后大白兔血清中ABAb水平明顯升高,增高的ABAb可通過已經破壞的血腦屏障攻擊腦組織,從而形成顱腦損傷后的自身免疫病。其可能的損傷機制有以下幾點:①腦脊液和血液中的ABAb可能與腦組織細胞上的自身抗原結合,形成免疫復合物后激活補體。補體活性片段可引起炎癥細胞趨化、血管通透性增高、及局部充血、水腫[7]。②ABAb可能參與腦組織的自身免疫過程,并使腦組織受到免疫性損傷;從而導致神經膠質細胞或神經元釋放S100b蛋白增加,刺激自身和小膠質細胞產生大量致炎因子和 NO,導致神經元功能障礙或死亡[7]。③ABAb可能參與腦組織的自身免疫過程,并使腦組織外傷后炎性反應加重,產生大量炎癥因子,其中的TNF、IL-2、IL-6可促進腦細胞凋亡。④ABAb可刺激小膠質細胞過表達IL-1。IL-1可促進谷氨酸(興奮性神經遞質)表達,同時抑制γ-氨基丁酸(抑制性神經遞質)表達,從而誘發癲癇。

MMF是一種選擇性抑制T、B淋巴細胞增生的新型免疫抑制劑,具有較獨特的免疫抑制效應,是次黃嘌呤單核苷酸脫氧酶非競爭性、選擇性和可逆性的抑制劑,在體內代謝成霉酚酸(MPA)。MPA抑制鳥嘌呤從頭合成途徑的限速酶次黃嘌呤單核苷酸脫氫酶(IMP-DH)的活性,阻斷鳥嘌呤核苷酸的從頭合成,使鳥嘌呤核苷酸耗竭,進而阻斷DNA合成[8]。本實驗結果顯示,免疫抑制治療MMF能有效延緩顱腦損傷后大白兔血清中ABAb升高的時間,并能有效降低血清中ABAb水平。其可能機制為:①MMF不但可以抑制T、B淋巴細胞因受有絲分裂原和同種異體抗原刺激所引起的增生,而且可抑制淋巴細胞活化抗原的表達,誘導其凋亡;還通過消耗鳥嘌呤核苷,抑制糖基化作用和一些黏附分子的表達,減少淋巴細胞及單核細胞的再循環[9],可抑制 B淋巴細胞產生抗體,從而在一定程度上抑制ABAb的產生。②體內實驗表明,MMF除顯著減少細胞浸潤及免疫復合物沉積外,還能強烈抑制細胞黏附分子的合成、表達,具有較強的抗炎作用。傷后給予MMF治療,可完全抑制腦組織傷灶中炎癥介質IL-6的產生,減少自由基生成,從而減輕凋亡腦細胞對腦組織及免疫系統的刺激,最終減少ABAb產生。

綜上所述,在顱腦損傷的早期應用免疫抑制治療,可減少ABAb的產生,從而減輕其對自身腦組織的攻擊作用,延緩病情惡化,為臨床救治重型顱腦損傷患者爭取時間。

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