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銀耳多糖的生理功效及其在畜牧生產中的應用

2011-02-12 18:14:44湖南農業大學動物科技學院楊永生鄧惠中羅佳捷賀建華
中國飼料 2011年21期
關鍵詞:小鼠功能研究

湖南農業大學動物科技學院 楊永生 鄧惠中 羅佳捷 賀建華*

銀耳多糖(TPs)是銀耳的主要功能成分,其種類較多,大多數是以α-(l→3)-D-甘露糖為主鏈的雜多糖,主要分為以下幾類:酸性雜多糖、中性雜多糖、酸性低聚糖、胞壁多糖、胞外多糖(馬素云等,2010;楊世海等,1993)。銀耳多糖主要是由甘露糖、木糖、葡萄糖醛酸、核酸糖、半乳糖和葡萄糖組成,還有少量的果糖和巖藻糖,其分子中有典型的乙酞基結構,所不同的只是各種銀耳多糖所含這些糖基的比例不同 (洪閣等,2010;姜瑞芝等,2006;Khondkar等,2002)。

1 銀耳多糖的提取

銀耳多糖是從銀耳子實體、孢子、發酵液中分離純化的帶有分支的雜多糖。銀耳多糖的主要提取方法有水提取法、堿提法、酶提法等。崔蕊靜等(2004)通過對銀耳多糖的提取工藝的研究表明,酶法浸提效果最佳,堿浸提法其次,兩者均優于熱水浸提法。并認為酶法提取銀耳多糖溶液的最適條件為:料水比1∶50,加入1%的果膠酶,置于45℃水浴鍋中恒溫酶解45 min,然后迅速升溫至98℃滅酶,并保溫浸提60 min。黃秀錦(2008)試驗表明,酶法提取銀耳多糖溶液的最適條件為:料水比1∶60,加入0.7%的果膠酶,酶解50 min,浸提時間 60 min,通過 DEAE-Sepharose Fast Flow和SephadexG-200柱層析后可得到純度較高的TPP2多糖。

王玢(2009)用堿法提取銀耳多糖液的研究表明,在提取過程中,各因素對銀耳多糖液提取的影響依次為:溫度>pH值>時間>料液比,得出的最優的提取工藝條件為:溫度90℃,pH值9,時間4 h,料液比1∶100;此條件下,銀耳多糖得率為27.4%。

何偉珍和吳麗仙(2008)對銀耳采用水煮提取法,得到的粗產品采用季銨鹽(CTAB)沉淀法純化,純化后精品中銀耳多糖的含量大幅提高。

銀耳多糖的各項提取、分離工藝到還不是十分的純熟,還有待進一步優化,以使其更利于工業化生產。

2 銀耳多糖的免疫作用

銀耳多糖能維持機體免疫系統的動態平衡,當機體免疫系統受損或功能低下時,能夠刺激各種免疫細胞成熟、分化和繁殖,使機體的免疫系統恢復平衡。銀耳多糖主要是通過調節體液免疫、細胞免疫和免疫因子來影響機體免疫的。

林志彬(1985)研究報道,腹腔注射200 mg/kg銀耳多糖可使正常小鼠脾臟重量明顯增加。徐文清(2006)通過小鼠碳粒廓清實驗、溶血素實驗,表明銀耳孢子多糖對由化療藥環磷酰胺造成的免疫功能低下小鼠的網狀內皮系統吞噬功能具有明顯的激活、增強作用,銀耳孢子多糖能明顯增加小鼠溶血素的含量,并能拮抗環磷酰胺引起的免疫功能抑制,說明銀耳孢子多糖可提高免疫功能低下小鼠的體液免疫能力。

銀耳多糖可通過對IL-2、IL-6和TNF-αm-RNA的表達來促進這些細胞因子的生成(崔金鶯和林志彬,1996;馬莉和林志彬,1992)。胡庭俊等(2005)應用反向離子對高效液相色譜法測定小鼠脾臟淋巴細胞蛋白激酶C(PKC)活性,銀耳多糖能夠提高PKC的活性。而PKC可激活淋巴細胞中的cAMP反應元件結合蛋白,并使其與IL-2的啟動子結合,進而促進IL-2表達 (Solomou等,2001)。IL-2具有廣譜免疫增強活性,能促進細胞毒性T前體細胞分化為細胞毒性T細胞,激活B細胞增殖分化分泌抗體,并促進自然殺傷細胞功能及干擾素釋放,所以血清IL-2水平的提高也直接促進了淋巴細胞轉化率(LTR)的升高(Granelli-Piperno等,1984)。銀耳多糖較抗生素能夠提高生長肥育豬各階段LTR、IL-2和IgG水平,對免疫功能有改善作用(文敏等,2010)。崔金鶯和林志彬(1996)研究表明,100 mg/L銀耳多糖可促進ConA誘導的脾細胞培養上清IL-2的活性、增強LPS活化的小鼠腹腔巨噬細胞產生IL-6的能力,25 mg/L和100 mg/L明顯增強小鼠腹腔巨噬細胞TNF-α活性。銀耳孢子發酵物(TSF)同樣具有提高豬LTR、IL-2、Et和豬瘟抗體滴度的功能(傅祖良等,2009)。

3 銀耳多糖的抗氧化作用

體內代謝產生和外源性因素產生的自由基均可誘導細胞衰老和凋亡,而銀耳多糖能清除自由基,具有較好的抗氧化作用(Chen,2010;吳瓊等,2009;Inoue 等,2004)。 劉培勛等(2005)對從銀耳孢子發酵物中用堿液提取得到的4個多糖組分的抗氧化活性進行研究,用清除羥自由基實驗、清除超氧陰離子自由基實驗、抗H2O2誘導的紅細胞氧化溶血實驗考察4個多糖組分的抗氧化活性,證明4個多糖組分均具有一定的清除羥自由基、氧自由基和抑制紅細胞溶血的活性的作用。銀耳多糖對D-半乳糖致衰老模型小鼠心肌細胞具有抗凋亡和抗氧化作用,且這種作用具有劑量相關性(曲丹等,2009)。

銀耳多糖能夠提高機體超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)等抗氧化酶的活力,從而促進機體內自由基的清除,減輕脂質過氧化發生,保護生物膜,起到一定的抗氧化、抗衰老的作用(蔡東聯等,2008)。顏軍等(2006)通過體外化學模擬系統測定銀耳多糖消除羥自由基、超氧陰離子自由基以及防止油脂質氧化的性能,試驗結果表明,銀耳多糖清除羥自由基的作用明顯,50%清除量為0.112 mg/mL,對超氧自由基的清除能力隨著多糖濃度而升高,50%清除量為0.264 mg/mL,油脂抗氧化性能介于維生素E和維生素C之間。

4 銀耳多糖對腸道微生物群落結構的影響

正常微生物是動物胃腸道中不可缺少的組成部分,通常又分為有益微生物(如雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬等)和有害微生物群 (如產氣莢膜梭菌屬、葡萄球菌屬等),而腸道菌群與動物的健康和正常生長有著密切關系。有益微生物菌群通常覆蓋在胃腸道黏膜上皮表面,并能阻止病原微生物在腸道黏膜組織上的定殖。據目前的研究結果來看,銀耳多糖具有與果寡糖、甘露寡糖、木糖的類似作用,能直接到達后腸作為雙歧桿菌和乳酸桿菌特異性的營養物質,促進腸道理想微生物菌群的形成,增強動物對外源性病原菌的抵抗能力,從而改善腸道的健康狀況。

吳子健等(2008)研究表明,銀耳多糖添加為3~7 g/L時可促進嗜酸乳桿菌L101的增殖,其中5 g/L為最適添加量,在發酵16 h后,活菌數可達8.13×108cfu/mL,而當劑量大于9 g/L添加量會抑制菌體的增殖。鄒健(2006)、傅祖良等(2009)對斷奶仔豬的研究發現,銀耳多糖能夠促進腸道內乳酸桿菌和雙歧桿菌的增殖,抑制大腸桿菌生長,減少仔豬腹瀉,并能增加腸絨毛高度,降低隱窩深度,有利于動物的健康和促進養分的吸收,從而提高生產性能。

5 銀耳多糖在畜牧生產中的應用

目前,甘露寡糖、果寡糖等在畜牧生產中的應用已經取得了較好的效果。銀耳多糖在豬生產中研究應用有少量報道,而在家禽和反芻動物生產中的應用鮮見報道。

文敏等(2010)試驗表明,銀耳多糖可以提高生長肥育豬各階段的生產性能,其促生長效果優于抗生素,并且還具有提高免疫功能和改善肉質的作用。吳玉玲(2007)試驗表明,0.4%銀耳多糖對斷奶仔豬的促生長效果與喹烯酮加高銅組相當,并且與哇烯酮加高銅組相比,銀耳多糖可以增強細胞免疫與體液免疫功能,認為銀耳多糖促進斷奶仔豬的生長可能與增強細胞免疫功能和促進IGF-1的分泌有關。鄒鍵(2006)研究結果表明,銀耳多糖能改善斷奶仔豬生產性能,但當添加到一定量時出現負效應(0.5%);銀耳多糖最適添加量為0.4%,可減少斷奶應激,降低腹瀉率,促進結腸和盲腸中雙歧桿菌與乳酸桿菌的增殖而抑制大腸桿菌的繁殖,促進腸黏膜的生長,提高斷奶仔豬機體抗氧化能力。

對生長育肥豬而言,銀耳多糖對體重低于20 kg的促生長的效果略低于抗生素 (文敏等,2010;傅祖良等,2009)。這說明銀耳多糖在改善腸道菌群和免疫力方面存在一個適應過程,不如抗生素效果直接快速。然而當體重高于20 kg時,銀耳多糖的促生長效果超過抗生素。

上述研究結果都表明,銀耳多糖能改善動物的生產性能、腸道黏膜形態、腸道菌群和機體免疫,并存在劑量相關效應,當添加量為0.4%時效果最佳。

6 小結

植物多糖因其獨特的生物學功能,具有廣泛的應用前景。目前雖然對銀耳多糖有了些相關的研究,但主要是在鼠、兔等動物上的機體免疫方面的研究。銀耳多糖能改善畜禽生產性能,增強畜禽免疫力,添加到飼料中可以在一定程度上取代飼用抗生素而不影響動物生產性能,隨著銀耳多糖的提取工藝的改進,其在畜牧生產中的應用潛力將進一步體現。

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