系統性紅斑狼瘡患者血清瘦素與IL-10、IL-12水平的相關性

劉進軍 劉健民 侯小平 (河北北方學院微生物教研室，河北 張家口 075000)

系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種累及多器官、多系統的復雜的自身免疫性疾病，主要以B淋巴細胞異常表達，免疫功能紊亂，并過度產生多種自身抗體為特征。其病因目前仍不完全清楚，可能是在遺傳因素的基礎上，受環境因素刺激，促發異常的免疫應答，持續產生大量的致病性自身抗體和免疫復合物，免疫復合物廣泛沉積于組織器官，從而引發相應的病理損害。近來研究表明SLE的發生與發展與許多細胞因子的水平紊亂密切相關〔1〕，這些細胞因子網絡失衡導致免疫系統調節功能失調與許多免疫性疾病的關系是目前正在研究的熱題。為探討瘦素及相關細胞因子在系統性紅斑狼瘡疾病中的相互關聯性，我們選擇解放軍251醫院住院SLE患者及健康體檢者，測定其血清中瘦素及IL-10，IL-12水平，分析其與SLE發生、發展及病情的相關性。

1 對象與方法

1.1 研究對象 以2009年7月至2010年8月來中國人民解放軍第251醫院腎病風濕科門診與病房的確診為SLE為SLE患者組，共28例，診斷標準為1982年美國風濕病學會制定的SLE分類標準，其中男性6例，女性22例;年齡17～68歲，平均年齡(34.7±10.70)歲;體重指數(BMI)(21.43±1.77)kg/m2。按SLE疾病活動指數(SLE-DAI)〔2〕積分，分為非活動組(0～10分)21例，活動組(≥10分)7例。以在該院正常體檢者21例為正常對照組，其中男4例，女17例;年齡25～66歲，平均年齡(33.4±12.10)歲;BMI(21.78±1.80)kg/m2。兩組成員的年齡、性別、BMI均衡，具有可比性。排除心、肝、腎等疾病及其他自身免疫性疾病。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 SLE患者組及正常對照組均于晨8時，空腹采集靜脈血4 ml，37℃ 溫育 2 h，3 000 r/min 10 min，分離血清，置－40℃冰箱保存待測。

1.2.2 SLE-DAI內容 抽搐(8分)、精神異常(8分)、腦器質性癥狀(8分)、視力下降(8分)、顱神經受累(8分)、狼瘡頭痛(8分)、腦血管意外(8分)、血管炎(8分)、關節炎(4分)、肌炎(4分)、管型尿(4分)、血尿(4分)、蛋白尿(4分)、膿尿(4分)、新出皮疹(2分)、脫發(2分)、發熱(1分)、血小板減少(1分)、白細胞減少(1分)。根據患者前10d內是否出現上述癥狀定分，凡總分在10分或10分以上者則考慮為疾病活動。

1.2.3 血清瘦素水平及IL-10，IL-12檢測 均采用ELISA法檢測瘦素及IL-10，IL-12水平，試劑盒由美國ADLITTERAM DIAGNOSTIC LABORATORIES提供。

2 結果

2.1 血清瘦素水平檢測結果 SLE患者組血清瘦素水平〔(62.7 ±9.71)ng/ml〕較正常對照組〔(53.5 ±7.82)ng/ml〕顯著增高(t=2.71，P＜0.01)。SLE病情活動期瘦素水平與非活動期比較無差異〔(64.1±10.23)，(62.2±9.54)ng/ml，t=0.686，P ＞0.05〕。

2.2 血清IL-10、IL-12水平檢測結果 SLE患者組血清IL-10水平明顯高于正常對照組〔(98.34±10.11)，(90.52±9.51)pg/ml，t=2.08，P ＜0.05〕;而血清 IL-12 水平則明顯低于正常對照組〔(122.2±12.3)，(198.8±16.20)pg/ml，t=2.67，P ＜0.05〕。

3 討論

SLE是一累及多器官、反復發作的自身免疫性疾病，其致病機制目前尚未完全闡明，可能涉及自身免疫功能調節紊亂及細胞因子網絡的失衡，我們主要研究后者的失衡是否是前者的必然結果。初始CD4+T細胞接受抗原刺激后可分化為Tho細胞，Tho繼續分化為三種Th細胞亞群，即Th1、Th2、Th3細胞，它們分泌不同的細胞因子，發揮不同的免疫效應。這些細胞因子不僅決定每個亞群的免疫效應功能，還調控各亞群的形成和擴增。IFN-γ是Th1細胞分泌的主要細胞因子，Th1細胞可通過釋放IFN-γ和IL-2、IL-12，抑制 Tho細胞向 Th2分化和 Th2型細胞因子的產生，主要誘導細胞免疫，活化巨噬細胞與細胞毒細胞，與器官特異性自身免疫性疾病有關，如果沒有調控機制會導致細胞免疫功能提高乃至亢進。IL-4、IL-6、IL-10由Th2細胞亞群分泌，Th2細胞可通過釋放IL-4、IL-10抑制Tho細胞向Th1分化和Th1型細胞因子的產生，主要介導體液免疫，促進B淋巴細胞活化，誘導IgG1的產生，與自身抗體介導的系統性自身免疫性疾病有關，同樣如果沒有調控機制會結果導致體液免疫功能提高。Th1和Th2的相互調節及其彼此的動態平衡，在維持機體的正常免疫功能中、在疾病的抗感染免疫中及免疫性疾病的調節中起著至關重要的作用。

IL-10主要由Th2細胞、單核細胞、內皮細胞等產生，可抑制Th1細胞因子(IL-12、IFN-γ)的產生，同時具有廣泛的免疫刺激作用，能促進B淋巴細胞、肥大細胞、胸腺細胞分化和發育。其免疫功能表現在:抑制巨噬細胞激活及其抗原呈遞功能從而直接或間接抑制T淋巴細胞增生，從而抑制Th1細胞因子(IL-12、IFN-γ)分泌;同時，IL-10又能刺激 SLE患者外周血 B細胞產生抗DNA自身抗體;抗DNA抗體反過來又能刺激單個核細胞分泌IL-10增加，如此惡性循環導致SLE病情進展，故IL-10的增多可以造成SLE病人的抗-dsDNA抗體的滴度增高，加速機體的組織損傷。另外有研究表明IL-10的水平與SLE的活動性呈正相關，IL-10越高則SLE疾病活動指數SLEDAI評分越高〔3〕，因此IL-10可以衡量SLE活動性。

IL-12主要由單核-巨噬細胞、B細胞產生，可促進Th0細胞向Th1細胞分化，分泌IL-2、IFN-γ;抑制Th0細胞向TH2細胞分化和IgE合成。其主要功能就是誘導早期輔助性T淋巴母細胞分化為Th1細胞，并促進Th1細胞增殖。有關學者研究表明IL-12水平與SLE-DAI呈負性相關關系，IL-12越高則SLE疾病活動指數SLE-DAI評分越低〔4〕，因此IL-12水平可作為評價SLE患者病情活動程度的參考指標。本研究結果說明細胞因子分泌異常在SLE的發病中起重要作用。

瘦素是一種主要由白色脂肪細胞合成和分泌的多肽激素，含有167個氨基酸殘基。人類的肥胖基因位于第7號染色體長臂3區1帶3亞帶(7q31.1)，由3個外顯子和2個內含子組成，編碼含167個氨基酸的蛋白質，其N端含有21個氨基酸的分泌信號肽，血循環中的瘦素為146個氨基酸的多肽類激素，分子量為16 kD〔5〕。瘦素分泌與體脂、性別、遺傳因素等有關〔6〕。瘦素是一個具有多種效應的細胞因子，具有促進能量消耗、調節機體能力平衡、免疫系統的促炎癥性作用、抵抗β細胞分泌胰島素、維持生殖功能和骨礦量的等功能。此外，在免疫系統調節過程中瘦素可能參與自身免疫性疾病發生、發展〔7〕，主要是由于瘦素可以刺激Th1細胞的增殖及細胞因子分泌，且瘦素受體也是Ⅰ類細胞因子受體家族。本研究結果說明血清瘦素水平升高與SLE病情活躍與否無明顯相關性，而與患者自身的免疫功能紊亂有關。高水平的血清瘦素導致對免疫系統的促炎癥性作用明顯增強，最終導致全身組織損傷和免疫功能嚴重紊亂。

本研究中，SLE患者血清IL-12的水平較正常對照組低，是由于IL-10分泌增多而抑制Th1細胞因子的分泌，從而使IL-12水平降低。而SLE患者瘦素水平較正常對照組明顯升高，可能原因是由于機體為了達到功能上的平衡，為刺激Th1細胞的大量增殖和分化，從而抵抗Th2的細胞因子IL-10的分泌，推測瘦素與Th1/Th2細胞因子的產生之間存在相互作用，瘦素可促進Th1型細胞因子的產生，抑制Th2型細胞因子的分泌。這為研究SLE病理機制提供新的理論依據，也是我們繼續研究的方向。

1 陳桂東，杜立華，王 鵬.細胞因子與系統性紅斑狼瘡〔J〕.包頭醫學院學報，2007;24(5):548-50.

2 葉任高，陸再英.內科學〔M〕.第6版.北京:人民衛生出版社，2004:896.

3 何水明.白細胞介素-10在系統性紅斑狼瘡中的表達及意義〔J〕.醫學新知雜志，2007;17(5):270-1.

4 張紅娟，王宗發.SLE患者分泌IL-12水平體外研究〔J〕.中國皮膚性病雜志.2001;15(4):223-4.

5 許憶新，李愛美.肺結核患者血清TNF-α、瘦素、脂聯素檢測的研究〔J〕.實用預防醫學，2007;14(3):690-2.

6 朱 鳳，徐貴法.瘦素的分泌及其影響〔J〕.中國公共衛生，2004;20(1):49-50.

7 劉進軍，劉開揚，劉 芳.胰島素樣生長因子-1、瘦素與Graves病相關性研究〔J〕.中國現代醫學雜志，2007;17(18):64-6.