Trem－1在炎癥反應中的作用機理研究

周 丹

(廣東省深圳市第二人民醫院，廣東 深圳 518035)

Trem－1又稱髓樣細胞觸發受體，于2000年被Bonchon等人發現。髓樣細胞觸發受體位于人6號染色體，屬免疫球蛋白超家族成員。髓樣細胞觸發受體對炎癥反應有一定影響作用，成為近年來醫學科研的研究課題。本文根據臨床分析，研究了髓樣細胞受體在炎癥反應中的作用機理。

1 資料與方法

1.1 一般資料:以10例足月自然分娩胎兒作為對照組，抽取其臍帶血進行研究。對照組男4例，女6例。另外選取13例患有全身炎癥反應綜合癥的新生兒作為實驗組。抽取其外周血5mL進行研究。實驗組男7例，女6例。兩組患兒在性別方面無顯著差異(P＞0.05)，具有可比性。實驗試劑采用Trizol試劑(Takara)、鼠抗人 Trem －1抗體(Santa Cruz)、RT－PCR兩步法試劑盒、生物素標記山羊抗鼠IgG(Santa Cruz)、ECL發光劑(Pierce)、鼠抗人生物素標記GAPDH抗體(Santa Cruz)等。

1.2 方法:對血液樣本進行以下操作，為實驗準備材料:分離單核細胞后置于－196℃下保存備用;提取收集細胞總RNA;采用三去污法提取細胞總蛋白并對濃度進行測定，置于－20℃冰箱中保存備用。RT－PCR按照試劑盒中附帶的操作步驟進行;PCR反應條件如下:94℃變性3min后，開始循環過程。94℃30s，56℃退火30s，72℃延伸1min。35個循環后，最后72℃延伸10min。內參照PCR擴增反應體系與上述過程一致。在紫外光環境下，將電泳結果利用激光掃描進行電腦存儲，根據Trem－1mRNA與β－actinmRNA吸光度比值進行半定量分析。采用鼠抗人Trem－1抗體、鼠抗人生物素標記GAPDH抗體、ECL發光劑、生物素標記山羊抗鼠IgG等試劑進行Trem－1蛋白水平的表達，將結果進行記錄分析。

1.3 統計學處理:所有數據進行計算機輸入，采用SPSS18.0軟件建立數據庫，以均數±標準差表示，采用T檢驗進行統計學分析，以P＜0.05為用統計學意義。

2 結果

實驗組與對照組中單核細胞RT－PCR顯示Trem－1基因產物為一條約560bp長度的條帶，預期長度為564bp，基本一致。實驗組中Trem－1蛋白和Trem－1RNA表達均高于對照組(詳細情況見表1)。經SPSS18.0軟件統計分析，兩組間差異有統計學意義。

表1 兩組Trem－1mRNA表達對比

3 討論

中性粒細胞和單核細胞可受Trem－1誘導分泌TNF－α、IL－1β、干擾素γ等促炎細胞因子，中性粒細胞還可釋放髓過氧化酶。Trem－1在細胞內部可誘發鈣離子轉移，使細胞表面信號相關激酶和磷脂酶C絡氨酸磷酸化，增強或放大炎性反應，使其發生過度炎性反應［1］。Bouchon等人研究發現，存在某些病菌感染的腹腔灌洗液、感染處組織樣本、病原體培養液中均能檢測到sTrem－1有不同程度的上調。其研究的樣本包括金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、曲霉等［2］。我國專家對部分胸腔積液患者采用熒光標記法以及酶聯免疫吸附測定法對細胞表面的Trem－1水平進行研究后發現，肺炎患者的胸腔積液中，Trem－1的表達水平要比結核性胸膜炎、肺癌高，其研究結果認為Trem－1可作為對胸腔積液病因的輔助指標［3］。

國外一些研究資料表明，在單核細胞Trem－1的激活參與了反應微生物攻擊、宿主防御的早期誘導和適應性免疫反應［4］。Trem－1的表達無法加強其自身免疫性疾病，但可以對炎性因子的合成過程進行激發。在炎癥發生發展的過程中，促炎細胞因子和抗炎細胞因子之間發生相互作用，對感染轉歸的結果形成影響［5］。本組案例中，實驗組的 Trem －1mRNA，Trem －1蛋白表達均高于對照組，且蛋白表達有一定的規律性。說明Trem－1參與了炎癥發生發展的所有過程，并對其產生了重要作用。有研究結果顯示，阻斷內毒素激活經由Trem－1的通路，不能完全阻斷NF－kb激活的炎癥介質釋放［6］。所以在早期要對Trem－1進行調控，防止促炎因子過度釋放導致不良臨床現象的發生。

［1］辛維政.新生兒全身炎癥反應綜合征時TREM－1表達的實驗研究［J］.中國優生與遺傳雜志 ，2009，17(08):13－14.

［2］羅凌.人工合成TREM－1多肽對膿胸大鼠炎癥反應的干預效應［J］.廣西醫科大學 ，2009.

［3］閔安杰，楊興華，張自功，等.TREM－1在脆弱類桿菌脂多糖誘導單核細胞炎癥反應中的作用［J］.中華外科雜志，2007，01(09):18－19.

［4］L Richeldi，M Mariani，M Losi.Triggering receptor expressed on myeloid cells:role in the diagnosis of lung infections［J］.Eur Respir，2004，24:247 －250.

［5］梁志海，唐國都.髓樣細胞觸發受體1在炎性反應中的作用［J］.醫學綜述，2009，15(18):2747－2748.

［6］劉娜，龍堯.髓樣細胞觸發受體－1在疾病中的作用［J］.中國醫藥導報，2010，01(01):34－35.