固相萃?。瓪庀嗌V法測定調味品中的9種防腐劑

海華，蘭希，李光浩

（大連民族學院a.生命科學學院;b.現代教育中心，遼寧大連 116605）

固相萃?。瓪庀嗌V法測定調味品中的9種防腐劑

海華a，蘭希a，李光浩b

（大連民族學院a.生命科學學院;b.現代教育中心，遼寧大連 116605）

建立了一種簡單、快速、準確的固相萃取－氣相色譜法，用于分離和測定調味品中常見的9種防腐劑（山梨酸、苯甲酸、脫氫乙酸、6種尼泊金酯類），樣品經C18固相萃取柱凈化，氣相色譜測定，外標法定量。9種防腐劑在0.10×10－4～1.00×10－4g·mL－1范圍線性良好，相關系數為0.991 6～0.998 7，回收率為90.72%～109.43%，相對標準偏差為1.25%～4.10%。方法凈化效果好，可以滿足日常食品中多種防腐劑的檢驗要求。

防腐劑;調味品;固相萃取;氣相色譜

防腐劑是在食品生產、加工和存儲過程中添加的，以達到延長食品保存期限的化合物。過量攝入會加重人的肝、腎負擔［1］，我國對這些防腐劑的使用量和殘留量都有嚴格的規定［2］。因此，建立一種簡單、快速，同時檢測多種防腐劑的方法，對實現行業監管意義重大。目前，測定防腐劑的方法主要有高效液相色譜法［3－6］、毛細管電泳法［7］、氣相色譜法［8－13］等。氣相色譜法由于成本低、操作簡單，成為近年來迅速發展的檢測技術，也得到了越來越廣泛的應用，但目前氣相色譜法測定的防腐劑種類少，分離時間過長，如有采用毛細管氣相色譜內標法同時測定食品中8種防腐劑的時間達20分鐘以上［14］。本研究采用毛細管氣相色譜，對實際樣品進行超聲和固相萃取處理，利用色譜升溫程序能夠在8min內分離和檢測出9種食品中常見的防腐劑（山梨酸、苯甲酸、脫氫乙酸和6種尼泊金酯類）。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑

1.1.1 儀器

GC－2010氣相色譜儀（日本島津）;GHL－300氫氣發生器、GNB－300氮氣發生器和GAX－2000空氣發生器（北京匯佳精儀公司）;12管固相萃取儀（迪馬公司）;Milli Q超純水儀;毛細管柱: Rtx－1型，柱型15 m×0.53 mm i.d.×1.5 μm。1.1.2試劑

山梨酸（99%）、苯甲酸（97%）、脫氫乙酸（98%）、對羥基苯甲酸甲酯（99%）、對羥基苯甲酸乙酯（99%）、對羥基苯甲酸丙酯（99%）標準品均為分析純（Aldrich Chemical Company.Inc.USA）;對羥基苯甲酸異丙酯（99%）、對羥基苯甲酸異丁酯（99%）、對羥基苯甲酸丁酯標準品（99%）均為分析純（Tokyo Kasei Kogyo Co.，Ltd.Japan）;乙醇為色譜純（Honeywell International Inc.USA）;實驗用水為超純水。

1.2 樣品的前處理與凈化

每種樣品稱取5 g，用鹽酸調節至樣液pH值為4，超聲30 min，用水定容至25 mL;取C18固相萃取小柱加3 mL甲醇活化，再加3 mL水平衡小柱，然后取經上述步驟處理過的樣品清液10 mL，以1.0 mL·min－1流速通過萃取柱，用3 mL超純水清洗萃取柱，棄去清洗液。最后用3 mL乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，供氣相色譜分析。

1.3 氣相色譜條件

進樣口溫度為220℃;檢測器溫度為290℃;載氣流速為10 mL·min－1;柱溫:起始100℃，以20℃·min－1升至150℃，保持1 min;再以10℃· min－1升至190℃，保持1 min;再以50℃·min－1升至280℃，保持1 min。不分流進樣方式，進樣量為1 μL。9種防腐劑的峰譜如圖1。

圖1 9種防腐劑標準品色譜圖

2 結果與討論

2.1 SPE柱的選擇和洗脫條件的優化

對于醬油和陳醋樣品，用液液萃取容易產生乳化現象，使用固相萃取技術可以防止乳化。選擇6種固相萃取小柱，分別測定其對9種防腐劑的回收率，通過比較發現，CleanertTM C18小柱總體回收率最高。

固相萃取中，使用的洗脫劑的pH值不同，樣品回收也會受到影響。經實驗發現，pH值為4時回收最好。為了進一步提高固相萃取的效果，還對上樣和洗脫時溶液的流速進行了優化，最后確定流速為1.0 mL·min－1，既可在較短時間內將樣品溶液通過萃取柱，又可保證被分析組分不受損失。

2.2 定性與定量測定

對9種防腐劑的混合標準溶液和實際樣品進行分析，通過對照保留時間，并經過添加實驗增加峰高的方法對9種防腐劑的色譜峰進行定性。

氣相色譜定量分析采用外標峰面積法，在確定的最優氣相色譜條件下，對質量濃度分別為100，80，60，40，20，10 μg·mL－1的標準溶液進行測定，經多次測量后取平均值，得出幾種防腐劑的擬合標準曲線見表1。

表1 9種防腐劑的標準曲線和相關系數

2.3 精密度、回收率和檢測限

取5種食醋樣品，按每克添加100 μg標準品測定防腐劑的回收率，每個樣品測定5次。用相對標準偏差RSD表示精密度，9種防腐劑分別小于4.10%、3.54%、3.24%、1.25%、3.20%、2.42%、1.87%、2.89%、3.20%。樣品的回收率結果見表2，介于90.72%～109.43%。以基線噪聲的3倍作為檢出限，9種防腐劑的質量濃度分別為0.343，0.272，0.504，0.332，0.317，0.292，0.299，0.282，0.286 μg·mL－1。

表2 9種防腐劑的食醋添加回收率%

2.4 實際樣品測定

從超市中選購5種常見醬油進行測定，每種樣品稱取5 g，用鹽酸調節pH值為4，超聲30 min，用水定容至25 mL;C18柱3 mL甲醇活化，3 mL水平衡后，取處理過的樣液10 mL，以1.0 mL·min－1流速過柱，3 mL超純水清洗，最后用3 mL乙醇洗脫，對洗脫液進行氣相色譜測定。其防腐劑的測定結果見表3，每種樣品中都含有多種防腐劑，但含量均未超過GB2760規定的國家標準。

表3 5種醬油樣品中防腐劑的質量分數μg·g－1

3 結論

研究表明，對于具有復雜基質的調味品樣品，采用超聲、稀釋、調節pH值和固相萃取凈化，能更有效地富集待檢物。對于寬沸程樣品，采用程序升溫，可使不同沸點的組分在適當的溫度下得到分離，提高柱效，縮短分離時間。本研究中9種防腐劑在8 min內就得到了很好的分離。該方法快速、簡單，能夠很好地滿足日常食品中多種防腐劑的測定要求。

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Determination of Nine kinds of Preservatives in Condiment by SPE－GC

HAI Huaa，LAN Xia，LI Guang－haob
（a.Department of Life Sscience;b.Modern Educational Technology Center，Dalian Nationalities University，Dalian Liaoning 116605，China）

A simple，rapid，and accurate method was presented for the separation and determination of the 9 kinds of antiseptic（sorbic acid，benzoic acid，dehydroacetic acid and 6 kinds of p－hydroxybenzoate）in the condiment by using a solid phase extraction following gas chromatography.The samples were purified with C18 solid phase extraction columns.Then we used the GC method for measurement and external standard method for quantitative.The 9 kinds of antiseptic show good linear at the range from 0.10×10－4to 1.00×10－4g·mL－1and the linear correlation coefficient is between 0.9916 and 0.9987.In the concentration 100μg·g－1，the recovery was 90.72%～109.43%and the relative standard deviation is 1.25%～4.10%.This simple，rapid method was suitable for the determination of preservatives in the condiment，thus it can meet inspection requirements of a variety of preservatives in food.

preservatives;condiment;SPE;GC

0657

A

1009－315X（2011）03－0253－03

2010－10－26;最后

2011－03－30

海華（1977－），女，遼寧營口人，講師，主要從事食品分析研究。

李光浩（1953－），男，遼寧鐵嶺人，教授，碩士生導師，主要從事環境檢測與評價研究，E－mail:lghao@dlnu.edu.cn。

（責任編輯 鄒永紅）