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莖部長度為21\\27\\29 bP的shRNA表達載體構建

2010-12-31 00:00:00劉西梅鄭新民劉中華
湖北農業科學 2010年9期

在各種類型的細胞中,RNA干擾(RNA interference,RNAi)已被證明是抑制特異性靶標基因的有效工具。在哺乳動物細胞中主要應用兩種技術來實現RNAi,一種方法是向哺乳動物細胞直接轉染人工合成的長度為19 bp、并且3‘末端具有兩個突出堿基的小干擾RNA(Small interfering RNA,siRNA);另一種方法是利用表達質粒或者病毒載體在哺乳動物細胞中表達小發夾RNA(Smail hairpin RNA,shRNA);前者只能引起短暫的干擾效應,而后者可以獲得穩定而持久的基因沉默。shRNA結構上一般包括相互配對的正義鏈和反義鏈,中間由Loop環相連。

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