Rb基因在胃癌中的表達及臨床意義

[摘要] 目的 探討視網膜母細胞瘤(Rb)基因在胃癌中的表達及在胃癌發生、發展中的作用。方法 應用免疫組化SP法檢測122例胃癌組織中Rb的表達情況并分析其在胃癌中的作用。結果 Rb在胃癌中低表達，Rb陰性時具有明顯的遠處轉移傾向。結論 Rb與胃癌的發生、發展以及侵襲、轉移有關，檢測Rb的表達將對胃癌的早期診斷、預后判斷有一定指導意義。

[關鍵詞] 胃癌;Rb;免疫組織化學

[中圖分類號] R735.2[文獻標識碼] A[文章編號] 1673-9701(2010)14-35-02

Retinoblastoma Gene Expression in Gastric Carcinoma and Its Clinical Significance

CHEN Yan1JIANG Liangde2WANG Jianping2

1.The Central Hospital of China Aerospace Corporation，Beijing 100049，China;2.Chengde Medical College，Chengde 067000，China

[Abstract] Objective To investigate the retinoblastoma expression in gastric carcinoma and its clinical significance. Methods Immunohistochemistry(S-P method)was used to detect the retinoblastoma expression in gastric carcinoma(n=122). Results The retinoblastoma expression was lower in gastric carcinoma. The retinoblastoma expression was correlated with the invasion and metastasis of gastric carcinoma. Conclusion Retinoblastoma may be related to the invasion and metastasis of gastric carcinoma. The detection of retinoblastoma expression is of some significance in the early diagnosis and assessment of its prognosis.

[Key words] Gastric carcinoma;Retinoblastoma;Immunohistochemistry

胃癌在我國是最常見的惡性腫瘤之一，惡性度高，預后差，死亡率居惡性腫瘤首位。轉移是胃癌病人死亡的主要原因，也是腫瘤治療中的一大難題，已有許多研究表明視網膜母細胞瘤(retinoblastoma，Rb)基因與許多腫瘤的侵襲和轉移有密切關系，但在胃癌中的研究較少。本研究應用SP免疫組化檢測Rb在胃癌的表達，結合臨床相關資料，探討Rb基因的表達在胃癌中的作用。

1材料與方法

1.1標本來源

收集我院2003年1月～2008年5月手術切除的胃癌標本，本組胃癌標本122例，均經病理檢查重新證實。122例患者中，男性80人，女性42人。所選患者術前均未經放、化療;胃癌病理類型按高分化、中分化、低分化、未分化型分類。

1.2試劑與方法

Rb鼠抗人單克隆抗體購自福州邁新生物技術開發公司。采用免疫組織化學SP法，操作步驟按照試劑盒說明嚴格進行。抗體設陽性及陰性對照，Rb以已知乳腺癌陽性組織為陽性對照，陰性對照以正常血清代替一抗，陰性對照始終未著色。

1.3結果判定

Rb陽性判斷標準:參照FROMOWITZ等級方法進行，每張切片隨機選取10個高倍視野，計數染色陽性細胞，取平均值，計算陽性細胞百分率。按著色程度分為:基本未著色為0分;著淺色為1分;中度著色為2分;強陽性著色為3分。按陽性細胞百分率分為:染色細胞數≤5%為0分;6%～25%為1分;26%～50%為2分;>50%為3分。將每張切片著色強度與著色細胞百分率得分相加，為其最后得分。其中:0～1分為陰性(-)，2～3分為弱陽性(+);4～5分為中度陽性(++);≥6分為強陽性(+++)。

1.4統計學處理

應用SPSS11.5for windows統計軟件包做統計學處理，顯著性水準取α=0.05，計數資料采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 Rb在胃癌中的表達

Rb表達陽性的腫瘤細胞呈棕黃色或棕褐色，主要定位于腫瘤細胞的細胞核。Rb蛋白染色陽性率為59.8%(73/122)。

2.2 Rb在胃癌組織中的表達與臨床病理特征的關系

Rb在不同性別中表達差異無顯著性(P>0.05);Rb在不同病理類型的胃癌組織中的表達差異有顯著性(P<0.05);Rb陽性表達率與胃癌的淋巴轉移相關(P<0.01)。見表1。

3 討論

Rb是嬰幼兒內眼惡性腫瘤最常見的一種，其發病率在嬰幼兒中為1∶28000～1∶15000。1971年瑞典Kundson等對視網膜母細胞瘤的遺傳學基礎進行了研究，發現該腫瘤的形成需要第13號染色體上(13q14)一對等位基因的同時缺失或失活，表明該基因具有抑制腫瘤形成的作用，即首先提出了腫瘤抑制基因(suppressoroncgene)或抗癌基因(antioncogene)的概念。隨后對這一基因進行了分離鑒定，并稱為Rb基因。Rb基因定位于13q14，全長150kb，有27個外顯子26個內含子，外顯子-內含子交界處是保守的GT-AT 序列，內含子和外顯子的長度差別很大。Rb基因編碼的蛋白質為pRb，以其磷酸化的形式決定著轉錄因子 E2F的活性，在細胞周期調控中處于中心環節，從而控制著細胞的生長和分化。

在食管癌的研究中，Mathew等[1]研究認為Rb基因失活是食管癌轉移的一個重要危險因素。Ikeguchi等[2]發現，Rb基因未表達的食管癌患者預后較差，而Rb基因表達、p53不表達的患者預后較好。Rb基因在乳腺癌組織的缺失已被許多研究所肯定。Lundberg等[3]用Rb基因探針檢測乳腺導管癌的RELP，有50%癌組織Rb基因為純合缺失或失活狀態。Varley等[4]研究結果顯示，77例原發性乳腺癌19%有Rb基因的缺失或結構異常，而Rb基因的雜合性缺失在乳腺癌組織為26%。Tamura等[5]用PCR-SSCP方法檢驗乳腺癌組織Rb基因存在狀態，缺失率達59%。

本研究顯示:122例胃癌標本中，Rb陽性率為59.8%，Rb在不同性別組織中的表達差異無顯著性(P>0.05)，Rb在不同病理類型中的表達差異有顯著性(P<0.05)，Rb陽性表達率與胃癌的淋巴轉移明顯相關(P<0.01)。以上結果提示Rb與胃癌的發生發展和預后密切相關，可以作為預測胃癌惡性程度及預后的重要指標，而檢測Rb的表達水平，亦有可能作為監測胃癌復發的有效標記物。

[參考文獻]

[1] Mathew R，Arora S，Khanna R，et al. Alterations in p53 and pRb pathways and their prognoistc significance in oesophageal cancer[J]. Eur J Cancer，2002，38(6):832-841.

[2] Li H，Lu S，Fong L. Study on the status of methylation of Rb gene promoter in human esophageal cancer and effect of NMBzA on Rb genepromoter inmonkey esophageal epithelium[J]. Zhonghua Zhong Liu Za Zhi，1998，20(6):412-414.

[3] Lunderg C. Loss of heterozygosty in human ductal breast tumor sindicatesarecessive mutation on chromosome 13[J]. Proc Natl Ncad Sc，1987，84:2372.

[4] Varley MJ. The retinoblastoma gene is frequently altered leading to loss of expression in primary breast tumors[J]. Oncongene，1989，4:725.

[5] Tamura G. Improved detection of loss of heterozygosty a retinoblastoma gene locus in human breast carcinoma[J]. Pathol Int，1994，44(1):334.

(收稿日期:2010-03-12)