均勻設計法優選蒲公英總黃酮的研究

肖奇志

均勻設計法優選蒲公英總黃酮的研究

肖奇志

目的 探討超聲輔助提取蒲公英總黃酮的最佳工藝。方法 采用均勻設計優化提取工藝。結果 最優工藝參數為：超聲波強度2000W，溫度75℃，乙醇濃度75%，黃酮提取率為2.59%。結論 均勻設計法優選蒲公英總黃酮，簡潔快速，可以用于優選蒲公英總黃酮。

蒲公英；總黃酮；超聲輔助；均勻設計

Dandelion;Total Flavones; Ultrasound-assisted extraction; Uniform design

蒲公英是菊科多年生草本植物，含有多種有效成分，具有較強的清除自由基、抗氧化、抗炎、等多種藥理作用[1]，這些功效和蒲公英所含有的有效成份黃酮有一定的聯系。本實驗研究了超聲輔助提取蒲公英總黃酮的可行性，為進一步開發蒲公英提供一條經濟工藝路線。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

GU-1901雙光束紫外分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；RE-52A旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）；蒲公英（張仲景大藥房提供，經鑒定為藥用蒲公英Taraxacum officinale）；化學試劑為分析純。

1.2 實驗方法

1.2.1 超聲輔助蒲公英總黃酮提取工藝

稱取干燥過30目的蒲公英50g，石油醚浸泡24h,過濾，按照預設條件(超聲波強度、溫度、乙醇濃度)進行超聲輔助提取，提取3次，過濾，合并提取液，濃縮,氯仿萃取3次，合并萃取液，濃縮備用。

1.2.2 含量測定

秤取蘆丁標準品0.5mg溶于5mL甲醇溶液,量取1、2、3、4、5mL分別置25mL量瓶中，加水至6mL，加5%亞硝酸鈉溶液lmL搖勻，放置6分鐘min，加10%硝酸鋁溶液lmL搖勻，放置6min，加氫氧化鈉試液10mL，再加水至刻度，搖勻，放置15min，505nm波長處測定吸光度，以吸光度X和濃度Y進行回歸，得回歸方程為Y=2.37X+2.134，相關系數R=0.9998，表明0.004mg.mL-1-0.02mg/mL-1范圍線性關系較好。

1.2.3 均勻設計實驗法

以影響有效成分提取率超聲波強度、溫度、乙醇濃度作為考察因素，各因素取3個水平，探求超聲輔助提取蒲公英總黃酮的最佳工藝。用均勻設計3.0版軟件篩選出u9(33)表安排實驗[2]數據見表1。

2 結果與分析

2.1 均勻設計實驗結果

本實驗通過均勻設計3.0版軟件中自選變量法進行數據分析，采用超聲波強度A、溫度B、乙醇濃度C對應變量總黃酮提取率Y多元逐步回歸法進行分析，回歸分析采用后退法,顯著性水平α＝0.05，得回歸方程Y=0.397X1+0.371X2+0.341X3，復相關系數：R=0.9999,檢驗值Ft=11.67,臨界值F(0.05,3,3)＝6.277, Ft＞F(0.05,3,3),回歸方程顯著，剩余標準差s＝0.134，回歸方程有意義,由回歸方程因素的系數可見超聲波強度、溫度、乙醇量的影響均為正效應，從標準回歸系數可以發現，超聲波強度＞溫度＞乙醇濃度。根據回歸方程得出最優組合：超聲波強度A為2000W，溫度B為75℃，乙醇濃度C 為75%，預測值Y=2.17%。

表1 U7(73)均勻試驗方案及試驗結果

2.2 驗證方案

按照最優工藝參數即超聲波強度2000W，溫度75℃，乙醇濃度75%進行了3次平行試驗，顯示平均提取率2.59%，RSD1.21%，與預測值相符，說明優化結果可靠。作為對比試驗，本文采用常溫浸提和回流提取技術，對蒲公英總黃酮進行了提取試驗研究。取得率分別為1.97%和2.11%。由此可以看出，傳統提取技術的效果遠遠不及超聲輔助提取。

3 討論與結論

蒲公英總黃酮的提取過程就是使目標成分從細胞內釋放、擴散到溶劑中的過程，由超聲波發出的高頻機械振蕩，微射流和沖擊波使顆粒振蕩和高速碰撞，產生固液界面的清洗、沖擊、侵蝕和剝離等作用，使邊界層變簿，強化蒲公英總黃酮向固液界面的擴散，提高黃酮溶出過程的速率，從而可縮短提取時間、提高提取效率。

采用均勻設計方案進行試驗，得到最優工藝方案，試驗次數大大減小，時間短，收率高，操作簡單，能耗低，是一個經濟的工藝路線，值得推廣。優化了蒲公英總黃酮的超聲波輔助提取工藝，確定了蒲公英總黃酮的超聲波輔助提取的最佳工藝條件：超聲波強度A為2000W，溫度B為75℃，乙醇濃度C為75%。利用此條件提取蒲公英總黃酮，提取率達到2.59%。與傳統提取法相比，超聲波輔助提取法提取時間短、試驗次數大大減小，收率高，操作簡單，能耗低選擇性好，是一個經濟的工藝路線，值得推廣。

[1] 姜寧,宋新波.蒲公英的藥理研究進展[J].中國中醫藥雜志，2008,12(6)∶19-20.

[2] 陳濤,李進,褚治德.黃芪藥材的微波提取工藝研究[J].時珍國醫國藥,2009,20(2)∶349-350.

10.3969/j.issn.1009-4393.2010.32.98

∶ 462002 貴陽護理職業學院（肖奇志）

[Abstrac] Objective To study the best extraction process of the Flavones From dandelion. Methods The extraction condition by uniform design was optimized.Results The optimized technologic condition:Ultrasound wave power was 1200W,temperature was 75,the alcohol content was 75%,The extraction ratio of total Flavonesi was 2.59%. Conclusion The ultrasound-assisted extraction can be regarded as rapid and eff cient method of the extraction of total f avonoids in dandelion.