一步法合成9-去氧-8a-氮雜-8a-同型紅霉素A

王建華， 江志堯

(重慶大學 生物工程學院，重慶 400044)

阿奇霉素(5)是一種新型的十五元大環內酯類抗生素，是紅霉素A的擴環衍生物。與紅霉素A比較，5對酸更穩定，具有更廣的抗菌譜，生物利用度和藥代動力學性能均得到提高。5在臨床上因其應用方便，無需皮試等優點而廣泛應用。有報道顯示5會產生胃腸道反應、過敏反應、肝腎損傷、心血管系統反應等一系列不良反應[1]。在獸藥的應用方面也有不良反應的報道[2]。

從5的合成路線(Scheme 1)不難看出9-去氧-9a-氮雜-9a-同型紅霉素A(4)是合成5的重要中間體。目前4的合成工藝路線均是以(9E)-9-去氧-9-羥基亞胺基紅霉素A(1)為原料，丙酮/水為溶劑，對甲苯磺酰氯(p-TsCl)為催化劑，得到9-脫氧-6-脫氧-6，9-亞胺醚-(9a-氮雜-9a)-紅霉素A(2)和9-脫氧-6-脫氧-9，11-亞胺醚-(9a-氮雜-9a)-紅霉素A(3)，以甲醇為溶劑，硼氫化鈉還原3，或者貴金屬為催化劑氫化還原2和3得4[3～8]。

加米霉素(6)是一種新型的第二代大環內酯類獸用抗生素藥，其合成路線見Scheme 2。和5一樣，6也是一種紅霉素A肟擴環后制得的擴環衍生物，兩者的合成中間體4和9-去氧-8a-氮雜-8a-同型紅霉素A(11)是同分異構體。

Scheme 1

Scheme 2

目前法國梅里亞公司(MERIAL.CO)生產的以6為主要有效成分的注射劑ZACTRAN[1]已經通過歐盟藥品監督管理局獸藥署的審核，可以生產和銷售。

6的結構和功效已經得到了歐盟藥監局獸藥署的認證，可以用于食用動物的使用，具有吸收快、體內分布分布廣泛、體內殘留低、安全性高等優點，暫無不良反應報道。6主要用于治療溶血性巴斯德菌、出血敗血性巴斯德菌、嗜組織菌等細菌病原體導致的牛感染性疾病。是一種明確可以使用的獸用抗生素，在獸醫臨床具有廣闊的應用前景。

11作為合成6的重要中間體具有重要的研究意義。Leon等[9]以吡啶為反應溶劑，采用對甲苯磺酰氯為催化劑，使(9Z)-9-去氧-9-羥基亞胺基紅霉素A(7)發生貝克曼重排反應，以烷烴直接萃取反應產物，加入適量水后加入硼氫化鈉還原反應產物后得到11，純度69%。Robert等[10]以吡啶為溶劑，p-TsCl為催化劑，使7發生貝克曼重排反應得9-脫氧-6-脫氧-6，9-亞胺醚-(8a-氮雜-8a)-紅霉素A(8)和9-脫氧-12-脫氧-9，12-亞胺醚-(8a-氮雜-8a)-紅霉素A(9)，產物溶解于乙二醇中，用硼氫化鈉還原得到11，純度69%。不難看出上述方法不同程度的存在產品純度低、反應條件苛刻等缺點。

本文以7為原料，轉型后以甲醇/水為溶劑，p-TsCl為催化劑,經貝克曼重排合成中間體8， 9和9-羰基-8a-氮雜-8a-同型紅霉素A(10); 9不經分離提純，直接用硼氫化鈉還原，一步法合成了11(Scheme 3)。本方法避免了吡啶、甲苯等有機溶劑的使用，具有工藝簡單、環保和收率高且成本低的優點。

1 實驗部分

1．1 儀器與試劑

Bruker AV500 MHz型核磁共振儀(CDCl3為溶劑，TMS為內標)；島津LC-MS-2010A型液相色譜[流動相：V(乙腈) ∶V(水)=2 ∶1)，乙酸胺緩沖劑，檢測波長220 nm，流速1.2 mL·min-1,柱溫30 ℃]；J EOL(日本電子)JMS-SX102A型FAB-MS質譜儀(電噴霧離子源，噴霧電壓3 600 V，采用正離子選擇反應離子檢測方式)。

7按文獻[12]方法合成(產率83．0%，含量86．4%)；1，含量97%，浙江華義醫藥有限公司；對甲苯磺酰氯，化學純，國藥集團化工試劑有限公司；硼氫化鈉，分析純，天津市環威精細化工有限公司；其余所用試劑均為化學純或分析純。

1．2 11的合成

在圓底燒瓶中加入甲醇25 mL和75.0 g(6.7 mmol)，攪拌下緩慢加入p-TsCl 1.5 g(7.9 mmol)，待其完全溶解后加入水10 mL，用40%NaOH溶液調pH至8.5，反應1.5 h[TLC檢測，顯色劑V(正己烷) ∶V(乙酸乙酯) ∶V(二乙胺)=5 ∶5 ∶1]。加入二乙胺5 mL，于-3 ℃分四批加入NaBH42.0 g(52.6 mmol)，反應10 h。加水50 mL將不溶物溶解后加入CH2Cl2，調pH至9，分層。有機層中加人水100 mL，用10%HCl調至pH 4，分層。水層用10%HCl調至pH 3,反應30 min后加CH2Cl2100 mL，用40% NaOH調至pH 9.5，分層，合并有機層，用水(2×50 mL)洗滌，用無水MgSO4干燥過夜；減壓濃縮得11 4.2 g，產率84.6%，含量93．0%， m.p.184 ℃～189 ℃;1H NMRδ： 3.31(s， 3H， OCH3)， 2.59(dd, 1H， 9a-H)， 2.45(br t， 1H， 9b-H)， 2.28(s， 6H， NCH3)； FAB-MSm/z: 735[M+H-C8H14O3]， 577[M+H-C8H14O3]， 559[M+H-C8H14O3-H2O]。

2 結果與討論

2．1 溶劑對11產率的影響

實驗條件同1．2，考察溶劑對11產率的影響，結果見表1。由表1可見，以甲醇/水為溶劑時，11的產率最高。其原因是以甲醇/水為溶劑時，反應的主要產物是9，而只有少量的8和10生成。9能夠被硼氫化鈉還原，但8和10不能被硼氫化鈉還原[12]，因此11的產率較高。

表1 溶劑對11產率的影響*Table 1 Effect of solvent on yield of 11

*反應條件同1．2

2．2 pH對11產率的影響

以甲醇/水為溶劑，其余反應條件同1.2,考察pH對11產率的影響,結果見表2。由表2可見，最佳pH為8～9。

表2 pH對11產率的影響*Table 2 Effect of pH on yield of 11

*以甲醇/水為溶劑，其余反應條件同1.2

2．3 反應溫度對11產率的影響

表3 反應溫度對11產率的影響*Table 3 Effect of reaction temperature on yield of 11

*以甲醇/水為溶劑，pH 8～9,其余反應條件同1.2

以甲醇/水為溶劑，pH 8～9,其余反應條件同1.2,考察反應溫度對11產率的影響,結果見表3。由表3可見，反應溫度為-3 ℃時，產率最高(94．5%)。

2．4 反應時間對11產率的影響

以甲醇/水為溶劑，pH 8～9,反應溫度-3 ℃，其余反應條件同1.2,考察反應時間對11產率的影響,結果見表4。由表4可見，當反應時間為8 h～9 h時，11的產率最高(94.1%)。

表4 反應時間對11產率的影響*Table 4 Effect of reaction time on yield of 11

*甲醇/水為溶劑，pH 8～9,反應溫度-3 ℃，其余反應條件同1.2

3 結論

以(9Z)-9-去氧-9-羥基亞胺基紅霉素A為原料，甲醇/水為反應體系，對甲苯磺酰氯為催化劑，硼氫化鈉為還原劑，首次用一步法合成了9-去氧-8a-氮雜-8a-同型紅霉素A，其結構經1H NMR和FAB-MS表征。在pH 8～9，于-3 ℃反應9 h的較佳反應條件下，收率94．1%，純度93．0%。

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