王艷,楊靜,李志響,王嵩,田素英*
(1.廣東藥學院,廣東 中山 528458;2.廣州醫學院第二附屬醫院檢驗科,廣東 廣州 510260)
金櫻根、莖抗炎作用的對比研究
王艷1,楊靜2,李志響1,王嵩1,田素英1*
(1.廣東藥學院,廣東 中山 528458;2.廣州醫學院第二附屬醫院檢驗科,廣東 廣州 510260)
目的:對金櫻根、莖不同溶劑提取物進行抗炎作用的對比研究。方法采用蛋清所致的小鼠足跖腫脹炎癥模型,觀察金櫻根、莖不同溶劑提取物對急性炎癥的對抗作用;采用小鼠瓊脂皮下注射法的肉芽腫炎癥模型,觀察金櫻根、莖不同溶劑提取物對慢性炎癥的對抗作用。結果金櫻根的70%乙醇提取物的抗炎作用要明顯強于金櫻莖70%乙醇提取物,同時金櫻根的水提取物的抗炎強度要明顯強于金櫻莖水提取物。結論:金櫻子根和莖提取物有抗炎作用,且二者有顯著性差異。
金櫻根;金櫻莖;抗炎作用
金櫻根為雙子葉薔薇科(Rosales)植物金櫻子Rosa laevigata Michx.的根或根皮,又名金櫻蔃、脫骨丹等[1],為薔薇科薔薇屬常綠攀援有刺灌木金櫻的根或根皮,多野生[2]。其主要成分為黃酮類、鞣質、三萜類化合物、微量元素[3]等。其根與根皮可入藥,具有固精澀腸[4]、祛風活血、止痛、殺蟲、抑菌[5]等功效。金櫻是蔓生植物,根部相對稀缺,莖部相對較多。隨著市場需求的增大,生藥來源相對緊缺,造成市場上很多金櫻根都是由金櫻莖代替,金櫻莖的藥理作用在各種文獻中記錄較少。本實驗意在初步了解金櫻莖能否代替金櫻根,產生同樣的藥理作用,為以后的用藥提供初步科學的依據。
金櫻莖藥材、金櫻根藥材飲片(廣州致信中藥飲片有限公司、湖南),經廣東藥學院高級實驗師田素英鑒定為金櫻子Rosa laevigata Michx.的干燥根、莖;吲哚美辛腸溶片(山西太原藥業有限公司);95%乙醇為分析純。
昆明種小鼠雄性,120只,18~22g,由廣東省動物養殖中心提供。飼養條件溫度(20±2)℃,濕度(60±5)%,每2d更換1次墊料。正常飼養3d后供試,實驗前小鼠飲水、進食正常狀態良好。
分別以人用金櫻根量的中劑量100g·(60kg)-1,根據體重換算法:動物用藥劑量(g·kg-1)=K×人用藥劑量(g·kg-1),計算小鼠(20g,K=9.01)的用藥劑量。小鼠用藥的劑量為15.02g·kg-1。吲哚美辛片用藥劑量 6.5mg·kg-1。
2.2.1 金櫻根、莖的水與70%乙醇提取液 取藥材根、莖飲片分別粉碎成碎末狀,分別用水以及70%乙醇以飲片-溶劑(1∶8)的比例超聲提取20min,提取完成后進行減壓過濾,收集濾液,并將濾液置于恒溫水浴鍋里進行濃縮,濃縮后用蒸餾水以及70%乙醇配成相當于含藥材0.33g·mL-1的藥液,密封,4℃保存待用。
2.2.2 吲哚美辛混懸液 取藥品加生理氯化鈉溶液配成 0.358mg·mL-1的混懸液。
取雄性小鼠60只,每組10只,隨機分為6組(分別為金櫻根70%乙醇提取物組、金櫻莖水提取物組、金櫻莖70%乙醇提取物組、金櫻莖水提取物組、陽性對照吲哚美辛組、生理氯化鈉溶液組)。在小鼠左后足跖正面上端作一清晰橫線,利用容積測量裝置采用排水法測量鼠爪體積(Vn),分別測3次取平均值為該鼠給藥前的足跖體積。然后按照0.2mL·(10g)-1的劑量連續灌胃給藥 4d,于末次給藥1h后,用生理氯化鈉溶液配制好的10%蛋清(0.1mL/跖)注入小鼠左后腳跖皮下,各測小鼠足跖體積1次(Vt),計算鼠跖的腫脹度。腫脹度=致炎后足跖體積-致炎前足跖體積。
取雄性小鼠60只,同樣隨機分為6組(同急性致炎反應),每組10只。采用小鼠瓊脂皮下注射法,將1%的瓊脂每只背部皮下注射0.5mL,然后每天按0.2mL·(10g)-1的劑量灌胃,連續 10d。第 10天后解剖,分離肉芽腫,稱重,記錄數據。
數據利用SPSS11.5統計,組間比較采用t檢驗,P<0.05表示有統計學意義,實驗結果數據用±s表示。
結果見表1。
表1 各組對小鼠急、慢性炎癥的影響±s)

表1 各組對小鼠急、慢性炎癥的影響±s)
注:(1)與生理氯化鈉溶液組相比,*P<0.05,**P<0.01;與吲哚美辛組相比,#P<0.05,##P<0.01;(2)n=10
/g生理氯化鈉溶液組別 劑量/g·kg-1急性炎癥(小鼠足跖腫脹體積)/cm3慢性致炎(小鼠肉芽腫重量)15.03 0.90±0.40 0.20±0.10金櫻根70%乙醇提取液 15.03 0.40±0.40* 0.10±0.10*#金櫻根水提取液 15.03 0.40±0.50* 0.10±0.02*#金櫻莖70%乙醇提取液 15.03 0.70±0.20# 0.10±0.04##金櫻莖水提取液 15.03 0.90±0.50# 0.10±0.02##吲哚美辛 6.5×10-5 0.40±0.20* 0.02±0.06**
由表1可知,金櫻根的70%乙醇提取液和水提取液對小鼠的急慢性炎癥均有明顯的抑制作用,其中對急性抗炎作用與吲哚美辛無顯著性差異;在小鼠的慢性炎癥中雖然有抗炎作用,但是其抗炎強度沒有吲哚美辛強。
由表1可知,金櫻莖的70%乙醇提取液及水提取液對小鼠的急性炎癥無明顯的抑制作用(P>0.05),對小鼠的慢性炎癥亦無明顯的抑制作用(P>0.05)。其中對急性炎癥的抑制作用與吲哚美辛有顯著性差異,急性抗炎強度不明顯;雖然在小鼠的急慢性炎癥中均有抗炎作用,但很微弱。
結果見表2。

表2 金櫻根、莖的70%醇與水提取物的抗炎作用的總體對比
由表2數據分析可知,不論是金櫻根還是莖,它的70%乙醇提取液對小鼠的急性炎癥都要比其水提取液的抗炎強;不論是70%乙醇提取液還是水的提取液,在急性抗炎實驗中,根與吲哚美辛的抗炎作用沒有明顯差異,要比莖的抗炎作用強。在慢性炎癥的抗炎方面,金櫻根和莖的水提取液、70%乙醇提取液與吲哚美辛的抗炎作用有明顯差異,根雖比莖的抗炎作用強但均明顯弱于吲哚美辛。
因金櫻根在臨床應用上有顯著療效,逐漸受到大家的關注。隨著金櫻根用量的增多,市場也會出現相應的問題,如用金櫻莖代替金櫻根,或用其他植物的根假冒金櫻根等。再者,不同溶劑可能對金櫻根、莖中的成分的溶出度有所影響,以致影響其藥理作用。為了規范市場,必須盡早制定其質量標準。本實驗經過急性慢性致炎實驗研究,結果均表明金櫻根具有較強的抗炎作用,其醇提取物的抗炎作用效果比水提取物抗炎作用強。金櫻莖不論是水提取物還是醇提取物,抗炎作用效果均不明顯,在抗炎作用上金櫻莖不能完全取代金櫻根。通過此實驗,我們對金櫻莖能否替代根進行臨床運用有初步的認識,并對不同溶劑對藥理作用的影響有更深層次的認識,為今后科學用藥提供一定的依據。
[1]柳長華.李時珍醫學全書[M].北京:中國中醫藥出版社,1999:1204-1205.
[2]李時珍 .本草綱目[M].北京:人民衛生出版社,1978:2097.
[3]鄢貴龍.不同溶劑對金櫻中無機元素溶出的影響[J].安徽農業科學,2007,35(16):4873-4874.
[4]肖曉軍,劉曉紅.金櫻果實的化學成分及其應用[J].現代食品與藥品雜志,2006,16(4):1-3.
[5]張庭廷,潘繼紅,聶劉旺.金櫻多糖的抑菌和抗炎作用研究[J].生物學雜志,2005,22(2):41-42.
Com parative Study of Anti-inflammatory Effect of Rosa Laevigata Root and Stem
Wang Yan1,Yang Jing2,Li Zhixiang1,Wang Song1,Tian Suying1
(1.Guangdong Pharmaceutical College,Zhongshan Guangdong 528458,China;2.The Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College,Guangzhou Guangdong 510260,China)
Objective:To study the anti-inflammatory effect of extract from roots andstems of rosa laevigata.M ethods:Firstly,acute anti-inflammatory effect of extract from roots and stems of rosa laevigata was determined by mouse voix pedis swelling assay induced by albumen.Secondly,chronic anti-inflammatory effect of extract from roots and stems of rosa laevigata was examined through the mouse granuloma test induced by hypodermic injection agar.Results:Anti-inflammatory effects of70%ethanol and water extracts of rosa laevigata rootswere significantly stronger than those of rosa laevigata stems.Conclusion:Extracts of rosa laevigata roots and stems both exhibited remarkable anti-inflammatory effects in the animalmodels of acute and chronic inflammation,moreover two types of extracts had significant difference.
Rosa laevigata root;Rosa laevigata stem;Anti-inflammatory effects
*田素英,Tel:(0760)23316895,E-mail:zsxqtsy@126.com
2009-12-22)