甘肅產盤葉忍冬對小鼠鎮痛作用的實驗研究

李雪萍，高曉東，張永東，王蘭，李永輝，梁濤，胡清榮

（1.甘肅省醫學科學研究院，甘肅蘭州 730050；2.甘肅省疾病預防控制中心，甘肅蘭州 730030）

甘肅產盤葉忍冬對小鼠鎮痛作用的實驗研究

李雪萍1，高曉東2，張永東1，王蘭1，李永輝1，梁濤1，胡清榮1

（1.甘肅省醫學科學研究院，甘肅蘭州 730050；2.甘肅省疾病預防控制中心，甘肅蘭州 730030）

目的觀察甘肅產盤葉忍冬水提物對物理和化學刺激引起小鼠疼痛的影響。方法分別用熱板法和扭體法對小鼠致痛，然后觀察大（28.8 g/kg）、小（10.8 g/kg）2個劑量甘肅產盤葉忍冬水提物的鎮痛作用，并將其與陽性對照組比較。結果甘肅產盤葉忍冬大、小劑量組均有延長小鼠扭體潛伏期的作用，且與正常對照組比較有顯著性差異（P＜0.05）；在小鼠熱板實驗中，給藥后3 h甘肅產盤葉忍冬水提物大、小劑量均有提高小鼠痛閾的作用，且與正常對照組相比有顯著性差異（P＜0.05）。

結論甘肅產盤葉忍冬水提物具有降低小鼠由物理和化學因素引起疼痛的作用。

甘肅產盤葉忍冬；鎮痛作用；實驗研究

盤葉忍冬屬于忍冬科忍冬屬落葉藤本，別名大葉銀花（河南）、杜銀花、土銀花（四川峨眉）、葉藏花、金銀花，又名二花、雙花、金花、銀花和忍冬花。藥理實驗表明，盤葉忍冬具有廣泛的抗菌作用，對痢疾桿菌、傷寒桿菌、大腸桿菌、百日咳桿菌、白喉桿菌、綠膿桿菌、結核桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌等均具有抑制作用[1～3]，其還有抗流感病毒的作用[4～5]。本文就甘肅產盤葉忍冬水提物的鎮痛作用進行研究。

1 材料

1.1 藥物與試劑

盤葉忍冬水提物：由甘肅省醫學科學研究院藥理毒理室提供；阿司匹林（200 g/kg），由河北東龍藥業有限公司生產，批號為20020522；嗎啡，由沈陽第一制藥廠生產，批號為070707；醋酸（分析純），由西安化學試劑廠生產，批號為780529。

1.2 儀器

1%電子天平（日本）；GJ-8402型熱板測痛儀（浙江）。

1.3 動物

昆明種小鼠，清潔級，體重18～22 g，雌雄兼有，由衛生部蘭州生物所提供，合格證號為醫動字第14-001號。

2 方法及步驟

2.1 熱板法[6]

（1）動物篩選：昆明種雌性小鼠，于正式實驗前用熱板測痛儀[溫度為（55±0.5）℃]進行篩選，小鼠自放上熱板測痛儀至出現舔后足所需的時間為痛閾值（s），挑選5～30 s內反應穩定、不跳躍的小鼠供實驗用。（2）分組及給藥方法：將挑選合格的小鼠40只，按痛閾值隨機分為4組，每組10只，即正常對照組（NS）、盤葉忍冬小劑量組（10.8 g/kg）（簡稱小劑量組）、盤葉忍冬大劑量組（28.8 g/kg）（簡稱大劑量組）、嗎啡組（25 mg/kg）（陽性對照組），各組小鼠均按設計劑量灌胃給藥，1次/天，連續5天，末次給藥后于30 min、1 h、2 h、3 h、4 h分別測定2次各組小鼠的痛閾值，取平均值。如小鼠在熱板上60 s仍無痛反應，按60 s計。

2.2 扭體法[6～7]

取昆明種小鼠40只，雌雄各半，按體重隨機分為4組，每組10只，即正常對照組（NS）、小劑量組（10.8 g/kg）、大劑量組（28.8 g/kg）、阿司匹林組（0.2 g/kg）。各組均灌胃給藥，1次/天，連續5天。末次給藥后于30 min給每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml，觀察注射后各鼠的扭體潛伏期及20 min內小鼠的扭體反應次數（以腹腔內凹，伸展后肢，臀部抬高為標準)，計算扭體反應抑制率。扭體反應抑制率（%）=（正常對照組平均扭體次數-給藥組平均扭體次數）/正常對照組平均扭體次數×100%。

3 結果

3.1 熱板法的實驗結果

給藥后2 h大劑量組小鼠的痛閾值與正常對照組比較，有顯著性差異（P＜0.05），給藥后3 h大、小劑量組及嗎啡組與正常對照組比較均有顯著性差異（P＜0.05），給藥后4 h各組與正常對照組比較，均無顯著性差異（P＞0.05），結果見表1。

表1 甘肅產盤葉忍冬對熱板實驗中小鼠的鎮痛作用（）

表1 甘肅產盤葉忍冬對熱板實驗中小鼠的鎮痛作用（）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05；表中數值為小鼠的痛閾值

組別給藥前給藥后30 min1 h2 h3 h4 h正常對照組小劑量組大劑量組嗎啡組15.6±2.5 15.7±3.3 15.5±3.2 15.8±2.9 16.1±2.6 15.7±2.4 15.8±3.2 23.0±3.2* 15.9±2.1 15.8±2.1 15.7±2.6 19.0±3.0* 15.9±2.2 16.1±2.1 18.0±2.1* 18.0±2.5* 15.6±2.6 18.0±2.1* 18.0±2.4* 18.0±2.1* 16.0±3.0 16.3±2.1 16.9±3.1 17.1±1.9

3.2 扭體法的實驗結果

小鼠給予甘肅產盤葉忍冬水提物后，在醋酸所致小鼠扭體反應中，各給藥組與正常對照組比較，扭體潛伏期均延長，且對比有極顯著性差異（P＜0.01）。大劑量組、阿司匹林組在給藥后20 min內的扭體次數明顯減少，有極顯著性差異（P＜0.01），說明該藥具有較好的鎮痛作用，結果見表2。

表2 甘肅產盤葉忍冬對小鼠扭體實驗的鎮痛作用（）

表2 甘肅產盤葉忍冬對小鼠扭體實驗的鎮痛作用（）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別劑量（g/kg）扭體潛伏期（s）20 min內扭體次數（次）正常對照組小劑量組大劑量組阿司匹林組-10.8 28.8 0.2 150.6±37.7 229.9±58.4** 222.3±58.9** 343.1±65.6** 47.5±12.6 33.1±13.8* 29.0±12.2** 19.4±9.2**

4 結論與討論

由表1、表2可知，甘肅產盤葉忍冬具有較好的鎮痛作用，其中10.8 g/kg的劑量起效比較慢且藥效持續時間較短；28.8 g/kg的劑量起效較快且持續時間較長；甘肅產盤葉忍冬水提物能明顯延長小鼠的扭體潛伏期，其大劑量還可明顯減少20 min內小鼠的扭體反應次數，由此可見，甘肅產盤葉忍冬具有較好的鎮痛作用。

熱板法溫度刺激與腹腔注射有害化學品分別用于檢測中樞與外周鎮痛活性，由醋酸引起的疼痛與內源性物質釋放興奮痛覺神經末梢有關。炎性物滲出、組織腫脹是炎癥早期的重要表現，因為熱板法測定的是中樞神經的鎮痛活性，故陽性對照組選用中樞鎮痛藥嗎啡；扭體法測定的是外周鎮痛活性，故考慮選用外周鎮痛藥物阿司匹林作為陽性對照組。實驗結果可以說明，甘肅產盤葉忍冬對中樞及外周神經均具有鎮痛活性，但是其具體作用機制還有待于進一步研究。

[1]馮延明，姜波，孫延波，等.金銀花對不同血清突變形鏈球菌的抑菌實驗研究[J].白求恩醫科大學學報，1996，22（2）：150.

[2]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京:科學出版社，1988.

[3]高學敏.中藥學[M].北京:人民衛生出版社，2006.

[4]鄭漢臣，蔡少青.藥用植物學與生藥學[M].北京:人民衛生出版社，2005.

[5]孫延波，馮延明，趙玉春，等.金銀花對口腔病原微生物體外抑菌試驗的研究[J].中國中藥雜志，1996，21（4）：242.

[6]許叔云，卞如廉，陳修.藥理實驗方法學[M].第2版.北京：人民衛生出版社，1991.

[7]張根水，湯翠英.痹痛方鎮痛抗炎作用研究[J].中華中醫藥學報，2007，25（4）：788～790.

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1671-1246（2010）08-0139-02