蛹蟲草對D-半乳糖致衰老小鼠腦、肝組織氧化酶的影響

楊占軍，張 健，湯 陽，溫 魯

蛹蟲草對D-半乳糖致衰老小鼠腦、肝組織氧化酶的影響

楊占軍，張 健，湯 陽，溫 魯

(淮陰師范學院生命科學院， 江蘇 淮安 223300)

目的：以衰老相關酶為指標，探討蛹蟲草對D-半乳糖致衰老小鼠的影響。方法：使用D-半乳糖建立小鼠衰老模型，用蛹蟲草灌胃進行實驗性治療。持續6 周后，測定腦和肝組織的總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、單胺氧化酶(MAO)活性和丙二醛(MDA)含量。結果：與對照組相比，模型組小鼠的T-AOC、GSH-Px活性降低，MAO活性和MDA含量升高(P＜0.05或 P＜0.01)，說明造模成功；與模型組相比，蛹蟲草組的T-AOC、GSH-Px活性有不同程度地恢復，MAO活性和MDA含量降低(P＜0.05)。結論：蛹蟲草可提高小鼠腦、肝組織的抗氧化能力。

蛹蟲草；D-半乳糖；衰老；氧化酶

冬蟲夏草是我國的名貴中藥，由于過度采集，野生資源日漸枯竭。多年來，人們一直致力于在蟲草屬中尋找替代品。蛹蟲草是一類具有保健功效的大型藥用真菌，與冬蟲夏草有著類似的化學成分和醫療保健功效，可以作為冬蟲夏草的替代品[1-2]。資料表明蛹蟲草可以延緩衰老[3]、增強免疫力[4]、抗腫瘤，具有廣泛的藥理作用，本實驗室的研究也發現蛹蟲草可提高衰老小鼠的學習記憶能力[5]。在對小鼠補充蛹蟲草后，與衰老有關的總抗氧化能力(T-AOC)、單胺氧化酶(MAO)活性和丙二醛(MDA)含量有何變化還未見相關報道；此外有關谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)含量變化的報道也很少。本研究將對以上幾個方面進行研究，旨在為蛹蟲草功能開發、利用以及作用機制的探討提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

昆明種小鼠由中國科學院上海實驗動物中心提供；蛹蟲草由江西省農業科學院農業應用微生物研究所提供，60℃烘干(含水量＜1.0%)、磨粉過100目篩后作為供試材料。

D-半乳糖由上海試劑二廠提供，用生理鹽水配制成30g/L的溶液待用；T-AOC試劑盒、GSH-Px試劑盒、MAO試劑盒、MDA試劑盒、考馬斯亮藍試劑盒 南京建成生物工程研究所。

1.2 動物與分組

昆明種健康的小鼠48只，體質量10～12g，清潔級，將小鼠分為4組，每組12只，雌雄各半；模型組：按照0.3g/(kg bw·d)的劑量頸部注射 D-半乳糖溶液1次，同時用與蛹蟲草組等體積的生理鹽水灌胃1次；蛹蟲草Ⅰ組：按照0.3g/(kg bw·d)的劑量頸部皮下注射D-半乳糖溶液，同時用0.25g/(kg bw·d)劑量的蛹蟲草溶液灌胃；蛹蟲草Ⅱ組：按照0.3g/(kg bw·d)的劑量頸部皮下注射D-半乳糖溶液，同時用0.5g/(kg bw·d)劑量的蛹蟲草溶液灌胃；對照組：按上述同樣劑量生理鹽水頸部皮下注射和灌胃。在飼養過程中，動物正常進食，每周稱質量一次。持續6周后，對動物進行生化檢測。

1.3 小鼠腦和肝組織T-AOC、GSH-Px、MAO活性和MDA含量的測定

將小鼠頸椎拉斷處死，冰盒上開顱，迅速取出腦、肝組織，稱質量，按照試劑盒說明書對腦和肝組織的各氧化酶活性進行檢測。

1.4 統計分析

數據用x±s表示，采用SPSS12.0軟件對數據進行統計學處理，進行t檢驗。

2 結果與分析

2.1 腦組織T-AOC、GSH-Px活性、MAO活性和MDA含量的測定結果

表1 各組小鼠腦組織T-AOC、GSH-Px活性、MAO活性和MDA含量測定結果(x±s，n＝12)Table 1 Effect of Cordyceps militaris on the activities of T-AOC, GSHPx and MAO and the content of MDA in brain tissue of D-galactoseinduced senile mice (x±s, n＝12)

由表1可見，與對照組相比，模型組T-AOC、GSHPx的活性降低，MAO活性、MDA含量增加，其差異性具有統計學意義(P＜0.05)；當補充蛹蟲草后，與模型組相比，除蛹蟲草Ⅰ組的T-AOC外，蛹蟲草組的T-AOC、GSH-Px活性升高，MAO活性、MDA含量降低，差異明顯，具有統計學意義(P＜0.05)。

2.2 肝組織T-AOC、GSH-Px活性、MAO活性和MDA含量的測定結果

表2 各組小鼠肝組織T-AOC、GSH-Px活性、MAO活性和MDA含量測定結果(x±s，n＝12)Table 2 Effect of Cordyceps militaris on the activities of T-AOC, GSH-Px and MAO and the content of MDA in liver tissue of D-galactose-induced senile mice (x±s, n＝12)

由表2可知， 與對照組相比，模型組的T-AOC、GSH-Px的活性降低，MAO活性、MDA含量增加，其差異性具有統計學意義(P＜0.05或P＜0.01)；當補充蛹蟲草后，與模型組相比，除蛹蟲草Ⅰ組的T-AOC、GSH-Px、MAO活性外，蛹蟲草組的T-AOC、GSH-Px活性升高，MAO活性、MDA含量降低，差異明顯，具有統計學意義(P＜0.05)。

3 討 論

本實驗主要目的在于研究蛹蟲草對于D-半乳糖所致衰老小鼠腦、肝組織中幾種主要氧化酶水平的影響。結果表明：蛹蟲草可以提高小鼠腦、肝組織的抗氧化能力，即增強T-AOC、GSH-Px酶活性；同時使衰老相關的MAO活性和MDA含量降低。這幾種酶活性的變化，可能是蛹蟲草提高學習記憶能力、改善腦功能、延緩衰老的分子生物學基礎。

在模型組中，與抗衰老呈正相關的T-AOC、GSH-Px酶活性降低，而與衰老呈正相關的MAO活性和MDA含量增加，表明建模成功[6-7]。當補充蛹蟲草后，T-AOC、GSH-Px活性又得到恢復，MAO活性和MDA含量又降低。有文獻報道[3,8-9]：蛹蟲草可使腦或機體組織的GSH-Px、SOD、鈉-鉀-三磷酸腺苷酶(Na-K-ATP酶)等具有抗氧化活性的酶活性提高。在蛹蟲草改善衰老小鼠學習記憶障礙、延緩衰老的過程中，上述酶類具有重要作用。蛹蟲草營養豐富，除一般成分外，還含有蟲草素、蟲草酸和生物堿等活性成分，其中的某些物質可能通過多種代謝途徑，直接或間接影響著與衰老有關的酶。蛹蟲草通過種種途徑增強了機體的抗氧化酶活性，減弱了脂質過氧化反應，有效清除了過量的自由基，可能通過這些途徑改善了腦功能。

蛹蟲草對D-半乳糖致衰老小鼠模型的影響是多方面的，除腦、肝組織T-AOC、GSH-Px、MAO活性和MDA含量發生變化外，還可能有其他酶、蛋白質等大分子物質產生變化，其作用機制需要進一步研究。

[1]彭國平, 李紅陽, 袁永泰. 冬蟲夏草與人工蛹蟲草的成分比較[J]. 南京中醫藥大學學報, 1996, 12(5): 26-27.

[2]貢成良, 吳友良. 家蠶蛹蟲草的人工培育及成分分析[J]. 中國食用菌, 1994, 12(4): 21-23.

[3]張桂英, 王寶貴, 趙林伊, 等. 柞蠶蛹蟲草對黑腹果蠅壽命的影響[J].中國老年學雜志, 2002, 22(2): 148-150.

[4]張桂英, 王寶貴, 趙林伊. 柞蠶蛹蟲草對小鼠免疫功能的影響[J]. 中國公共衛生, 2004, 20(2): 230-231.

[5]楊占軍, 張健, 湯陽, 等. 蛹蟲草對D-半乳糖模型鼠記憶能力的影響[J]. 食品科學, 2010, 31(11): 252-254.

[6]崔旭, 李文斌, 張彪烈, 等. D-半乳糖腦老化模型脂質過氧化機理[J]. 中國老年學雜志, 1998(1): 38-40.

[7]李文彬, 韋豐, 范明, 等. D-半乳糖在小鼠上誘導的擬老化效應[J].中國藥理學與毒理學雜志, 1995(2): 93-95.

[8]貢成良, 潘中華. 家蠶蛹蟲草的延緩衰老作用研究[J]. 蘇州大學學報, 2005, 25(2): 24-27.

[9]張桂英, 王寶貴, 趙林伊, 等. 柞蠶蛹蟲草對老齡大鼠LPO含量和SOD、GSH-Px活性的影響[J]. 中國中藥雜志, 2001, 21(2): 734-735.

Effect of Cordyceps militaris on Oxidases in Brain and Liver Tissues of D-Galactose-induced Senile Mice

YANG Zhan-jun，ZHANG Jian，TANG Yang，WEN Lu
(School of Life Science, Huaiyin Normal University, Huai’an 223300, China)

Objective: The enzymes related to aging were used as the indexes to explore the effect of Cordyceps militaris on D-galactose-induced senile mice. Methods: A mouse model with senile disturbance of brain tissue was established by D-galactose induction and the experimental mice were treated with Cordyceps militaris by gavage. After the administration of Cordyceps militaris for six weeks, the activities of T-AOC, GSH-Px, MAO and the content of MDA in brain and liver tissues were analyzed. Results: Compared with the control group, the activities of T-AOC and GSH-Px of the model group exhibited an obvious decrease, and the activity of MAO and the content of MDA exhibited a significant increase (P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01). Compared with the model group, the activities of T-AOC and GSH-Px in mice administered with Cordyceps militaris was ameliorated, and the activity of MAO and the content of MDA exhibited an obvious decrease (P ＜ 0.05). Conclusion: Cordyceps militaris can improve the antioxidant capability of brain and liver tissues.

Cordyceps militaris；D-galactose；senile；oxidase

TQ929.2

A

1002-6630(2010)19-0339-03

2009-12-14

江蘇省高校自然科學基金項目(05KJB180010)；淮陰師范學院教授基金項目(06HSJS027)

楊占軍(1957—)，男，教授，碩士，主要從事腦功能與益智物質的研究。E-mail：yzj5678@163.com