三酰甘油(TG)測(cè)定結(jié)果失真分析

于志堅(jiān) 張?jiān)龉?屈瑋瑋

血清三酰甘油(TG)是一項(xiàng)重要的臨床血脂測(cè)定指標(biāo)。TG不僅對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化(AS)和冠心病(CHD)的防治具有重要意義，而且已經(jīng)滲透并應(yīng)用于其他諸多臨床相關(guān)專(zhuān)業(yè)疾病的研究，如高血壓、糖尿病等。測(cè)定方法為甘油磷酸氧化酶終點(diǎn)法。在工作中，經(jīng)常遇到目測(cè)血清很清而測(cè)得結(jié)果明顯偏高及重度脂血的標(biāo)本出現(xiàn)升高不明顯的情況，經(jīng)重新測(cè)定結(jié)果良好。現(xiàn)選11列結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源來(lái)源于門(mén)診和住院患者的標(biāo)本。

1.2 儀器和試劑南京D-360全自動(dòng)生化分析儀試劑為北京科美生物技術(shù)有限公司提供的甘油磷酸氧化酶終點(diǎn)法液體單試劑。

1.3 方法做好儀器每天的維護(hù)及保養(yǎng)，使儀器處于最佳狀態(tài)，要嚴(yán)格按照儀器的操作規(guī)程進(jìn)行操作，作好室內(nèi)質(zhì)控。對(duì)TG明顯異常與目測(cè)相差很大的、反應(yīng)曲線異常的標(biāo)本及嚴(yán)重脂血(用生理鹽水按照1：5的比例稀釋后)再重新測(cè)定。

2 結(jié)果

見(jiàn)表1。

表1 (mmol/L)

3 討論

3.1 測(cè)定TG為甘油磷酸氧化酶終點(diǎn)法 此法的原理是trinder反應(yīng)(被測(cè)物通過(guò)酶作用產(chǎn)生的過(guò)氧化氫，在4-氨基安替比林、過(guò)氧化物酶的存在下，可生成紅色醌亞胺化合物)。催化trinder反應(yīng)的過(guò)氧化物酶對(duì)底物專(zhuān)一性差，維生素C、尿酸、谷胱甘肽及膽紅素等還原性物質(zhì)也與色原性物質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)過(guò)氧化氫，從而使氧化過(guò)程中產(chǎn)生的過(guò)氧化氫被消耗，導(dǎo)致色素形成減少，測(cè)定結(jié)果偏低，此外，工具酶中如果夾雜有較多過(guò)氧化氫酶，也能消耗氧化產(chǎn)物過(guò)氧化氫，使被測(cè)物的測(cè)定值偏低，造成TG測(cè)定的負(fù)干擾。臨床上關(guān)于TG測(cè)定負(fù)干擾這方面的研究和報(bào)道不少。我院應(yīng)用D-360測(cè)定TG時(shí)，時(shí)有目測(cè)血清很清但測(cè)定值偏高的現(xiàn)象，如上表所列。TG高于3.33 mmol/L時(shí)才出現(xiàn)肉眼渾濁，有些標(biāo)本肉眼觀不渾濁，但測(cè)定值卻遠(yuǎn)高于此值，這說(shuō)明存在TG測(cè)定的正干擾。分析原因：1、分析儀使用同一根試劑針吸取試劑，雖然分析儀有清洗系統(tǒng)，但試劑針很難通過(guò)一次短暫快速的清洗程序就清洗干凈，一個(gè)項(xiàng)目對(duì)隨后的一個(gè)項(xiàng)目甚至幾個(gè)項(xiàng)目都會(huì)帶來(lái)一定程度的試劑污染，并且隨著儀器使用時(shí)間的增加，試劑交叉污染程度會(huì)有所加劇。試劑間的交叉污染原因是多方面的，主要有三個(gè)：第一，試劑成分中含有某種被污染的項(xiàng)目;第二，試劑中含有下一個(gè)測(cè)試所要測(cè)定底物或含有的某種試劑成分，與下一反應(yīng)所測(cè)定的底物有作用，因而直接影響下一反應(yīng)測(cè)定的結(jié)果;第三，該試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)給下一個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)進(jìn)程帶來(lái)了間接干擾。用全自動(dòng)生化分析儀隨機(jī)組合檢測(cè)項(xiàng)目時(shí)，原則是將具有相同反應(yīng)原理的項(xiàng)目放在一起 ，相同酸堿度反應(yīng)的項(xiàng)目放在一起，試劑內(nèi)含相同被測(cè)成分的和該項(xiàng)目相隔兩個(gè)項(xiàng)目位置以上，易污染項(xiàng)目測(cè)定前吸樣針設(shè)置清洗2次以上等。因此要想獲得正確可靠結(jié)果，不但需要熟練掌握儀器原理、性能操作 ，而且需要掌握反應(yīng)原理 ，試劑組成等方面知識(shí)［1］。2、酶法測(cè)定血清TG時(shí)，當(dāng) Hb＜1 g/L時(shí)反映為負(fù)干擾;＞1 g/L時(shí)反映出正干擾，但Hb≤2 g/L時(shí)干擾不顯著，明顯溶血標(biāo)本不宜作為T(mén)G測(cè)定。3、儀器自身缺陷，據(jù)工程師介紹D-360全自動(dòng)生化分析儀有這方面缺陷，偶爾出現(xiàn)重復(fù)性差，結(jié)果明顯異常，避免辦法就是結(jié)合標(biāo)本及臨床必要時(shí)再行復(fù)查。4、標(biāo)本處于半凝固狀態(tài)，導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確，標(biāo)本一定要用血清。

3.2 血清FG(游離甘油)對(duì)TG測(cè)定結(jié)果的影響一直是臨床十分關(guān)注的問(wèn)題。我國(guó)正常人血清FG水平平均約為0.08 mmol/L，約占總TG7.19%。雖然臨床標(biāo)本中FG顯著升高者很少見(jiàn)，但有些異常或病理情況下如應(yīng)激反應(yīng)(腎上腺素激活LPL促進(jìn)體內(nèi)脂肪水解)，劇烈運(yùn)動(dòng)，服用含甘油的藥物如硝酸甘油，靜脈輸入含甘油的營(yíng)養(yǎng)液，肝素治療，某些嚴(yán)重的糖尿病、肝病與腎病，取血器材或試管塞上帶有甘油等時(shí)，可見(jiàn)血清FG顯著升高，并給臨床決策帶來(lái)誤導(dǎo)［2］。

3.3 近年來(lái)糖尿病血脂代謝紊亂，家族性高血脂患者不斷增加，高血脂癥患者越來(lái)越多。日常標(biāo)本中甘油三脂(TG)在10～20 mmol/L屢見(jiàn)不鮮，血清似奶油狀無(wú)法報(bào)告結(jié)果。另一方面臨床上患者靜脈注射脂肪乳也出現(xiàn)同樣的情況。11號(hào)標(biāo)本就是高度脂血。由于脂血中大量的乳糜微粒對(duì)人射光產(chǎn)生散射，使生化分析儀不能準(zhǔn)確測(cè)定吸光度的變化，從而使測(cè)定結(jié)果失真。用生理鹽水稀釋后可以消除乳糜微粒對(duì)人射光產(chǎn)生的散射，從而消除脂濁對(duì)測(cè)定的干擾。對(duì)于重度脂血標(biāo)本除了用生理鹽水稀釋外，還可以通過(guò)高速離心(5000/min)后取脂肪層下面的下清液進(jìn)行測(cè)定其結(jié)果與用生理鹽水稀釋后測(cè)定的結(jié)果非常相近［3］。

3.4 在正常工作中由于標(biāo)本量大，有些異常結(jié)果易被忽視，所以要加強(qiáng)工作責(zé)任心，對(duì)異常結(jié)果要密切注意，查找原因。除了要密切注意當(dāng)天儀器的工作狀況，當(dāng)天的質(zhì)控狀況外，還要密切注意異常結(jié)果的反應(yīng)曲線，特別注意少數(shù)偏離常規(guī)的特殊異常，結(jié)合臨床結(jié)合標(biāo)本必要時(shí)及時(shí)復(fù)檢，為臨床提供科學(xué)的診斷依據(jù)。

［1］于雷.生化自動(dòng)分析儀項(xiàng)間的交叉污染及其避免方法.臨床檢驗(yàn)雜志，2003，21(3)：168.

［2］康格非.臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn).人民衛(wèi)生出版社，1998：59-160.

［3］石凌波.利用高速離心消除脂血對(duì)生化測(cè)定的干擾.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2004，19(2)：138-140.