乙型肝炎病毒基因型檢測的臨床意義

徐 嚴(yán),張永貴,季尚瑋,王江濱

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院消化內(nèi)科,吉林長春 130033)

乙型肝炎病毒基因型檢測的臨床意義

徐 嚴(yán),張永貴,季尚瑋,王江濱*

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院消化內(nèi)科,吉林長春 130033)

目的探討乙型肝炎病毒基因型分布及其對抗病毒療效的影響。方法對183例患者進(jìn)行基因分型,對應(yīng)用恩替卡韋及聚乙二醇干擾素a-2a抗病毒治療不同基因型患者療效進(jìn)行比較。率的比較采用 χ2檢驗(yàn)。結(jié)果183例慢性乙肝患者以C基因型為主,占53.6%,其次為B基因型(35.5%),C基因型患者HBeAg陽性率(69.4%)明顯高于B基因型患者(47.7%),兩者比較P＜0.05。肝硬化患者C基因型所占比例較高(67.4%)。恩替卡韋抗病毒治療B、C基因型患者HBV DNA不可測率、ALT復(fù)常率以及HBeAg血清轉(zhuǎn)換率相似。聚乙二醇干擾素a-2a組抗病毒治療48周B基因型患者持久應(yīng)答率(75%)明顯高于C基因型患者(45.5%),兩者比較P＜0.05。結(jié)論C基因型患者疾病進(jìn)展比例高,對聚乙二醇干擾素a-2a抗病毒治療療效較差。而基因型對恩替卡韋抗病毒療效并無顯著影響。

基因型;乙型肝炎;抗病毒治療

(Chin J Lab Diagn,2010,14:0061)

近年來,許多研究[1-2]發(fā)現(xiàn)HBV基因型是影響慢性乙肝臨床轉(zhuǎn)歸的主要決定因素之一,有關(guān)HBV基因型與臨床疾病的相關(guān)性研究越來越受到重視,引起國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。但是Palumbo E等[3]研究表明HBV基因型并不影響慢性乙肝患者的抗病毒療效。本研究對183例就診于中日聯(lián)誼醫(yī)院消化內(nèi)科的慢性乙肝患者進(jìn)行乙肝病毒基因型檢測,了解其分布狀況以及HBV基因型與HBeAg表達(dá)狀況及其病毒載量、臨床疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性,同時(shí)評價(jià)不同基因型患者的抗病毒療效,為臨床治療、預(yù)后評價(jià)提供進(jìn)一步的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 入選標(biāo)準(zhǔn) 選擇就診于中日聯(lián)誼醫(yī)院消化內(nèi)科的183名HBV DNA≥103拷貝/ml的慢性乙肝患者,診斷符合2005年“慢性乙型肝炎防治指南”中制定的標(biāo)準(zhǔn)[4]。所有患者進(jìn)行HBV DNA基因型檢測。對符合下列條件①HBV DNA≥104拷貝/ml;乙型肝炎肝硬化患者HBV DNA≥103拷貝/ml;②ALT≥ULN;乙型肝炎肝硬化患者ALT正常或升高。如用干擾素治療,ALT≤10倍正常值上限,TBIL＜2倍正常值上限;③肝穿組織學(xué)顯示Knodell HAI≥4。④除外妊娠期及哺乳期,無精神病史、癲癇、惡性腫瘤、有癥狀的心臟病,無吸毒或酗酒史等。應(yīng)用干擾素者除外失代償期肝硬化。其中84例應(yīng)用恩替卡韋治療(0.5 mg每日一次口服),男63例,女21例,HBeAg+49例。76例應(yīng)用聚乙二醇干擾素治療(Peg-IFNa-2a 180 μ g,每周一次皮下注射),男 53 例 ,女 23例,HBeAg+47例。所有患者抗病毒治療48周,干擾素組隨訪24周。

1.2 監(jiān)測指標(biāo) 接受治療前常規(guī)分析血清HBV DNA水平、生化學(xué)指標(biāo)及HBV血清學(xué)標(biāo)志。干擾素治療組治療前還應(yīng)檢查血常規(guī)、甲狀腺功能、血糖、尿常規(guī),血常規(guī)治療前4周每周1次,以后每4周1次。所有患者治療至第4周及12周檢測生化學(xué)指標(biāo)及HBV DNA水平,以后每12周檢測一次血清HBV DNA水平、生化學(xué)指標(biāo)及HBV血清學(xué)標(biāo)志。

1.3 檢測方法 ①血清學(xué)病毒標(biāo)志物檢測:采用酶聯(lián)免疫吸附法。②肝功能檢測:全自動生化分析儀及配套試劑購自美國貝克曼公司。③HBV DNA定量檢測采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)方法檢測血清中HBV DNA含量。最低檢測下限為1.0×103拷貝/ml。試劑盒購自中山大學(xué)達(dá)安公司。④HBV基因型檢測采用PCR微量板核酸雜交酶聯(lián)免疫法。試劑盒購自由廣州藍(lán)星生物科技開發(fā)公司。

2 結(jié)果

2.1 183例慢性乙肝患者HBV基因型分布及與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系 183例慢性乙肝患者以C基因型為主,占53.6%,其次為B基因型(35.5%)及未分出型患者(8.2%),而D基因型(1.6%)及A基因型者(1.1%)較少。46例乙型肝炎肝硬化患者C基因型所占比例(67.4%)明顯高于137例慢性肝炎患者C基因型所占比例(48.9%),兩者比較P＜0.05。

2.2 不同HBV基因型與HBeAg表達(dá)狀況及HBV DNA基線水平的關(guān)系 分析不同HBV基因型患者HBeAg表達(dá)狀況以及HBV DNA基線水平,結(jié)果顯示C基因型患者HBeAg陽性率(69.4%)明顯高于B基因型患者(47.7%),兩者比較P＜0.05。C基因型患者的HBV DNA基線載量(5.87±1.17 log10拷貝/ml)與B基因型患者(5.22±1.27 log10拷貝/ml)相近。

2.3 恩替卡韋及Peg-IFNa-2a抗病毒治療不同基因型慢性乙肝患者療效 恩替卡韋組B基因型25例,C基因型49例,比較恩替卡韋抗病毒治療不同基因型患者48周療效,結(jié)果顯示B、C基因型患者HBV DNA不可測率、ALT復(fù)常率以及HBeAg血清轉(zhuǎn)換率相似,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,詳見表1;Peg-IFNa-2a組B基因型24例,C基因型44例,抗病毒治療48周B基因型患者持久應(yīng)答率明顯高于C基因型患者,兩者比較 P＜0.05,詳見表2。

表1 恩替卡韋抗病毒治療不同基因型慢性乙肝患者的療效分析(%)

表2 Peg-IFNa-2a抗病毒治療不同基因型慢性乙肝患者的療效分析(%)

3 討論

HBV基因型的分布與地理因素、人種差異有關(guān)。國內(nèi)外有關(guān)不同基因亞型HBV流行特征的調(diào)查表明在亞洲地區(qū)以B、C基因型流行為主。與B基因型相比,C基因型患者疾病相對進(jìn)展快,肝組織學(xué)損傷嚴(yán)重,更易進(jìn)展為肝硬化。本研究對183例慢性乙肝患者HBV基因型分布進(jìn)行分析,結(jié)果顯示本地區(qū)患者以C基因型為主(53.6%),其次為B基因型(35.5%),與國內(nèi)報(bào)道相似[5]。進(jìn)一步分析肝硬化患者中基因型分布狀況,發(fā)現(xiàn)肝硬化患者中C基因型所占比例較高(67.4%),略高于 Yasuhito Tanaka[6]研究組調(diào)查的43.7%和Tomoyuki Sakamoto[7]研究組的41%,與Tatsuji Maeshiro[8]研究組調(diào)查的60%為C基因亞型的報(bào)道相接近。而我國不同地區(qū)調(diào)查的基因型分布狀況也表明在乙型肝炎肝硬化患者中均以C基因亞型為主[9-11],證實(shí)C基因亞型患者疾病進(jìn)展的比例的確高于其他基因亞型。Lindh[12]等報(bào)道C基因型感染者的HBV DNA水平較高,但是本研究結(jié)果顯示C基因型及B基因型患者的HBV DNA基線載量相似,提示兩者無明顯相關(guān)性。

AI-ZHONG ZENG等[13]研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用阿德福韋酯抗病毒治療B基因型患者療效明顯好于C基因型患者,Kao JH[14]研究組發(fā)現(xiàn)干擾素抗病毒治療B基因型患者療效亦優(yōu)于C基因型患者,但有研究表明不同基因型對核苷類似物及干擾素抗病毒療效并無顯著影響[3,15],各地區(qū)報(bào)道不盡相同。本研究84例應(yīng)用恩替卡韋抗病毒治療48周B、C基因型患者HBV DNA不可測率、ALT復(fù)常率以及HBeAg血清轉(zhuǎn)換率相似,提示基因型對核苷類似物抗病毒療效并無顯著影響。而Peg-IFNa-2a治療48周B基因型患者的持久應(yīng)答率明顯高于C基因型患者,提示Peg-IFNa-2a對B基因型患者療效優(yōu)于C基因型患者。

總之,HBV基因組具有相當(dāng)復(fù)雜的自然異質(zhì)性,不同的HBV基因型以及感染后不同的感染過程、病毒的清除、對治療的療效和自然轉(zhuǎn)歸等影響已經(jīng)受到廣泛的重視。越來越多的證據(jù)表明,HBV基因型與慢性乙型肝炎發(fā)病機(jī)制、轉(zhuǎn)歸、抗病毒療效均有密切關(guān)系。但目前的研究結(jié)果不具有統(tǒng)一性,隨著我們對HBV基因型研究的不斷深入,新的核苷類似物等抗病毒藥物等的開發(fā)和研制,對指導(dǎo)慢性乙型肝炎的臨床治療以及預(yù)后判斷均有積極的作用。

[1]Watanabe K,Takahashi T,Takahashi S,et al.Comparative study of genotype B and C hepatitis B virus-induced chronic hepatitis in relation to the basic core promoter and precore mutations[J].J Gastroenterol Hepatol,2005,20:441.

[2]Chen CH,Lee CM,Lu SN,et al.Clinical significance of hepatitis B virus(HBV)genotypes and precore and core promotermutations affecting HBV e antigen expression in Taiwan[J].J Clin Microbiol,2005,43:6000.

[3]Palumbo E.Hepatitis Bgenotypes and response to antiviral therapy:a review[J].Am J Ther.,2007,14(3):306.

[4]中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會、感染病學(xué)分會.慢性乙型肝炎防治指南[J].中華肝臟病雜志,2005,13(12):881.

[5]Zeng G,Wang Z,WenS,et al.Geographic distribution,virologic and clinical characteristics of hepatitis B virus genotypes in China[J].J Viral Hepat,2005,12(6):609.

[6]Zhanhui Wang,Yasuhito Tanaka,Yuehua Huang,et al.Clinical and Virological Characteristics of Hepatitis B Virus Subgenotypes Ba,C1,and C2 in China[J].J Clinical Microbiology,2007,5:1491.

[7]Tomoyuki Sakamoto,Yasuhito Tanaka,Etsuro Orito,et al.Novel subtypes(subgenotypes)of hepatitis Bvirus genotypes Band C among chronic liver disease patients in the Philippines[J].Journal of General Virology,2006,87:1873.

[8]Tatsuji Maeshiro,Shingo Arakaki,Takako Watanabe,et al.Different natural courses of chronic hepatitis B with genotypes B and C after the fourth decade of life[J].World J Gastroenterol,2007,13(34):4560.

[9]胡盈瑩,江家驥,歐文湖等.福建省部分地區(qū)乙型肝炎病毒基因型分布及其臨床意義[J].中華流行病學(xué)雜志,2004,25(3):251.

[10]李 嘉,朱理珉,鄒懷賓等.天津地區(qū)乙型肝炎病毒基因型分布及其與臨床的關(guān)系[J].肝臟,2006,11(6):304.

[11]王融冰,江宇泳,吳云忠等.中國北方地區(qū)乙型肝炎病毒基因型分布的臨床意義[J].中華傳染病雜志,2005,23(6):384.

[12]Lindh M,Hannoun C,Dhillon AP,et al.Core promoter mutations and genotypes in relation to viral replication and liver damage in East Asian hepatitis B virus carriers[J].J Infect Dis,1999,179:775.

[13]AI-ZHONG ZENG,HUI DENG,CHUNG YANG,et al.Hepatitis BVirus Genotype-Associated Variability in Antiviral Response to Adefovir Dipivoxil Therapy in Chinese Han Population[J].Tohoku J.Exp.Med.,2008,216:205.

[14]Kao JH,Wu NH,Chen PJ,et al.Hepatitis B genotypes and the response to interferon therapy[J].J Hepatol,2000,33:998.

[15]Erhardt A,Reineke U,Blondin D,et al.Mutations of the core promoter and response to interferon treatment in chronic replicative hepatitis B[J].Hepatology,2000,31:716.

Hepatitis B virus genotypes distribution and its influences on antiviral effects

XUYan,ZHANGYong-gui,JI Shang-wei,et al.(Department of Gastroenterology,China-Japan Union hospital of JilinUniversity,Changchun130033,China)

Objectiveto analyze Hepatitis B virus genotypes distribution and its influences on antiviral effects.Methodsthe genotypes of 183 patients were detected,to analyze antiviral effects of entecavir and peg-IFNa-2a in patients with different genotypes.Results53.6%of 183 patients were classified as genotype C,35.5%were genotype B.The positive rate of HBeAg in the patients of genotype C was higher than that of genotype B(P＜0.05).The rate of genotype C(67.4%)was higher in the patientswith Hepatitis B virus-related cirrhosis.Similar proportions of different genotype patientswho were treatmentwith entecavir achieved HBV DNA＜1 000 copies/ml,ALT normalization andHBeAg seroconversion.The sustained response rate in the patients of genotype B(75%)was higher than that of genotype C(P＜0.05).ConclusionThe patients of genotype Cwith a high rate of disease progression,and poor antiviral effects to peg-IFNa-2a.Genotype is no significant impact on antiviral efficacy of entecavir.

genotype;Hepatitis B;antiviral therapy

R512.6+2

A

1007-4287(2010)01-0061-03

*通訊作者

2009-03-07)