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鵝源新城疫病毒云南流行毒株的鑒定理化試驗

2010-08-15 00:47:54荀來武尹革芬
山東畜牧獸醫 2010年11期

劉 燕 荀來武 尹革芬 俞 浩

(①云南農業職業技術學院 昆明 650212 ②云南省種畜場 ③云南農業大學動物科學技術學院)

1 材料與方法

1.1 材料

(1)9日非免疫雞胚 購自云南農科院雞場;(2)氯仿、乙醚、甲醛。

1.2 方法

1.2.1 氯仿乙醚敏感性試驗 分離病毒毒株尿囊液經4.8%氯仿在4℃處理10min,20%乙醚在4℃處理24h后,分別尿囊腔接種9日齡雞胚10枚,每胚0.1mL,并設對照組10枚,每胚接種未經氯仿乙醚處理的分離病毒株尿囊液0.1ml(殷震等,1997),觀察結果。

1.2.2 甲醛滅活試驗 分離病毒株尿囊液經0.1%和0.5%的甲醛處理后,分別尿囊腔接種9日齡雞胚10枚,每胚0.1mL,并設對照組10枚,每胚接種未經甲醛處理的分離病毒株尿囊0.1mL,觀察結果。

1.2.3 病毒熱穩定性試驗 把分離毒株尿囊液密封于封閉的小試管中,分別置于100℃ 1min、2min;56℃5min、10min、30min、45min和60min,并迅速冷卻,按常規處理分別接種9日齡雞胚10枚,每胚0.1ml。并設對照組10枚,接種未經熱處理的鵝源新城疫病毒株尿囊液,每胚0.1ml(蘇敬良等,20000),觀察結果。

2 結果

2.1 氯仿乙醚敏感性

觀察96 h后,經氯仿乙醚處理后的病毒液均不能致死雞胚,而對照組全部死亡。結果表明分離病毒對氯仿敏感。

2.2 甲醛滅活

接種經甲醛滅活的鵝新城疫病毒KM2007株尿囊液雞胚均未死亡,而對照組全部死亡。

2.3 病毒熱穩定性

結果經100℃ 1min、2min ;56℃ 45min和60min處理的尿囊液接種的雞胚全部存活,血凝價從25降為20;56℃ 5min、10min、30min組別的雞胚部分死亡,血凝價從

25分別下降為24、23、22。

3 結論與分析

(1)所分離的病毒對乙醚和氯仿敏感,得出病毒有囊膜。所分離的病毒對甲醛敏感并有血凝價的改變,得出病毒有血凝性。所分離病毒對熱也敏感。

(2)用分離病毒株做氯仿乙醚敏感性試驗,甲醛滅活試驗,結果表明分離病毒KM2007株對氯仿乙醚、甲醛都敏感,病毒熱穩定性試驗結果表明分離病毒KM2007株對熱也敏感。說明所分離病毒KM2007株與NDV的理化特性有很大的相關性,理化試驗無法區別這兩種毒株的同源性。鵝副粘病毒與NDV之間抗原性和致病性上的差異性有待進一步研究。

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