采復拉?大木拉,買買提明?巴拉提,鄭文新,沙熱木,陶衛東,呂雪峰,胡 波,馬合木提,艾合買提?卡斯木
(1.新疆維吾爾自治區種羊與羊毛羊絨質量安全監督檢驗中心,烏魯木齊830000;2.新疆農業大學動物科學學院;3.新疆烏魯木齊絨山羊研究所;4.新疆新和縣畜牧獸醫局)
肉用綿羊冷凍精液技術的應用研究對提高優質種公羊利用率和充分發揮優良個體在綿羊改良工作中起到重要的作用。目前,綿羊顆粒冷凍精液仍沒有廣泛地推廣應用。新疆是一個養羊大省,養羊業已成為農民增收的支柱產業,但目前羊的品種改良工作還跟不上發展需要。主要原因是優良品種的種羊價格高,農民買不起。利用優良品種的冷凍精液改良土種羊是最好的途徑,可獲得顯著經濟效益,越來越受到廣大畜牧工作者的重視和養羊專業戶的歡迎。因此,2009年11月底我們在新和縣開展了肉用羊顆粒冷凍精液生產。
1.1 種公羊選擇 近年來,新和縣畜牧獸醫局引進純種薩福克種公羊276只(每個養殖戶發放1只)。用于制作冷凍精液的種公羊,是從276只種公羊里篩選出體型外貌和生產性能符合品種要求的特級、一級種公羊30只。對每只種公羊進行檢疫,確認無傳染病、體質健壯。
1.2 種公羊管理要求 保持中上等膘情、健壯、活潑、精力充沛、性欲旺盛,過肥過瘦都不利采精。公羊必須單獨組群、飼喂,羊群不宜過大。每日應有足夠的運動,夏季每日4~6 h,冬季每日2~4 h。
1.3 飼料配方 對種公羊提前45 d加強飼養管理。配方:玉米500 g,黃豆150 g,大麥150 g,麩皮150 g,黃蘿卜500 g,苜蓿粉 1 500 g,添加劑(預混料)2 g,魚粉5 g,雞蛋2枚。
1.4 飼喂方式 精料分早中晚3次喂,草料分2~3次喂,食鹽自由甜食,飲水分3~4次。
基礎液:按照確定的稀釋液配方,要求藥品純凈、稱量標準、瓶裝密封、消毒后保存。
Ⅰ液:基礎液加入一定量的卵黃和抗菌素配制而成,用作精液第一次稀釋。
Ⅱ液:Ⅰ液中加入甘油等抗凍劑配制而成,用作精液第2次稀釋。
在新和縣制作顆粒冷凍精液時,用的基礎液是葡萄糖3 g、檸檬酸鈉3 g、重蒸餾水100 mL。
Ⅰ液:取基礎液80 mL,加入20 mL卵黃。Ⅱ液:取I液44 mL加入甘油6 mL。
2.2.1 精液采集后盡快在5 min內用I液作第一次稀釋,要把稀釋液加溫到28~32℃,稀釋比例應根據精液的品質作1~3倍稀釋。稀釋液與精液溫度應一致,相差不能超過1℃。
2.2.2 稀釋后的精液經20~30 min緩慢降溫至3~4℃,平衡2~3 h,再加入等溫Ⅱ液,加入量為第1次稀釋比例的一半。
把第一次稀釋過的精液導入玻璃瓶中,并包上8層紗布,放到 3~4℃冰箱里,平衡2~3 h,在此期間內溫度不得有變化。
4.1 在3 L廣口液氮罐(或保溫桶)內注入液氮至罐頸下沿處,將聚四氟乙烯塑料板浸入液氮中,3 min左右,待塑料板熱量全部散盡,把塑料板取出。放至把廣口液氮罐蓋上的兩層紗布上面。
4.2 將塑料板提上至液氮罐口、平置2 min,待塑料板溫度升至-90~-120℃時,用玻璃滴管吸取經平衡后的精液,按每顆粒0.1 mL的劑量,連續滴凍塑料板上,每次滴凍不得超過100粒,在滴凍過程中注意使凍精液始終保持在3~4℃,溫度不得回升。
4.3 在冷凍灌上加蓋降溫,經過3 min左右,充分凍結的精液顆粒色澤光亮時,將塑料板浸入液氮中取下冷凍精液顆粒,經顯微鏡檢查精子活率達0.3以上時再行分裝,并加標簽,即可移入貯存罐中保存。
5.1 解凍液 2.9%檸檬酸三鈉或人用維生素B12注射液。
5.2 解凍方法 兩種方法,第一種是半干解凍,取解凍液3滴(0.3 mL)于小試管中把小試管沖3次,取一粒冷凍精液顆粒迅速投入小試管內,在38~42℃熱水中浸泡待溶解至小綠豆大時取出小試管,在外界環境下待全部精液溶解后,取一滴精液于載波片上作精子活率顯微鏡檢查。另一種解凍方法是干解凍,取一粒冷凍精液顆粒迅速投入小試管內,在70~80℃熱水中解凍。
6.1 質量檢測 每批制作的冷凍顆粒精液,均須經抽樣檢測。要求每顆粒容量為0.1 mL,精子活率0.3以上,每顆粒有效精子數為1 000萬個。
6.2 分裝 顆粒精液按30~50粒分裝于1個紗布袋或一個小玻璃瓶中。
6.3 標記 每袋顆粒精液須標明品種、公羊號、生產日期、精子活率、顆粒數量,再按照公羊號將顆粒精液袋裝入液氮罐提筒內,浸入并固定在液氮罐內貯存。
6.4 分發、取用 分發、轉移、取用冷凍精液應在液氮罐內的液氮中進行。冷凍精液每次脫離液氮時間不得超過5 s。
6.5 貯存 貯存冷凍精液的液氮罐應放置在干燥、涼爽、通風和安全的庫房內。由專人負責,每周檢查一次罐內的液氮容量。當剩余液氮為液氮容量的2/3時,須及時補充。要經常檢查液氮罐的狀況,如果發現外殼有小水珠、掛霜或者發現液氮消耗過快時,說明液氮罐的保溫性能差,應及時更換。
6.6 記載
每次入庫或分發,耗損報廢的冷凍精液數量及補充液氮的數量等,必須如實記載清楚,并做到每月結算1次。
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[2]趙有璋.羊生產學[M].北京:中國農業出版社,2002,149-152.
[3]淵錫藩,張一玲.布爾山羊顆粒冷凍精液制作規程[J].畜牧獸醫雜志,2000(6):40-41.