氣相色譜質譜法檢測蔬菜中多效唑的殘留

呂 燕，趙 健，楊 挺，王立君

（農業部農產品質量安全監督檢驗測試中心，浙江 寧波 315040）

1 引 言

多效唑（Paclobutrazol）是三唑類植物生長延緩劑，廣泛應用于蔬菜生產中，具有延緩植物生長、抑制莖枝伸長、促進分蘗、促進成花和座果、增強抗旱及抗寒性、提高耐鹽性和延緩植物衰老等多種效應[1-7]。現在國內已有水果[8-9]、糧谷[10]等多效唑的檢測方法，而蔬菜中殘留的檢測方法仍少見，用氣相色譜-質譜測定蔬菜中多效唑殘留量的方法卻未見報道。該文采用乙腈作為提取液，通過對弗羅里硅土凈化柱洗脫行為的優化，建立了用氣相色譜-質譜選擇離子方式測定蔬菜中多效唑的方法，該方法簡便、快捷、準確。

2 實驗部分

2.1 試劑與材料

丙酮（色譜純），正己烷（色譜純），氯化鈉（分析純），乙腈（分析純），固相萃取柱（弗羅里硅土，1 g/6 mL），多效唑標準品（純度99.0%Dr.Ehrenst orfer GmbH）。

淋洗液：取5mL丙酮，用正己烷稀釋至100mL；

洗脫液：取15 mL丙酮，用正己烷稀釋至100mL。

2.2 標準儲備液和工作液的配制

多效唑標準儲備液：用少量丙酮溶解，正己烷定容，配制成1000mg/L，再于4℃冰箱中冷藏保存，有效期3個月。

標準工作液：將儲備液用正己烷稀釋成濃度為0.050～1.0mg/L標準工作液。

2.3 儀器與設備

Agilent 6890N GC/5973 MS氣質聯用儀（配備電子轟擊離子源（EI））；梅特勒-托利多AX205型精密分析電子天平，感量0.01 mg；梅特勒-托利多PL3002型電子天平，感量0.01g；BUCHI V850型旋轉蒸發儀；德國IKA T25型勻漿機；高速冷凍離心機（SIGMA 3K15）；固相萃取儀（Supeclo）。

2.4 實驗步驟

2.4.1 提取

準確稱取25.00 g勻漿后的抽取樣品，置于250mL勻漿瓶中，加入50.0mL乙腈，10000r/min勻漿2 min后靜置10 min，用濾紙過濾，濾液收集到裝有10 g氯化鈉的100 mL具賽量筒中，收集濾液40～50 mL，蓋上蓋子劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30min，使乙腈相和水相分層。

2.4.2 凈化

從100 mL具塞量筒中吸取乙腈相10.00 mL至250mL燒杯中，燒杯在70℃水浴鍋上加熱，杯中緩緩通入氮氣，蒸發近干，加入2.0mL淋洗液溶解，待凈化。

將弗羅里硅土固相萃取小柱，用5.0 mL正己烷預處理，活化，當溶劑液面到達柱吸附層表面時，立即倒入上述待凈化溶液，用10.0mL淋洗液淋洗棄去全部流出液，然后用30.0mL洗脫液洗脫，收集洗脫液于50 mL濃縮瓶中，將盛有洗脫液的濃縮瓶置于旋轉蒸發儀上，在40℃水浴條件下，旋轉蒸發至近干，殘渣用正己烷溶解并定容至2.0mL，待測定。

2.5 添加回收率實驗

設添加水平為 0.040 mg/kg、0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，并設空白對照，重復5次，處理同“2.4”。

2.6 儀器參數與測定條件

2.6.1 氣相色譜部分

HP-5MS彈性石英毛細管柱：30m×0.25mm（i.d.），0.25 μm；程序升溫：起始溫度 100℃，以 20℃/min升溫至220℃，再以5℃/min升溫至250保持8 min；進樣口溫度：280℃；傳輸線溫度：280℃；進樣模式：不分流進樣；進樣量：1μL；載氣流速：1.1mL/min。

2.6.2 質譜部分

四極桿溫度：150℃；離子源溫度：230℃；電子能量：70eV。數據采集方式：選擇離子監測方式（SIM），監測離子 125，167，236。

3 結果與討論

3.1 實驗條件選擇

3.1.1 提取劑的選擇

分別選用丙酮、乙腈、乙酸乙酯、丙酮-乙酸乙酯提取樣品中的多效唑，實驗結果表明，單獨用丙酮作為提取溶劑，提取液濃縮后溶液的粘稠度高，使凈化工作無法進行；用乙酸乙酯或丙酮-乙酸乙酯進行提取，雖然不影響凈化，但是提取效率低；選用乙腈作為提取溶劑，樣品回收率在85%以上，故選用乙腈作為提取溶劑。

3.1.2 洗脫劑的選擇

分別用正己烷、5%丙酮-正己烷、10%丙酮-正己烷、15%丙酮-正己烷、30%丙酮-正己烷進行洗脫實驗。結果表明，用正己烷和5%丙酮-正己烷作為洗脫劑時，多效唑不能被洗脫下來；選用10%丙酮-正己烷多效唑可被洗脫下來，但定量回收所需溶劑多；采用15%丙酮-正己烷和30%丙酮-正己烷溶液均可只用少量洗脫劑定量洗脫組分，但后者同時使大量的雜質洗脫下來。故選用10mL 5%丙酮-正己烷淋洗，用15%丙酮-正己烷洗脫收集，洗脫溶劑用量少，樣品也得到了較好的凈化。

3.2 線性范圍與檢測限

取多效唑標準儲備液，用正己烷稀釋配置成濃度為 0.050 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.0 mg/L系列標準工作液液，按2.5儀器條件測定，獲得不同濃度的多效唑響應峰面積，以定量離子的峰面積（Y）對相應多效唑標液質量濃度（X）作線性回歸，結果表明多效唑在0.050～1.0mg/L范圍內線性關系良好，其回歸方程為Y=5.71×105X-7.58×103（R2為0.9998）。通過計算空白樣品信噪比S/N=3獲得該方法檢出限為量0.01mg/kg。圖1～圖5為標準溶液、空白樣品和添加樣品的總離子流圖和質譜圖。

3.3 準確度和精密度

在未檢出多效唑的白菜和黃瓜樣品中分別添加3個不同含量水平的農藥標準液，渦旋混合2 min，靜置30 min，使添加濃度分別為0.040 mg/kg，0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，每個水平做5次平行實驗，按照2.4處理后進樣，計算加標回收率和相對標準偏差（RSD），結果見表1。此結果回收率良好，相對標準偏差小于10%，符合農藥殘留檢測要求。

對于實際樣品，白菜和黃瓜中多效唑的最低檢出濃度為0.01mg/kg。

4 結束語

實驗以乙腈高速勻漿提取，再經弗羅里硅土固相萃取小柱凈化，建立了蔬菜中多效唑殘留量的氣相色譜-質譜檢測方法，該方法靈敏度高，選擇性好，通過選擇離子的相對豐度，可以對檢測結果進行確證。經考察，該方法在選定的濃度范圍內，多效唑回收率高，測定精密度好。

表1 蔬菜中多效唑的添加回收率

目前，我國規定了花生中多效唑的最大殘留限量值為0.5mg/kg[11]，但尚未制定白菜和黃瓜中多效唑的最大殘留限量值，而日本肯定列表中未見白菜和黃瓜的最大殘留限量，所以兩種蔬菜中多效唑最大殘留限量歸為“一律標準”，即為0.01 mg/kg。該研究方法符合殘留分析試驗要求，能夠用于檢測蔬菜中多效唑的農藥殘留。

[1]呂忠玉.蕎麥噴施多效唑的實驗效果簡報[J].農業科技與信息，2009（5）：29-30.

[2]盧向陽.多效唑在油菜雪災后的施用效果研究[J].現代農業科技，2009（2）：130-132.

[3] 楊福孫，孫愛花，王燕丹，等.生長延緩劑對檳榔苗期葉綠素含量及葉綠素熒光參數的影響[J].中國農學通報，2009（2）：255-257.

[4]陳 暉.湖南地區辣椒冬播春育規模型育苗技術探討[J]. 長江蔬菜，2009（1）：27-29.

[5] 曹翠玲，楊 力，胡景江.多效唑提高玉米幼苗抗旱性的生理機制研究[J].干旱地區農業研究，2009，27（2）：153-158.

[6]左順杰.馬鈴薯噴多效唑效果好 [J].農藥市場信息，2009（7）：42.

[7] 王 存.多效唑在植物生產上的應用現狀[J].熱帶農業科學，2009（2）：67-72.

[8] 戴蘊青，劉 肅，黃衛東，等.高效液相色譜法測定蘋果中的多效唑含量[J].色譜，1995（6）：455-457.

[9] 白 樺，邱月明，張 青.氣相色譜-質譜法測定蘋果中多效唑殘留量[J].分析測試學報，2005（4）：64-66.

[10]白 樺，邱月明，郝 楠，等.氣相色譜-質譜法測定糧谷中多效唑殘留量[J].檢驗檢疫科學，2004（3）：54-55.

[11]NY 1500.10.1-2007，農產品中農藥最大殘留限量[S].北京：中國農業出版社，2008.