兩種大便潛血試驗在臨床應用中的探討

雷光星 屈玲 薛志宏

當血紅蛋白在消化道內存留時間過長時，會被胃腸道的酶和細菌所降解，或由于胃酸的作用使血紅蛋白(HB)的構象及結構在強酸作用下發生某些變化。使其失去免疫原性。可能出現陽性結果減弱或假陰性結果。給本來非常特異的免疫法測定HB造成困難。而化學法測定大便潛血又會受到飲食、藥物以及檢測方法不特異諸多因素的影響。為此我們應用化學法和免疫法聯合測定大便潛血。探討兩種大便潛血試驗在臨床應用中的差異從而選擇最適的測定方法為臨床提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試劑

1.11 免疫法試劑盒：由萬華普曼生物工程有限公司提供，產品標準編號：YZB/國0685-2008。

1.12 化學法試劑盒：由(臺資)珠海貝索生物技術有限公司提供，執行標準號：YZB/粵0480-2005。

1.2 方法 由專人隨機采集本院當天門診和住院患者糞便留于清潔、干燥、有蓋的塑料小容器中，馬上送到實驗室。由指定專業人員嚴格按照試劑盒說明書操作要求，應用化學法和免疫法兩種方法同時做大便潛血試驗。

2 結果

在4 0 0例受檢者中，化學法和免疫法陽性率分別為15.2%(62/400)和11.0%(44/400)。兩種方法全陰性為326例；兩種方法全陽性為32例。化學法陽性、免疫法陰性為30例；而免疫法陽性、化學法陰性為12例。具體結果見表1和表2。

3 討論

3.1 在臨床實驗室中大便潛血試驗多數應用化學法和免疫法進行測定。前者任何有類似氧化物酶活性的物質都可影響此實驗，如動物的血紅蛋白。另外維生素C、鐵劑、綠色蔬菜均會造成假陰性。而后者如果HB在消化道停留時間過長，受細菌、酶分解以及胃液酸性物質等因素的影響而發生變化，使其與包被抗體不能發生特異性結合而出現假陰性。在本試驗中化學法陽性率(15.5%)遠大于免疫法(11.0%).差異非常顯著(P＜0.05)也說明了這一點。

表1 400例受檢者大便潛血試驗兩種實驗方法結果。

表2 400例受檢者大便潛血試驗應用兩種實驗方法檢測結果的分析

3.2 在表2中化學法陽性免疫法陰性占30例，在這30例中有以下特點。⑴、多數病例出血部位在上消化道并部分大便呈棕褐色。有影響化學法假陽性因素存在(如飲食、用藥等)。說明上消化道出血時HB在消化道停留時間過長，胃酸及其它因素造成HB的免疫原性(或HB分子構象)發生變化。與標記抗體不匹配無法進行特異性結合而出現假陰性。由于有影響化學法假陽性因素存在使得化學法測定大便潛血的假陽性率升高是造成兩種實驗方法檢測結果不一致的主要原因。

3.3 對部分呈棕褐色的大便有可能是HB含量過大出現的抗原抗體比例不合適所致的假陰性。對這部分大便我們用鹽水進行稀釋以后再用免疫法進行測定，結果一部分可以出現陽性，而一部分仍然是陰性。這說明在免疫法檢測中假陰性的出現有兩種可能，一種是抗原抗體比例不合適；另一種是HB的免疫原性發生改變。

3.4 在本實驗中(表2)有12例測定結果是化學法陰性免疫法陽性。對這12例病人進行分析發現多數病例的病種與消化道出血無關。只有兩例是痔瘡。我們在詢問病史和了解病人病程變化情況以及用藥中發現。多數病例確實有消化道出血的可能，這與實驗結果相符。同時也有影響化學法測定大便潛血假陰性因素存在。故我們認為是化學法假陰性結果所致。

總之免疫法和化學法符合率存在一定的差異，兩者聯合運用可以降低假陽性及假陰性,以提高檢測的準確性。并對潛血的來源及量作出大概的推斷，為臨床提供更好的科學依據。