經典恒溫加速法預測0.5%戊二醛溶液的穩定性

陳渝軍，張少文，管紅珍，馮煜，劉武漢市婦女兒童醫療保健中心，武漢市430016)

0.5%戊二醛溶液為2%戊二醛加入純化水等適量，并調節pH值至7.35～7.45而制得。在臨床上主要為心外科心臟手術固定心包所用。但一次制得的0.5%戊二醛溶液能使用多長時間在臨床上并沒引起足夠的重視及界定。為此，筆者采用經典恒溫加速法預測0.5%戊二醛溶液的有效期。

1 儀器與試藥

小型三用水箱(北京市醫療設備廠)；50%戊二醛(美國陶氏化學有限公司，批號:20090804)；2%戊二醛(武漢東湖星科技有限公司，批號:20091008)；所用試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 分析方法的建立

2.1.1 線性關系考察:精密稱取分析純戊二醛適量，用純化水稀釋成0.5%(g·mL－1)的溶液，備用。參照2005年版《中國藥典》[1]精密量取20 mL，精密加入6.5%三乙醇胺溶液20 mL與鹽酸羥胺的中性溶液25 mL，搖勻，放置1 h，用硫酸滴定液(0.25 mol·mL－1)滴定至溶液顯藍綠色，并將滴定的結果用空白試驗校正。由戊二醛的取用量(W)對消耗硫酸體積(V)作回歸分析，得回歸方程:V＝0.03973W+0.05045(r＝0.9999，n＝6)。結果，戊二醛的取用量在50～300 mg范圍內呈良好線性關系。

2.1.2 穩定性試驗:取“2.1.1”項下溶液(約相當于戊二醛100 mg)按同項中自“精密量取”至“空白試驗校正”規定操作，分別于0、1、2、3、4 h測定吸收度。結果，4 h之內測定樣品，吸收度的相對標準偏差(RSD)＝0.96%，表明放置穩定性較好。

2.1.3 精密度試驗:取“2.1.1”項下溶液(約相當于戊二醛100 mg)按照同項中自“精密量取”至“空白試驗校正”規定操作5次。結果，測定吸收度的RSD＝0.87%。說明本方法精密度好。

2.2 經典恒溫加速試驗

按經典恒溫加速法[2]，將密閉的0.5%戊二醛溶液置入溫度分別為50、60、70、80、90℃的水浴鍋中加速反應，即時取樣作為零時刻的濃度，以此時濃度為100%，繼續恒溫加熱，定時取樣，及時冷卻終止反應，分別測定其濃度，按下式計算供試液的相對百分含量:相對百分含量(%)＝(供試液的吸收度/零時刻的濃度)×100%。各溫度下不同時間點的0.5%戊二醛溶液含量結果見表1。

表1 經典恒溫加速試驗中戊二醛相對百分含量(%)Tab 1Relative percentage of the classic isothermal accelerated test(%)

2.3 數據處理

取表1中各試驗溫度下0.5%戊二醛溶液相對百分含量的常用對數與時間進行回歸性計算，結果顯示有線性關系，詳見表2。

表2 各溫度下回歸方程Tab 2Regression equations at different temperatures

表2結果說明，其含量變化過程屬一級反應。通過直線的斜率得相應溫度分解常數K(分解常數K＝－斜率)，根據Arrhenius指數定律:InK＝InA－E/R(1/T)，以5個InK對1/T進行線性回歸，詳見表3。

表3 各溫度下Arrhenius方程Tab 3Arrhenius equations at different temperatures

由此求出室溫(25℃)時的分解速度常數(K)以及有效期t25℃0.9(即降解10%的時間)分別為:K＝5.1219×－5(h－1)，t25℃0.9＝0.1054/K＝2057.82 h＝85.7 d。

2.4 室溫放置留樣觀察試驗

將0.5%戊二醛溶液在25℃室溫下放置，進行留樣觀察，觀察期為3個月，分別在0、0.5、1、2、3月時測定戊二醛含量，以0月取樣作為零時刻的濃度，此時濃度為100%，計算供試液的相對百分含量，結果見表4。

表4 留樣觀察期內戊二醛的含量測定結果Tab 4Content determination of glutaraldehyde in sample observation period

由表4可見，3批樣品在3個月內戊二醛含量均下降約10%，pH值也由堿性逐漸變為酸性，說明0.5%戊二醛溶液有效期t0.925℃為3個月，從而驗證出加速試驗結果是可靠的。

3 討論

戊二醛在醫學上主要用于殺菌消毒，但也應用于其他基礎醫學研究(如作為固定劑)和直接作為藥物治療等[3]。據文獻[4]報道，0.5%戊二醛溶液還可用于皮試消毒液，故對于0.5%戊二醛溶液更有必要進行質量控制。由于0.5%戊二醛在使用過程中濃度的變化對使用效果的影響至關重要，本文采用經典恒溫加速法與留樣觀察法對該制劑進行穩定性考察，預測的可靠性得到留樣觀察法的驗證，故此預測的有效期可作為該制劑質量控制的參考依據。

本文采用羥胺法測定戊二醛的含量，其原理是戊二醛與鹽酸羥胺反應生成鹽酸，鹽酸被堿性三乙醇胺中和，再用硫酸滴定液滴定過量的三乙醇胺；同時通過空白對照測定值進行校正，計算出戊二醛含量[5]。本試驗所用的分析純戊二醛按照《中國藥典》單位為g/g，故在取用時應注意是稱取而不是量取。在試驗的過程中可見其pH值均有下降，尤其溫度越高下降越快，且在90℃加熱48 h后溶液顏色明顯加深變黃，在72 h時顏色同標準黃色4號。

本試驗反應的戊二醛的有效期為85.7 d，與文獻[6]報道的戊二醛水溶液在堿性條件下不穩定，使用中的堿性戊二醛溶液放置時間不應超過2周，其殺菌活性逐漸減弱相符。因此，配制的0.5%戊二醛溶液應盡快使用。

[1]國家藥典委員會編.中國藥典(二部)[S].2005年版.北京:化學工業出版社，2005:451.

[2]平其能.現代藥劑學[M].北京:中國醫藥科技出版社，1998:144.

[3]李臨生，張京東，張昌輝.戊二醛消毒劑的特點與應用[J].日用化學工業，2004，34(6):385.

[4]薛永懷，常虹，王登秀.戊二醛消毒液用于過敏試驗皮膚消毒的探討[J].護理學雜志，2000，15(1):36.

[5]宋鈺.酸堿滴定法測定戊二醛含量影響因素的研究[J].中國消毒學雜志，2007，24(4):325.

[6]徐清，李駿，陳光慈.2005年～2008年醫療機構堿性戊二醛有效含量監測[J].中國衛生檢驗雜志，2008，18(12):2679.