王文紅
(江西省腫瘤醫院 南昌330029)
魚腥草(Houttuynia cordata Thunb)屬三白草科(saurura-cese)蕺菜屬(Houttuynia)野生草本植物,其莖葉搓碎后有魚腥味,故名魚腥草[1、2]。魚腥草分布在長江以南及西藏等省區,尤以四川、湖北、湖南、江蘇等省居多,常生長于海拔300~2 600m的背陽山地、林邊、路旁、田埂及洼地草叢中。魚腥草資源豐富,具有清熱解毒、消腫排膿、利尿通淋的功效,其制劑在醫療上廣泛用于感染性疾病的治療。魚腥草的主要活性成分為揮發油和黃酮類化合物,國內外關于魚腥草的研究很多,但主要集中在揮發油部位。由于揮發性成分制備的制劑存在應用障礙,研究魚腥草非揮發性成分的抗菌藥效作用具有實質意義。本研究利用魚腥草不同的提取物進行抑菌實驗,用幾種微生物接種,進行抑菌作用研究,以期了解魚腥草提取物抗感染效果。
1.1 供試菌種 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),大腸桿菌 (Escherichia coli),肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae),均由江西省臨床檢驗中心提供。
1.2 方法
1.2.1 藥液配制 將魚腥草通過水提取法得到提取液后,超濾純化、濃縮成較濃的水提液。另外通過水蒸氣提取器收集到揮發油的飽和溶液。利用已經處理好的水提液及揮發油飽和溶液制成生藥量相同兩種樣品供藥理實驗,兩種樣品分別是魚腥草總提取物(揮發油和水提物混合)、魚腥草揮發油飽和水溶液。
1.2.2 菌液配制 取一標準接種環分純的二次傳代的試驗細菌,接種于1mL的培養基中。(1)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌在1mL的普通肉湯培養基中培養6h,菌液濃度相當于9億個/mL,再用普通肉湯培養基作1:1 000稀釋供用;(2)肺炎鏈球菌在1mL的10%血清肉湯培養基中培養18h,菌液濃度相當于3億個/mL,再用10%血清肉湯培養基作1:10稀釋供用。
1.2.3 試驗步驟 采用液體培養基試管稀釋法[3、4]。(1)取滅菌的試管10支置于試管架上,再以無菌操作每管加液體培養基1mL;(2)無菌操作吸取抗菌藥物1mL,放入第1管中,混勻后吸取1mL放入第2管中,混勻后吸取1mL放入第3管中,如此作逐管倍量稀釋到第9管,混勻后吸取1mL棄去,第10管不加抗菌藥物作菌液對照;(3)每管加入被檢菌液各0.1mL,但第9管不加菌液作藥物對照;(4)置37℃溫箱中培養18~24h后,轉種到相應的固體培養基中培養18~24h,觀察結果。肉眼觀察,含最小量但轉種于固體培養基上不生長細菌的試管所含抗菌藥物的濃度為最小抑菌濃度(MIC)。
結果顯示魚腥草總提取物(揮發油和水提物混合)對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎鏈球菌的體外抗菌試驗的最小抑菌濃度依次為1/16、1/8、1/16,抑菌效果優于魚腥草揮發油飽和水溶液。見表1。

表1 體外抑菌實驗結果
魚腥草中醫應用歷史悠久,藥理作用廣泛,對魚腥草在抗菌消炎、抗病毒、治療呼吸系統疾病、消炎解毒等方面的研究表明其在臨床應用上前景廣闊,開發利用潛力很大。但目前使用揮發油作為有效成分的制劑在臨床應用中碰到困難,國家食品藥品監督管理局決定自2006年6月1日起,在全國范圍內暫停使用魚腥草注射液等7個注射劑,暫停受理和審批魚腥草注射液等7個注射劑的各類注冊申請[5]。為了充分利用好魚腥草資源,除了對揮發油部分的研究比較深入細致外,還需對其他部位如水溶性成分系統深入的研究。據資料,魚腥草揮發油部分對金黃色葡萄球菌、流感桿菌、卡他球菌、肺炎球菌、大腸桿菌、痢疾桿菌均有較強的抑制作用[6]。本實驗研究顯示,魚腥草總提取物(水提物和揮發油)在抑菌效果方面優于揮發油,為魚腥草的進一步開發奠定基礎。
[1]中國科學院植物研究所.高等植物圖鑒(第一冊)[M].北京:科學出版社,1972.340
[2]馬林,吳豐,陳若蕓.三白草科植物化學及生物活性研究進展[J].中國中藥雜志,2003,28(3):196-198
[3]廖德勝,王敬勉,趙家振,等.魚腥草黃酮的制備及其應用研究[J].中國食品添加劑,2002(2):81-83
[4]戴偉鋒,楊國榮,周強,等.魚腥草中總黃酮提取工藝考察[J].云南化工,2006,33(1):11-14
[5]關于魚腥草注射液等7個注射劑有關處理決定的通知[J].中國醫藥技術與市場,2006,6(5):12-13
[6]全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編(上冊)[M].北京:人民出版社,1978.553-554