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豬圓環病毒分子生物學研究進展

2010-06-19 05:25:40蔡家利
四川畜牧獸醫 2010年10期
關鍵詞:檢測方法

葉 芬,蔡家利

(1.西南大學動物科技學院,重慶 400715;2.重慶理工大學化學與生物工程學院,重慶 400050)

1 病毒基因組結構及其編碼的主要蛋白

1.1 病毒的基因組結構和特點 PCV基因組為單鏈環狀DNA分子,根據PCV的致病性、抗原性及核酸序列,將PCV分為PCV1和PCV2兩個血清型。PCV1的基因組全長為1 759bp,基本沒有致病性,PCV2的基因組全長為1767bp或1768bp。兩個血清型的核苷酸的同源性低于80%,由基因序列推出的氨基酸的序列同源性小于76%。PCV2分離株間核苷酸的同源性大于94%,而PCV1分離株間核苷酸的同源性大于99%。

PCV基因組中含有圓環病毒所特有的莖環結構(Stem-loop structure),它是一保守的9核苷酸基序,序列為 TAGTATTAC(PCV1)或 AAGTATTAC(PCV2),這一序列對病毒DNA的復制非常關鍵,DNA的環復制就是從這里開始。莖環結構下游有4個六聚體重復(5′-CGG-CAG-3,H1 H2 H3 H4),這些序列是病毒復制酶蛋白的結合位點。

Hamel等(1998)應用軟件對PCV基因組進行分析,發現PCV1和PCV2均可能含有11個開放閱讀框(ORF)。其中 ORF1、2、3、4、7和 8具有一定的同源性,其余ORFs無任何同源性。編碼的蛋白大小從36 kDa~2 kDa不等。現已證實,PCV有兩個主要的閱讀框:ORF1和ORF2,二者在長度上都大于600bp。ORF1編碼與病毒復制相關的Rep蛋白,該蛋白氨基酸序列相當保守,是PCV1和PCV2產生抗原交叉性的主要原因;而ORF2編碼病毒的主要結構蛋白Cap,它是主要的免疫蛋白。

PCV2基因組的11個閱讀框大小相差懸殊(見表1)。其中 ORF1、ORF5、ORF7、ORF10,5′~3′方向相同;ORF2、ORF3、ORF4、ORF6、ORF8、ORF9、ORF11,5′~3′方向相同。這些閱讀框表現為重疊基因,從而充分利用了圓環病毒有限的遺傳物質,這可能是生物進化過程中自然選擇的結果。

表1 PCV2基因組的閱讀框概況

1.2 病毒編碼的主要蛋白

1.2.1 Rep蛋白 Rep蛋白……

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