拉莫三嗪對腦出血大鼠腦組織含水量的影響

郭志松 邵換璋

河南省人民醫院中心ICU 鄭州 450003

1 資料與方法

1.1 實驗動物和分組 健康成年雄性 Wistar大鼠72只,體質量220～250 g,由鄭州大學實驗動物中心提供,合格證號:SYK2006-11。隨機分為對照組 8只,手術組 32只,治療組32只。后2組又分為12 h、1 d、3 d、7 d四個時間點進行腦組織含水量檢測,每組每個時間點為8只大鼠。

1.2 腦出血模型的制作和成功的標志 大鼠經10%水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉后,俯臥位固定于立體定位儀上,用微量進樣器由股動脈抽取血液 50μl緩慢注入尾狀核位置,留針15min。對照組注入等量生理鹽水。動物麻醉清醒后,參照Zea Longa等評分標準,累積1分以上為成功模型。

1.3 腦組織含水量的測定 實驗大鼠斷頭取腦后,取進針道前約3 mm厚的腦組織。用電子天平先稱取濕重,電熱恒溫培養干燥兩用箱100℃烘烤48 h,再稱取干重。利用腦組織含水量=(鮮質量-干質量)/鮮質量×100%進行計算。

1.4 統計學方法 所有數據以均數±標準差表示組間比較用方差分析,數據處理采用SPSS 12.0軟件進行分析。α=0.05為檢驗水準。

2 結果

2.1 實驗動物的一般情況 在腦出血模型中,有3只大鼠死亡,其中4只死于麻醉意外,2只死于出血波及顱底,由備用動物補充。腦出血組動物麻醉清醒后均出現不同程度的精神萎靡,反應遲鈍,自潔能力下降,進食減少。對照組大鼠精神恢復,反應及進食正常。腦出血大鼠于術后6 h即可觀察到其行為學改變,均出現較明顯左側肢體偏癱、旋轉爬行或拖步行走,神經缺損體征以造模后12～24 h最為明顯,72 h后分別出現不同程度的改善。對照組未出現上述神經缺損癥狀。

2.2 腦組織含水量變化 手術組腦組織含水量在出血后12 h開始增加,3 d時水腫達到峰值,7 d有所減輕,治療組與手術組比較各時間點的腦組織含水量均相應降低,差異具有統計學意義(P＜0.05)。對照組在12 h～7 d變化不明顯。詳見表1。

表1 各時間點大鼠腦組織含水量的變化 (%)

3 討論

拉莫三嗪的化學結構為3,5-二氨基-6-(2,3-二氯苯基)-1,2,4-三丫嗪,目前主要用于難治性癲的治療。其作用環節是抑制突觸前膜興奮性氨基酸谷氨酸的釋放,抑制鈉通道開放,穩定過度興奮的神經元膜,減少Cl-和H2O被動進人細胞內達到減輕腦水腫的作用[1]。

國內有報道LTG可通過降低神經細胞外液谷氨酸的濃度,減輕腦外傷后急性腦水腫[2],但對腦出血后腦水腫的治療作用未見報道。本研究發現腦出血后手術組腦組織含水量在出血后12 h開始增加,3 d時水腫達到峰值,7 d有所減輕,治療組與手術組比較各時間點的腦組織含水量均相應降低,差異具有統計學意義(P＜0.05)。對照組在12 h～7 d變化不明顯。認為其可能機制是:(1)作用于電壓依賴鈉通道,抑制突觸前膜谷氨酸的釋放,從而使NR1激活減少,細胞損害減輕。本實驗中可見 NR1在治療組的陽性表達明顯減少,細胞損害減輕,與Bather[3],Pisani[4]的研究一致。(2)作用于電壓門控性鈣通道(VGCCs)參與神經元興奮性和傳導性的調節,并通過鈣離子濃度的變化影響第二信使系統。VGCCs還參與細胞毒性作用,通過激活一系列酶活動,產生細胞損害。LTG可作用于VGCCs調節神經遞質釋放,降低鈣調性細胞毒性而發揮神經保護作用。此外對離體腦皮層突觸小體的研究中,發現LTG通過減少突觸前膜鈣離子內流,以濃度依賴的方式,抑制由4-AP誘導的皮質,紋狀體谷氨酸鹽的釋放。還能減少因膜去極化產生的細胞內游離鈣離子濃度升高[5]。

該研究提示拉莫三嗪可以減輕實驗腦出血大鼠腦組織含水量,早期應用拉莫三嗪進行治療可能作為預防和減輕腦損傷的有效途徑。

[1]Peck AW.Clinical pharmacology of lamotrigine[J].Epilepsia,1991,32:9-l2.

[2]程員.拉莫三嗪治療腦外傷后腦水腫的實驗研究[J].中華創傷志,1998,14:209-211.

[3]Pisani F,Pedale S,Macaione V.Neuroprotective effect of lamotrigine and remacemide on excitotoxicity induced by giutamate againist in isolated chick retina[J].Exp Neurol,2001,170:162-170.

[4]Wang SJ,Tsai JJ,Gean PW.Lamotrigine inhibits tetruethylammonium induced synaptic plasticity in the rat amygdala[J].Neuroscience,1997,81:667-671.

[5]Wang SJ,Sihra TS,Gean PW.Lamotrigine inhibition of glutamate release from isolated cerebrocotical nerve teminals by amppression of voltage-activated calcium channel activity[J].Neuroreport,2001,12:2255-2258.