張桂賢 (臨沂師范學院生命科學學院 276005)
我國奶牛乳房炎發病率高達70%~80%[1]。而奶牛乳房炎是造成奶牛業損失最多的一種疾病[2],。山東作為畜牧大省,奶牛養殖業發展很快,但受到飼養管理水平及疾病防治技術的限制,奶牛乳房炎發病率較高,而目前濫用抗生素的現象十分普通,造成許多病原微生物的耐藥性,給乳房炎的治療帶來很大的困難。針對以上原因本試驗對臨沂市蘭山區各養殖戶的乳樣進行乳房炎致病菌的分離鑒定,旨在為該地區奶牛乳房炎的治療提供試驗依據。
乳樣來自臨沂市蘭山區各奶牛養殖戶,共采樣45份,采樣前先用溫水清洗采樣乳頭,再用75%酒精棉消毒乳頭,在每次清洗或消毒乳頭后均用消毒紙巾擦干,棄去采樣乳區的頭2把乳,然后采集乳汁約10~l5 ml,擠入滅菌瓶中,帖好標簽后及時送檢(期間在4℃冰箱保存,待檢)。
麥康凱瓊脂、伊紅美藍瓊脂、三糖鐵瓊脂、兔鮮血瓊脂培養基、普通瓊脂培養基、65%的氯化鈉肉湯等均按文獻[3]自配;細菌生化微量鑒定管購自杭州天和微生物試劑有限公司;乳腺炎診斷液(SMT試劑,自配,配置方法:十二烷硫酸鈉20g,草酚藍20mg,蒸餾水1000ml,調整pH至6.2~6.4)[4]。
在每個平皿中倒2ml乳樣,加入等量診斷液,將平皿平置旋轉搖動,使診斷液與乳汁充分混合,經10s后觀察,根據混合液有無絮狀物及沉淀程度來判定結果混合液均勻,流動性好,無絮狀物(陰性-);有少許絮狀物或沉淀產生(弱陽性+);……