鯽魚中草藥誘食劑的研究

楊啟超 遲健 李宏剛 尹海富

(1.黑龍江省甘南縣畜牧水產局 甘南 162100;2.東北農業大學水產養殖系 哈爾濱 150030)

1.研究水產動物誘食劑的意義

近年來,隨著魚、蝦、蟹類等水產動物集約化養殖的迅猛發展,人工飼料在水產養殖業中的地位已越來越重要。魚粉是飼料工業中最重要的蛋白源,然而,由于資源衰竭及受不良氣候的影響,世界魚粉總產量正逐漸下降,導致供需不平衡,使魚粉價格不斷上揚、養殖成本升高,從而嚴重制約了水產養殖業的發展。開發新型飼料蛋白源是節約魚粉使用量的技術途徑之一(艾慶輝等 2005)。然而,大量的替代蛋白源應用于飼料生產中,引起適口性差、攝食率低、生長受阻等一系列問題;以及在魚類養殖過程中,大量未利用的配合飼料進入水體后造成嚴重的水體污染。因此,在水產動物飼料中添加促攝食物質以提高飼料的誘食性,是當前水產飼料生產中面臨的重要問題之一。提高攝食率不但能夠節約飼料,降低養殖成本,在環保方面也有重要的意義。中草藥對魚類不但具有誘食和提高適口性的作用,而且大多數中草藥是魚類生長所必需的營養物質,并具有抗病作用。在飼料中添加中草藥,改善配合飼料的口味,能刺激水產動物的嗅覺、味覺和視覺等,從而提高動物的食欲,促進攝食行為,有效地提高飼料效率。因此,研究水產飼料誘食劑的應用技術和產品開發,促進和改善魚、蝦攝食行為,在規模化飼養中減少污染和流行病,推廣生態養殖,對提高經濟效益和生態效益具有現實意義。

中草藥來源于動物、植物、礦物質及其產品,其具有成本低廉、天然、高效、毒副作用小、抗藥性不顯著、容易大量獲得等優點。此外部分中草藥還具有抗病毒、殺菌、增強機體免疫力、調整機體新陳代謝、誘食等作用。近年來中草藥在畜牧、水產和飼料行業中得到廣泛關注,它作為一種綠色飼料添加劑具有重要的研究意義和廣泛的應用前景。

2.材料與方法

2.1 實驗材料

2.1.1 實驗設備和儀器

水族箱(1.0 m×0.5 m ×0.5 m)、過濾泵、充氧泵、加熱棒、計數器、溫度計、脫脂棉、紗布、電子稱等。

2.1.2 實驗用魚

鯽魚(Carassius auratus)購自中國水產科學研究院黑龍江水產研究所,平均體重為(45.8±8.2)g。運回用 8mg/L的高錳酸鉀溶液浸洗消毒 10～15min后,暫養于室內玻璃水族箱(1.0 m×0.5 m×0.5 m)內,投喂基礎配合飼料(表 2-1),日投飼率為 2%～3%,飼喂 15 d后選擇體質健壯、無傷、大小整齊的鯽魚進行實驗。水族箱安裝水循環過濾器和加熱裝置,其有效水體積為 200 L。實驗期間以經過充分曝氣的自來水作為水源,水溫控制在(19±1)℃,持續充氧,每 3 d換水1/3。

2.1.3 基礎飼料

實驗用基礎飼料配方及其營養成分見表 2-1,飼料粒徑為 2.0mm。

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2.1.4 中草藥

試驗采用大茴香、蘇葉、植物肽、木香和公丁 5種中草藥及復合氨基酸,均購自哈爾濱道外中藥材市場,其化學成份與氣味見表 2-2。

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2.2 試劑和試劑球制備

分別根據每種中草藥設定的濃度稱取一定量的各種中草藥,裝入預先量好 100mL蒸餾水的小燒杯中,浸泡 60min,制成不同的濃度梯度的溶液備用。

用量筒量取 10mL濾液倒入 50mL的小燒杯中,將試球(半徑約 1.5cm的外層包有紗布的醫用脫脂棉球)放入其中浸泡 60min,系上棉線,即為實驗組試劑球,對照組試球以蒸餾水代替濾液做同樣處理。

2.3 實驗方法

本實驗采用咬球和攝食生長相結合的方法,通過咬球次數、攝食率和增長率等指標綜合評價中草藥的誘食效果。

2.3.1 最適濃度的篩選

按試劑類型設置30個水族箱,每個水族箱放入 15尾鯽魚,并把預先做好的試劑球懸掛到水族箱里,試劑球位于水族箱的正中間且在水下15cm處,投入試球3min后開始連續記錄每5min鯽魚啄食試球的總次數,共記錄20min。另設一組作為對照組,每個水族箱的鯽魚每天實驗一次,每次實驗后清洗水族箱并換水,實驗期間水溫為(19±1)℃,pH為 6.5～7.3。保持對照組和實驗組每次實驗條件都一致。同時每個濃度做三個平行組。

2.3.2 攝食率實驗

共設30個水族箱,每個水族箱鯽魚 15尾,空腹 24 h后稱重,每種飼料設置三個平行組。把按篩選出的中草藥的最適濃度計算出質量,添加到基礎飼料里進行投喂,實驗期間水溫在(19±1)℃之間,溶解氧為 4.5mg/L。采用飽食量投喂法,每日投喂兩次,時間為 9:00和 15:00,第二次投喂完畢后 30min用虹吸法吸底,同時換水 1/3,15 d實驗結束后魚空腹 24 h逐箱稱重。實驗指標計算方法如下:

增重率(WGR)=100%×(Wt-W0)/W0

飼料系數(FCR)=攝食飼料量/魚體增重量

日攝食率(%)=攝食量/[(Wt-W0)/2×t]×100%

式中:WGR為增重率(%);W0為實驗前魚的體重(g);Wt為實驗結束時魚的體重(g);t為飼養天數。

2.3.3 誘食效果評價方法

以5min為單位,取實驗魚啄咬試球的總次數為觀察值,每次測試的數據以 3次重復的平均值±標準差(M±S D)表示。以實驗組與對照組的數值之差的大小來判斷誘食劑對鯽魚的誘食效果,負值表示抑制攝食,正值表示誘導攝食。

2.4 數據處理

實驗結果用SPSS統計軟件包分析,采用平均數用方差分析后進行組間差異的多重比較。

3.結果與分析

3.1 中草藥濃度的篩選結果與分析

通過對大茴香、蘇葉、植物肽、木香、公丁 5種中草藥和復合氨基酸的攝食行為學反應,以及在不同的濃度下得出了以下各表中的數據。

3.1.1 大茴香

不同濃度的大茴香(0.05%～0.95%)對鯽魚的誘食效果見表3-1。

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由表 3-1可以看出,0.05%大茴香和0.25%大茴香之間差異不顯著(P＞0.05)而與其它各組之間差異均顯著(P＜0.05),且 0.05%大茴香咬球次數明顯高于其它組,表現出很好的誘食效果。

3.1.2 蘇葉

不同濃度的蘇葉(0.15%～1.50%)對鯽魚的誘食效果見表3-2.

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從表 3-2可以看出,0.75%蘇葉和 1.05%蘇葉與對照組及其它各組差異均顯著(P＜0.05),其它各組與對照組相比差異也顯著(P＜0.05)。

3.1.3 植物肽

不同濃度的植物肽(0.05%～0.50%)對鯽魚的誘食效果見表 3-3

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從表3-3可以看出,0.25%植物肽達到了最高值,除了與0.30%植物肽之間差異不顯著(P＞0.05)外,與其它各組之間差異均表現為顯著(P＜0.05),且與對照組之間差異極顯著;0.05%植物肽、0.10%植物肽和0.15%植物肽之間差異均不顯著(P＞0.05),0.05%植物肽與 0.10%植物肽和對照組之間差異均不顯著(P＞0.05)。

3.1.4 木香

不同濃度的木香(0.05%～0.95%)對鯽魚的誘食效果見表3-4。

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從表 3-4可以看出,0.05%木香、0.15%木香、0.25%木香、0.85%木香與對照組之間均差異顯著(P＜0.01),其它各組與對照組之間差異都不顯著(P＞0.05);另外,0.05%木香與 0.85%木香差異均顯著(P＜0.05),所以 0.05%木香對鯽魚的誘食效果更好。

3.1.5 復合氨基酸

不同濃度(0.25%～0.50%)的復合氨基酸對鯽的誘食效果見表3-5。

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從表 3-5可以看出,0.35%復合氨基酸達到了最高值,除了與 0.40%和 0.45%復合氨基酸之間差異不顯著(P＞0.05)外,與其它各組之間差異均表現為顯著(P＜0.05),且與對照組之間差異顯著(P＜0.05)。

3.1.6 公丁

不同濃度的公丁(0.05%～0.95%)對鯽魚的誘食效果見表3-6。

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從表 3-6可以看出,0.05%公丁和0.15%公丁咬球次數高于對照組及其它各組,與對照組及其它各組之間差異均顯著(P＜0.05);又因為 0.05%公丁和0.15%公丁之間差異顯著,所以 0.15%公丁誘食效果要好于其它各濃度。

3.2 5種中草藥及復合氨基酸攝食率實驗的結果與分析

經過 15d的攝食率實驗,各組魚成活率均為 100%,其它項結果見下表 3-7。

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從表3-7可以看出,在同一基礎飼料中加入不同的中草藥及氨基酸飼喂鯽魚,0.35%復合氨基酸和0.05%木香對鯽魚的誘食效果最好,0.05%大茴香和 0.25%植物肽對鯽魚誘食效果次之,而 0.75%蘇葉和 0.15%公丁誘食效果最差。0.35%復合氨基酸和 0.05%木香的增重率明顯高于其它組,分別為 41.96%和 36.08%,分別比對照組(10.97%)高 282.50%和 228.90%,與對照組差異顯著(P＜0.05);飼料中添加 0.35%復合氨基酸比 0.05%木香高 16.30%,與對照組差異顯著(P＜0.05),表現出明顯的增重作用。0.35%復合氨基酸和 0.05%木香的飼料系數分別為 0.92和 0.89,比對照組(1.95)低 52.82%和 54.36%,且與對照組之間差異顯著(P＜0.05)。

4.討論

4.1 中草藥對鯽魚的誘食效果

由表 3-1至表 3-6得知,5種中草藥和復合氨基酸都對鯽魚有不同程度的誘食作用,這可能與它們本身呈現的特殊氣味有關,因為他們含有揮發性低分子有機物而且有特殊氣味,其強烈的芳香氣味對多數魚類的嗅覺有刺激作用,能吸引魚類攝食;而且在實驗中觀察到,剛放入實驗水族箱內,魚類就呈興奮和探尋狀態并一一游過來,也可能與它們所含的化學成分(如氨基酸、有機酸、酯、小肽等)有關。實驗結果顯示:5種單體中草藥和復合氨基酸對鯽魚的最適誘食濃度分別為:復合氨基酸為 0.35%、大茴香為 0.05%、公丁為 0.15%、蘇葉為 0.75%、木香為 0.05%、植物肽為 0.25%,這與周燕俠、韋加滕、梁增林的研究結果相似。在中草藥(最適誘食濃度)的攝食率實驗中,各組鯽魚的成活率均為 100%。但各種中草藥誘食效果有一定的差異性,0.35%復合氨基酸和 0.05%木香對鯽魚的誘食效果最好,0.05%大茴香和 0.25%植物肽對鯽魚誘食效果次之,而0.75%蘇葉和0.15%公丁誘食效果最差。

復合氨基酸比較 5種中草藥誘食效果最強,可能與它所含的成分中的顯味基質有關,在設定的濃度范圍(0.25%～0.50%)內,復合氨基酸在 0.25%～0.35%時,隨著濃度的增加鯽魚咬球次數逐漸增加,誘食效果明顯增強,而復合氨基酸在 0.35%～0.50%時,隨著濃度的增加鯽魚咬球次數逐漸減少,誘食效果明顯減弱,甚至表現為抑制作用,在 0.35%時達到最大,這與李志紅研究結果一致;與許國煥等報道以復合氨基酸為顯味基質試制的魚用香味劑,添加鯉飼料,明顯促進鯉攝食配合飼料,復合氨基酸對大口鯰的誘食作用更強相類似。

4.2 中草藥的促生長效果

實驗表明鯽魚在攝入添加不同中草藥和氨基酸的飼料后,在生長速度上都比對照組有了不同程度的提高,0.35%復合氨基酸、0.05%木香、1.25%植物肽、0.05%大茴香和 0.75%蘇葉的綜合指標明顯優于對照組;在飼料中添加 0.35%復合氨基酸效果最好,其次是木香。表明鯽魚通過添加不同的中草藥的飼料組,能夠提高生長速度,并且這些較高的生長速度不是通過攝食量的顯著增加來獲得的。

4.3 影響誘食效果的因素

誘食劑促攝食效果的好壞取決于動物對其氣味與味道的嗜好,一方面體現在其組成的誘食活性成分上,另一方面還與其濃度有一定的關系。中草藥對鯽魚具有誘食作用的原因可能有以下兩個:

(1)富含氨基酸、生物堿和核昔酸等對魚類有強烈引誘作用的促攝食物質;

(2)中草藥獨特的味道,可能對鯽魚的味覺與嗅覺具有顯著的刺激作用。實驗中產生抑制作用的中草藥實驗鯽魚強烈排斥,可能是因為這幾種物質適口性差,或其有效成分的化學結構不能被鯽魚的味覺感受到(韓研研2003)。我國中草藥資源豐富,且有開發利用的優勢條件。凡是有消食健胃,除滯止酵,殺蟲,解毒,興奮腸胃蠕動,補充營養等功效的中草藥均能促進魚類攝食與增強抗病。