209例兒童血清HBV標志物與HBV DNA檢測分析

馮艷梅

（山西省呂梁市離石區中醫院，山西呂梁033000）

乙型肝炎病毒感染是世界最嚴重的公共衛生問題之一，我國是乙型病毒性肝炎的流行大國，乙型肝炎病毒表面抗原攜帶者實際人數超過1.2億，病毒性肝炎及相關性肝病如肝硬化(LC)、肝癌(HCC)，是嚴重危害我國人民健康的常見病[1]。兒童時期感染HBV者，大多數轉變為慢性感染[2]，并在以后可能發展為肝硬化和肝細胞癌，對其今后生長發育和身心健康都會帶來很大的影響，因此HBV感染的快速、敏感的診斷方法，將顯著影響慢性HBV感染的流行及其不良后果的發生。為此，筆者檢測了呂梁市209名感染兒童HBV血清學模式和HBV DNA含量，以評價血清標志物和DNA檢測在兒童HBV感染中的診斷價值，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

209例血清標本采自呂梁市離石區中醫院和地區醫院兒科2007年1月～2009年10月住院及門診HBV感染者，其中，男 132 例，女 77 例，年齡為 0.5～12 歲，平均(7.3±2.6)歲。無菌收集患者血清標本并置-80℃冰箱中貯存備用。

1.2 方法

1.2.1 血清標志物檢測 使用上海科華生物工程公司試劑盒（酶聯吸附免疫法）檢測所有血清標本 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和 HBcAb。

1.2.2 HBV DNA檢測 HBV DNA定量檢測試劑來自深圳匹基生物工程股份有限公司，采用BIO-RAD i-Cycler熒光定量PCR檢測儀進行檢測。熒光PCR循環程序設置如下：37℃，5 min；94 ℃，1 min；95 ℃，5 s；60 ℃，30 s；42 個循環；40 μl反應體系；60℃收集熒光信號，熒光信號收集時設定為Fam熒光素。檢測理論極限：125 copies/ml，實驗采用陽性截止值為≥500 copies/ml。

1.3 統計學處理

采用SPSS12.0對所得數據進行統計分析，計數資料采用卡方(χ2)檢驗，所有數據以均數±標準差表示，顯著性檢驗水準為 P＜0.05。

2 結果

209份標本根據HBV血清標志物（HBV M）陽性模式可分為四組，其中模式 1（HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+）85 例，模式 2(HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+)71 例，模式 3(HBsAg+、HB-cAb+)46 例， 模式 4 （HBsAb+、HBeAb+/- 、HBcAb+）7 例。HBV DNA陽性率在模式1、模式2、模式3、模式4分別為96.5%、35.2%、45.7%、14.3%。 各組比較，有顯著性差異（χ2=88.556，P=0.000），見表 1。

表1 HBV M感染模式與HBV DNA陽性率的關系

3 討論

乙肝血清標志物(HBV-M)的檢測是臨床診斷乙型肝炎病毒感染及病程發展的準確而可靠的依據，也是診斷乙型肝炎的重要指標，但主要反映人體對HBV感染的免疫狀態，沒有直接反映HBV在患者體內的復制情況，更不能作為判斷患者是否具有傳染性的直接證據；而PCR則可以準確反映出HBV-DNA的復制水平、病程變化和治療恢復情況等。PCR法檢測HBV-DNA直接反映病毒存在、活動性復制及具有傳染性的可靠指標，使得臨床醫生對于乙肝患者體內的HBV的復制以及傳染性有了更直接的了解，從而也更有利于臨床HBV感染的診斷、治療方案選擇及療效的判斷。本研究 HBV DNA 陽性率在模式 1 （HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+）、模式 2(HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+)、模式 3(HBsAg+、HB-cAb+)、 模式 4 （HBsAb+、HBeAb+/- 、HBcAb+） 中分別為96.5%、35.2%、45.7%、14.3%，與文獻[3-4]檢測 HBV DNA 的結果基本相符。同時本研究結果說明HBsAg的存在特別是HBeAg的出現，乙肝病毒的復制非常活躍，HBsAg和HBeAg可作為臨床HBV感染和強傳染性的重要指標；但隨著HBeAg/HBeAb的陽性轉換，并不是所有的感染者HBV-DNA都隨著轉陰，相當一部分HBeAb陽性的所謂小三陽患者HBV-DNA持續陽性。

綜上所述，HBV-M與HBV DNA二者之間互有聯系但又有所不同。筆者建議采用熒光PCR方法對乙肝血清學標志物陽性的兒童進一步作HBV DNA檢測，以判定疾病的嚴重程度及傳染性高低，以指導醫務人員盡早采取積極合理的防治方案，防止患兒病情惡化或慢性化及個體間的傳播。

[1]姚集魯,高志良,彭曉謀,等.病毒性肝炎臨床診治的基礎與應用研究[J].中山醫科大學學報,1999,20(1):169.

[2]謝新寶,朱啟镕.乙型肝炎病毒母嬰傳播和阻斷的研究進展[J].傳染病信息,2006,19(3):101-102.

[3]王曉東,李秀全,李鳳煥,等.慢性乙肝血清標志物與HBV DNA水平的關系[J].國際檢驗醫學雜志,2006,27(12):1070-1072.

[4]許鐵軍,曹遠陸,喬春格,等.乙型肝炎血清標志物與HBV DNA含量的相關性分析[J].檢驗醫學與臨床,2006,3(6):247-248.