復方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液在雞體內藥代動力學試驗

張志美,沈志強,郭時金,張 穎,王艷萍,周春鳳

(1.山東省濱州畜牧獸醫研究院,山東濱州256600;2.山東綠都安特動物藥業有限公司,山東濱州256600)

復方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液系在復方磺胺間甲氧嘧啶鈉溶液的基礎上添加天然藥物蜂膠,采用中西醫理論精制而成的獸藥新制劑。由于蜂膠具有優良的抑菌、殺菌及免疫促進作用,與原有藥物相比,新制劑增強了抗菌效果,同時提高了動物體的免疫能力。本試驗采用高效液相色譜法測定雞體內磺胺間甲氧嘧啶鈉和甲氧芐啶濃度,研究復方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液在雞體內的藥代動力學特征,同時選用獸藥典現有藥物復方磺胺間甲氧嘧啶鈉溶液做參比進行評價,為復方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液的臨床應用提供試驗依據。

1 材料與方法

1.1 藥品和試劑 受試制劑:復方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液(批號20080325,含量:100 mL含磺胺間甲氧嘧啶鈉(SMM-Na)10 g+甲氧芐啶(TMP)2 g+蜂膠0.04 g(以白楊素計));參比制劑:復方磺胺間甲氧嘧啶鈉溶液(批號20080511,含量:100 mL含SMM-Na 10 g+TMP2 g),上述藥物均由山東綠都安特動物藥業有限公司提供;磺胺間甲氧嘧啶鈉對照品(含量99.9%,德國DR公司);甲氧芐啶對照品(含量99.9%,中國獸醫藥品監察所);肝素、甲醇、二甲基甲酰胺、磷酸等試劑均為分析純;流動相用甲醇為色譜純;試驗用水為超純水。

1.2 主要儀器 Agilent 1100型高效液相色譜儀配紫外檢測器,Sartorius型電子天平,Sigma高速離心機,漩渦混合儀。

1.3 試驗動物 健康成年商品肉雞20只,體重1.5 kg±0.2 kg,雌雄各半,試驗前飼喂全價不含藥物添加劑的基礎日糧,預飼1周。

1.4 試驗方法

1.4.1 色譜條件Hypersil ODS C18色譜柱(4.6×150 mm,5 μ m);流動相 0.02 mol/L 磷酸溶液-甲醇(80∶20,V/V),檢測波長270 nm,流速1 mL/min,柱溫30℃,進樣量20 μ L。

1.4.2 給藥及采血 采用雙周期自身隨機交叉試驗設計。20只雞隨機分為2組,按照SMM-Na 100 mg/kg體重、TMP 20 mg/kg體重分別給每只雞灌服兩種藥物。兩次用藥間清除期為1周。每只雞分別于給藥前和給藥后 0.083、0.25、0.5、1、2 、4、6、8、12、24、36 h和48 h自翼靜脈采血,每次大約1 mL,置5 mL含肝素的離心管中,3 000 r/min離心10 min,分離的血漿置于-20℃冰箱保存。

1.4.3 樣品處理 將冷凍保存的血漿樣品室溫條件下解凍,搖勻后吸取0.3 mL于1.5 mL微量離心管中,加入0.5 mL甲醇,漩渦混合2 min后12 000 r/min離心10 min,吸取有機相過0.45 μ m有機濾膜后HPLC檢測。

1.4.4 數據分析處理 藥-時曲線圖采用Excel軟件繪制;藥物動力學模型擬合、參數計算采用3P97藥動學軟件分析。

2 結果與分析

口服給藥后,不同時間點采血,血漿藥物濃度平均值見表1,主要藥動學參數見表2。對受試制劑與參比制劑藥代動力學參數AUC(0～t)和AUC(0～∞)經對數轉化后進行單因素方差分析及雙向單側t檢驗,結果表明,兩制劑在周期間無顯著性差異(P＞0.05);其他藥代動力學參數比較,受試制劑Cmax較低,Tmax相應延長,T1/2ke變大,說明受試制劑具有一定的緩釋動力學特征。

3 討論與小結

經房室模型分析,復方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液中SMM-Na和TMP在雞體內均為有吸收一室開放模型,給藥后5 min,血漿中即可檢測到SMMNa,給藥后4.26 h血藥濃度達到最大,為8.36 mg/L,TMP在給藥后2.15 h達到峰濃度1.16 mg/L,消除半衰期分別為13.42 h和4.27 h,文獻報道分別為9.05 h和2 h[1],分析原因可能為蜂膠中的部分藥物吸附作用,從而導致藥物消除速度降低。

本試驗用兩制劑、兩周期交叉設計方法對復方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液與現有產品復方磺胺間甲氧嘧啶鈉溶液進行了生物能評價,藥代動力學參數AUC對比,生物利用度F值性能良好,經對數轉化后進行單因素方差分析及雙向單側t檢驗,受試制劑AUC90%置信區間為86.2%～93.7%,在參比制劑80%～125%范圍內,另外,受試制劑Cmax較低,Tmax延長,T1/2ke變大,表現出一定的緩釋性能與持效的特征。

表1 灌服不同制劑后雞血漿中各藥物平均測定值

表2 受試制劑和參比制劑中兩種藥物的主要藥動學參數

[1]馮淇輝.獸用抗菌藥物代謝動力學研究[M].北京:科學出版社,1989:195-200.