急性冠脈綜合征患者MMP-2變化及其與冠脈病變程度的關系

崔 燕,吳東垣,葉建華,祝金明

(吉林大學第二醫院心血管內科,吉林長春130041)

本研究通過觀察急性冠脈綜合征(ACS)患者基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)變化,探討其在ACS發生、發展中的作用及其與冠狀動脈病變程度的關系。

1 材料與方法

1.1 對象 選擇2007年9月至2008年2月于本院心內科住院的急性冠脈綜合征患者40例,其中急性心肌梗死組(AMI)20例,平均年齡51.9±9.8歲,均伴有心電圖和/或心肌酶學改變。AMI診斷標準:①典型胸痛癥狀持續30分鐘以上;②心電圖上2個或2個以上相鄰導聯ST段抬高≥0.1 mv(V1-3≥0.2 mv);③典型的心肌壞死生物學標記物(cTnI/cT-nT)或CK-MB的動態改變,符合其中任意兩條即可診斷。不穩定型心絞痛患者20例,平均年齡58.9±13.1歲,包括初發心絞痛、惡化勞力性心絞痛。對照組為冠狀動脈造影證實非冠心病患者20例,平均年齡57.2±12.8歲,收集靜脈血1 ml,離心后提取血清,儲存在-20℃冰箱。

1.2 方法 MMP-2測定酶譜檢測(SDS-PAGE Zymography):10%Polyaerylamidc膠中含有 lg·L-1Gelatin,應用同等量血清蛋白(40 μ g)行蛋白電泳。電泳結束后,把蛋白膠放入2.5%Triton X2100清洗20分鐘,然后將蛋白膠放入培養基中(50 mmol/L Tris HCl,pH7.4,10 mmol/l CaCl2,0.05%Bis Tris35),37℃水浴箱中孵育 24小時。Colloidal Brilliant BlueG2250染色60 min。MMPs在膠中顯示白色區帶,根據分子量判定酶原和酶。根據目的帶的亮度和面積用N7Himage 1.57 Software程序自動讀取并記錄每條帶密度的相對定量值,單位用INT·mm2表示。

1.3 冠狀動脈病變程度 冠狀動脈造影采用Judkin法,每支血管選擇最佳多體位造影。以國際通用的直徑法,由2名有經驗的醫師對造影結果進行分析完成。具體方法為:冠狀動脈造影示腔徑狹窄≥50%的病變,若左前降支、回旋支或右冠狀動脈中1支狹窄者為單支病變組;2支有病變者為雙支病變組;3支均有病變者為3支病變組。對于左主干病變者,無論左前降支或回旋支有無病變,均為雙支病變組;若同時合并右冠狀動脈病變則為3支病變組。冠狀動脈狹窄程度以直徑法百分數表示,若同時累及多支血管或1支血管多處病變,選擇狹窄最嚴重的1支血管。冠狀動脈病變程度評分采用Gensini評分系統[1],其中由兩部分組成:①根據冠狀動脈狹窄程度確定基本評分:冠狀動脈狹窄25%、50%、75%、90%、99%、100%的評分分別是 1、2、4、8、16、32分;②根據冠狀動脈病變部位確定評分系數:左冠狀動脈主干病變的系數為5;前降支近段病變的系數為2.5,中段病變的系數為1.5,第一對角支病變的系數為1.0,第二對角支病變的系數為0.5;回旋支近段病變系數為2.5,鈍緣支病變系數為1.0,遠段病變系數為1.0,后降支病變系數為1.0;右冠狀動脈近段、中段、遠段均為1.0,左心室后降支病變系數為0.5。進行定量評分時,根據每處冠脈狹窄程度所獲得的基本得分值乘以該病變部位的系數即為該處病變的積分。1例患者如有多處病變則各病變處的積分累計總和為該患者冠狀動脈病變嚴重程度的總積分。

2 結果

2.1 不同冠狀動脈病變支數組MMP-2升高水平比較見表1。

表1 不同冠狀動脈病變支數組MMP-2水平比較(±s)

表1 不同冠狀動脈病變支數組MMP-2水平比較(±s)

*與對照組比較,P＜0.05

分組 n MMP-2正常對照組 20 1.462±1.316單支病變組 12 13.693±9.715*雙支病變組 12 8.722±5.941*三支病變組 16 12.227±5.901*

2.2 各組基質金屬蛋白酶-2水平比較見表2。

表2 各組MMP-2水平比較

2.3 急性冠脈綜合征患者血清基質金屬蛋白酶-2與Gensini Score無明顯相關性(r=0.001 9,P=0.990 7)。

3 討論

MMPs是一類依賴于Ca2+、Zn2+的蛋白酶,能由免疫細胞、成纖維細胞、腫瘤細胞、血管內皮細胞、平滑肌細胞及泡沫細胞等分泌,其能分解Ⅳ型膠原,促進中膜平滑肌細胞向內膜下遷移[2],加速動脈粥樣硬化的進程并導致不穩定型斑塊的形成[3]。本研究發現,AMI組、UA組的MMP-2水平均顯著高于非冠心病對照組,且有統計學意義。AMI組MMP-2水平雖高于UA組,但無統計學意義,說明MMP-2可作為粥樣硬化斑塊形成及形態發生改變的血清學指標,用于評估斑塊的穩定性,但不一定能作為斑塊破裂的血清學指標以評價患者是否發生AMI。其主要原因為斑塊破裂的危險因素除了其不穩定性外,還有斑塊承受的機械應力[4]。因此,MMP-2水平將有可能作為不穩定型心絞痛發展為急性心肌梗死的高危因素。本研究結果發現,單支病變組、雙支病變組、三支病變組組間MMP-2水平無統計學差異,說明MMP-2與冠狀動脈病變支數無明顯關系。此外,本研究還發現MMP-2水平,與Gensini Score無明顯相關性。急性冠脈綜合征組與正常對照組相比,MMP-2水平明顯升高且具有統計學意義,而急性冠脈綜合征是不穩定斑塊破裂所致,故MMP-2是動脈粥樣硬化斑塊穩定性指標,與斑塊大小、斑塊數量無關。因此,檢測到血清中MMP-2水平變化有助于估價斑塊的穩定性,早期識別高危病人,及時治療,對減少心臟事件發生具有重大意義。

[1]Godis ZS,Muszynski M,Sukhova Gk,et al.Cytokine-stimalated human vascular smooth muscle cells synthesize a complement of enzymes required for extrecellular matrixdigestion[J].Circ kes,1994,75:181.

[2]UzuiH,Lee JD,Shimizu H,et al.The role of protein tyrosine phosphorylation and gelatinase production in the migration and proliferation of smooth muscle cells[J].Atheroscleresis,2000,149(1):51.

[3]Newby AC zaltsman AB.Molecular mechanisms in intimal hyperplasia[J].J pathol,2000,190(3):300.

[4]Moreno PR,Falk E,palacios IF.Mucrophage infiltration in acute coronary syndromes[J].Circulation,1994,90:775.