髓復康對恒河猴脊髓半橫斷損傷后自由基變化的調節作用

何 爽，張萬強，朱 嘉，孔煥宇

(1.長春大學 特殊教育學院，吉林 長春 130022；2.中國中醫科學院望京醫院，北京 100000)

急性脊髓損傷(ASCI)及其誘發的繼發性脊髓損傷(SSCI)是導致機體功能喪失的主要原因，而近年的研究發現，自由基及其介導的脂質過氧化反應，在急性脊髓損傷后的SSCI的病理過程中起著重要的作用[1-4]。我們前期實驗證實,髓復康(SFK)可以促進ASCI恒河猴感覺運動功能的恢復、在相當的程度上縮小脊髓損傷灶的面積。本實驗是在前期研究的基礎上觀察SFK對ASCI后，恒河猴血液中自由基水平的調節作用，探索該藥的作用機制。

1 材料和方法

1.1 藥物與試劑 髓復康(SFK)由生黃芪、川芎、赤芍、紅花、葛根和三七等8味中藥組成，水煎，生藥濃度為2.5 g/mL。

1.2 模型制備與分組 成年雄性恒河猴14只(購自軍事醫學科學院，合格證號:0019631)，6 500～7 500 g,其中10只在無菌手術下造成脊髓T12左側半橫斷損傷模型[5],隨機分為髓復康組和模型組各5只，其余4只為正常對照組。

1.3 喂藥方法 術后髓復康組灌喂髓復康水煎液，1次/d，共30 d，每次生藥劑量為8.55 g/kg。第1次喂藥在麻醉清醒后4 h以內，其余兩組恒河猴按髓復康組方式灌喂等量的生理鹽水。

1.4 取材 動物麻醉后打開胸腔，從左心室抽取血液2 mL，迅速注入抗凝管內(按1∶10用3.8%枸櫞酸抗凝)，輕輕搖勻，1 mL用于測SOD，另1 mL用于測MDA。

1.5 測定方法 分別采用黃嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸(TBA)化學發光法測定SOD活性和MDA濃度(試劑盒購自南京建成生物制劑公司)。操作步驟均按試劑盒說明進行。

2 結果

血液中SOD活性和MDA含量平均值，見表1。

表1 血液中SOD活性和MDA含量平均值比較

3 討論

機體內存在著自由基和抗自由基兩個體系。在生理狀態下，通過酶系統和非酶系統可產生一些氧自由基，可由內源性抗氧化系統如超氧化物歧化酶(SOD)等有效清除，保持動態平衡，因而不表現出毒性作用。這對于維持機體各種細胞和亞細胞結構的穩態十分重要。而脊髓損傷所誘發的缺血、缺氧及缺血后再灌注等病理過程中，會導致脊髓損傷區內產生大量氧自由基[6]，過剩的自由基不僅可以直接造成脊髓組織的繼發性損傷，而且在啟動、激活和加劇其它繼發性損傷機制方面，也具有促進作用。脊髓損傷后自由基反應被公認為是引起脊髓組織繼發性損傷的主要因素之一[7-8]。

MDA為過氧化脂質的代謝產物，而SOD為自由基清除劑，它們的含量均可反映體內自由基的變化情況[9-10]。從本實驗觀察到，術后30 d，模型組恒河猴血液中丙二醛(MDA)的含量仍然很高，而抗氧化劑SOD活性明顯下降，表明自由基長時間參與了脊髓損傷后繼發性損害的病理過程。用藥后，SOD明顯升高，MOD含量明顯下降，這一結果提示，SFK在SCI后有抗自由基損害的作用，同時能夠提高機體抗氧化的能力。這可能是由于SFK含有多種益氣活血作用的藥物，通過開放微循環管道和加速微循環血流等環節，把脊髓損傷灶內過剩的自由基運走，改善了脊髓損傷區的供血和供氧，改善了微循環，減少了產生自由基的惡性刺激；同時由于其活血作用，加快了微循環血流速度，從而促進了自由基的排泄，降低了血液自由基的含量；并且SFK益氣活血作用能夠增加內源性自由基清除系統的活性。

本實驗結果提示，髓復康可能通過對自由基的調節作用，從一定程度上遏制了脊髓繼發性損傷的發展，而發揮脊髓保護作用，為損傷神經的修復和再生提供有利的微環境。

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