豬傳染性胸膜肺炎疫苗的研究與應用

楊旭夫，朱必鳳，彭凌

（韶關學院，廣東韶關 512005）

一、病原學概述

豬傳染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放線桿菌感染引起的豬的一種呼吸道傳染病，又稱豬副溶血嗜血桿菌病和豬胸膜肺炎嗜血桿菌病。本病以急性的出血性滲出性肺炎、胸膜炎和慢性的纖維素性壞死性胸膜肺炎為病理特征。1957年Pattison等首次報道本病，隨后Mattchews和Pattison于1961年，Olander于1963年相繼報道本病。最初將其病原菌命名為副溶血嗜血桿菌，后又將從豬體分離的副溶血嗜血桿菌更名為胸膜肺炎嗜血桿菌。1983年Phol等應用DNA雜交技術，發現胸膜肺炎嗜血桿菌和1987年由瑞士學者Bertsschinger等從壞死性胸膜肺炎患豬分離的似溶血巴氏桿菌均與李氏放線桿菌關系密切，因此建議更名為胸膜肺炎放線桿菌，也就是現在使用的這個名稱。該種下設兩個生物型，生物Ⅰ型和生物Ⅱ型。生物Ⅰ型即依賴生長因子（NAD或Ⅴ因子）菌株（原來的胸膜肺炎嗜血桿菌），生物Ⅱ型即不依賴生長因子菌株。曾經有學者建議將兩個生物型整合在一起，目前共分為15個血清型。

研究發現，各個國家或地區存在與流行的胸膜肺炎放線桿菌血清型不完全相同，各血清型菌株間免疫交叉保護性不強或無，因此調查本國或本地區存在的胸膜肺炎放線桿菌血清型對于免疫防制非常重要。較早前的調查我們國家存在多血清型感染，但以7型為主，4型次之，還分離到3、5和8型菌株。血清學檢查還發現9、10和11型抗體。

二、危害

豬傳染性胸膜肺炎是一種世界性疾病，廣泛存在于全世界所有養豬國家。也是國內近二十年來比較多發、死亡率較高的呼吸道傳染病，已經引起了養豬業的高度重視。其主要危害是，能引起急性感染豬大批死亡，慢性感染幸存豬在肺臟和胸膜產生不可逆的纖維素性壞死性胸膜肺炎病變，導致心與肺粘連及肺與胸壁粘連，嚴重影響豬的生長發育。一旦飼養條件及氣候發生突變，極易使慢性感染豬急性發作而死亡。豬只的爭斗也可使慢性帶病變感染豬突發呼吸困難，造成急死。慢性病例往往多激發A型多殺性巴氏桿菌感染。據統計，豬肺部的胸膜肺炎病變面積每增加1%，其90 kg上市期便延長1.2 d，多消耗飼料2.45 kg。因此說，傳染性胸膜肺炎所造成的經濟損失，除了引起感染豬的急性死亡，還有飼養費用的增加。本文作者曾對國內豬呼吸道病進行流行病學調查，某大型養豬場由于豬傳染性胸膜肺炎年死亡豬數達萬余頭，年用于添加飼料中的預防藥物費用達200萬元以上。在國內被調查豬場，剖檢病死育肥豬傳染性胸膜肺炎病變發生率在70.8%～100%，有42.58%激發A型多殺巴氏桿菌感染。

三、藥物防治

由于胸膜肺炎放線桿菌各地分離菌株對抗菌素的敏感性差異較大，同一地區不同時間分離菌株對抗菌素敏感性也不一致，長期用藥物預防很容易產生耐藥性。藥物治療，傳染性胸膜肺炎患豬出現臨床癥狀往往在胸腔已經形成不可逆的病變，特別是纖維素性粘連和肺臟壞死病變，藥物治療不會使已經產生的病變消失，因此對出現臨床癥狀豬進行個體治療是沒有意義的。早期治療，有一定的效果，但是治療時機不好把握。只能是發現病例后，同群豬用敏感的抗菌素進行預防性用藥，來減少臨床發病。最有效的辦法是進行免疫預防。

四、免疫預防及疫苗研究

從目前的免疫研究結果看，免疫預防所使用的疫苗一定要有血清型的針對性，因此調查當地流行菌株的血清型對于研制有效的滅活疫苗非常重要。現在所使用最多的疫苗仍然是全菌體細胞滅活疫苗，存在的問題是，滅活疫苗雖然能夠抵御同型菌株的攻擊，但胸膜肺炎相關的肺臟病變發生率仍然很高，致使屠宰豬的肺臟廢棄率居高不下。

傳染性胸膜肺炎滅活疫苗對異型菌株攻擊或感染保護率不高或者無良好交叉保護作用，研制具有血清型菌株之間交叉保護作用強的免疫防制劑，是近些年來豬傳染性胸膜肺炎預防研究的熱點。已經實驗證實，采用ApxⅡ操縱子特異性點突變的胸膜肺炎放線桿菌菌株作為活疫苗，具有一定的交叉保護作用。用無莢膜的變異菌株做活疫苗免疫證明，1型和5型菌株間有交叉保護作用。德國學者于2006年報道，用刪除產生尿素酶ureC基因和毒素ApxⅡA基因的胸膜肺炎血清2型菌株，作為活疫苗免疫接種實驗豬能夠保護同血清型菌株攻擊。2008年報道，在此基礎上又將有關厭氧呼吸3個酶的編碼基因和一個鐵吸收的基因刪除，使之成為缺失6個基因的活菌疫苗株，采用氣溶膠免疫可對同型和異型菌株攻擊均產生有效保護。英國皇家學院號稱已經研究成功了豬傳染性胸膜肺炎活疫苗，生產容易，價格低廉，高效可使免疫接種豬終身得到免疫保護，完全可以抵御各種血清型感染。英國皇家學院正在尋求合作開發伙伴，但是關于對此產品的應用評價未見詳細報道。

關于亞單位疫苗的研究，據報道用含滅活ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ毒素和一種外膜蛋白亞單位疫苗免疫實驗，結果實驗組與對照組在日增重和相關病變發生率上無明顯區別。而這種亞單位疫苗與全菌體滅活疫苗對比試驗，亞單位苗達到100%保護，全菌體滅活疫苗保護率為71.4%；剖檢肺臟病變率分別為6.3%和17.8%。

近年來，隨著分子生物學技術的發展，已經對革蘭氏陰性菌進行噬菌體裂解基因E和葡萄球菌核酸酶基因SN重組質粒轉化，實現了遺傳學滅活，將細菌體內容物通過形成的微孔道溢出，保留了細菌體的完整性，使細菌體表面結構不發生任何改變，即所謂的“細菌幽靈（bacterial ghost）”。用這樣的“細菌幽靈”作為免疫制劑，有許多諸如安全、有效、穩定、易于保存、不需要免疫佐劑和引起良好的黏膜免疫等優點。國外有學者已經將胸膜肺炎放線桿菌血清9型菌株制備成細菌幽靈疫苗，取得了良好的免疫保護作用。

雖然在豬傳染性胸膜肺炎免疫制劑上研究頗多，具有交叉保護作用的疫苗尚在研究階段，在市面上使用的大都是滅活疫苗，僅在疫苗菌株血清型上有些差異。在我國，中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所科研人員，在國內率先分離鑒定了胸膜肺炎放線桿菌，根據流行病學調查結果，以當時最為多發的血清7型為研究對象，研制成功了滅活疫苗。該苗免疫保護率達到96%以上，抗病變保護率達87.5%，于2000年通過國家農業部組織的科技成果鑒定。現在我國存在使用的商品化豬傳染性胸膜肺炎疫苗仍然是滅活疫苗，只不過是變成了雙價苗和三價苗而已。

五、科學使用疫苗

在使用疫苗免疫前，有條件的養豬單位應對本場進行流行病學調查，了解存在的胸膜肺炎放線桿菌的血清型，如果清凈群要了解本地區豬傳染性胸膜肺炎的疫情及存在的血清型，選用血清型針對性強的疫苗，特別是滅活疫苗一定要有血清型針對性。其次是根據本場豬傳染性胸膜肺炎的發病特點，進行免疫程序制定。如果新發病豬群，往往發病日齡提前，最好采用被主動結合免疫。如果是多次發病或常發豬群，往往發病日齡偏后，可根據母源抗體的測定情況，確定免疫接種時間。根據筆者以前的實驗，油佐劑滅活疫苗免疫可不用考慮母源抗體的干擾問題，在常發豬群，仍然可以進行被主動結合免疫程序。再次，注意疫苗的保質期、疫苗的保藏與運輸，嚴格按照生產廠家的要求去做。

總之，豬傳染性胸膜肺炎的免疫問題在世界范圍內仍然沒有徹底解決，由于種豬的交流，有傳入新血清型的可能，做好引種檢疫是必要的。還要密切注意病原菌血清型的變化，進行定期監測，適時研制血清型針對性強的疫苗。同時也期待著免疫保護率高的，特別是抗病變保護率高能引起血清型間交叉保護的新型疫苗面世。提醒養豬單位，在疫苗免疫預防的同時，切記搞好環境衛生，切斷疾病傳播途徑。一方面可以盡快控制豬傳染性胸膜肺炎的疫情，一方面還能避免豬傳染性胸膜肺炎與其它呼吸道病混合感染造成的較大經濟損失。

（略）