新型聚合物單分散溫敏色譜固定相的制備及其在生物大分子分離中的應用
2010-04-12 00:00:00歐陽康龍孫彥璞龔波林
分析化學 2010年6期
摘 要以2.5 μm的單分散聚苯乙烯為種子，乙二醇二甲基丙烯酸酯 (EDMA)為交聯劑，甲苯和環己醇為致孔劑，采用“一步種子溶脹聚合法”制備了單分散微球； 再以過硫酸鉀為引發劑將水溶性溫敏單體N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)分子引發聚合到微球表面，制備了粒徑為7.0 μm、分散系數為0.02的單分散交聯溫敏色譜填料，溫敏單體NIPAM的接枝率為5.2%。考察了該填料對標準蛋白質的分離性能、溫敏性能、穩定性和重現性以及動態吸附容量對蛋白保留的影響。實驗結果表明，該色譜填料對蛋白的分離性能、溫敏性能、穩定性及重現性良好，且對溶菌酶的動態吸附容量為32.3 mg/g。在疏水模式下，該填料不但可以同時基線分離5種標準蛋白，而且通過改變溫度可以有效地將3種在低溫下保留時間重疊的蛋白（細胞色素-C、β-乳球蛋白和核糖核酸酶）完全分離。
關鍵詞N-異丙基丙烯酰胺； 單分散溫敏色譜固定相； 蛋白質分離
