紫槐燒傷乳膏劑的制備及質量控制

熊維政，李 磊，石 磊，姜家書，左 杰

（河南羚銳制藥股份有限公司，河南 新縣 465550）

紫槐燒傷乳膏劑由紫草、虎杖、槐枝等組方，系民間老中醫驗方，具有清熱涼血、收斂生肌、止痛功效，多年臨床使用證明其對Ⅰ度和Ⅱ度燒燙傷具有良好效果。原處方以豚脂榨取藥材、提取有效成分后制成油膏使用，制劑水平較低且使用不方便，制劑的質量控制比較困難。為更好地滿足臨床需要，筆者研制了紫槐燒傷乳膏劑，現將其制備工藝與質量控制方法報道如下。

1 儀器與試藥

島津LC－2010AHT高效液相色譜（HPLC）儀，SPD－20A紫外檢測器（日本島津公司）；79－1型磁力加熱攪拌器（金壇市醫療儀器廠）。紫草對照藥材（批號為200802）、左旋紫草素對照品（批號為110769－200405）、冰片對照品（批號為110743－200504）、大黃素對照品（批號為110756－200110）均由中國藥品生物制品檢定所提供；紫槐燒傷乳膏劑（河南羚銳制藥股份有限公司，批號為090913）；紫草、虎杖、（張仲景大藥房）；冰片（云南省思茅市林緣香料有限公司）；槐枝采自新縣；自制純化水；所用試劑均為分析純；輔料均符合藥用標準。

2 方法與結果

2.1 處方與制備

處方：紫草，虎杖，槐枝，冰片，硬脂酸，單硬脂酸甘油酯，液體石蠟，甘油，三乙醇胺，平平加O、羥苯乙酯，純化水。

制備[1]：取虎杖、黃柏，粉碎成細粉，混勻，照2005年版《中國藥典（一部）》附錄ⅠO（流浸膏劑與浸膏劑）項下方法，以90％乙醇為溶劑，浸漬36h后緩緩滲漉，收集滲漉液600mL，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.00的清膏，備用；取硬脂酸、單硬脂酸甘油醋、液狀石蠟加熱至80℃，溶解，攪勻，待溫度降至50℃左右時加入上述醇提浸膏，攪拌均勻，作為油相，備用；另取甘油、三乙醇胺、平平加O、羥苯乙酯加熱至80℃，充分熔化，攪勻后緩緩加入油相，沿一個方向攪勻（約100 r/min），待冷至40℃，加入冰片（乙醇適量溶解），用水調節至1 000 g，攪勻，分裝即得。規格為每支15 g。

2.2 一般質量控制

性狀：本品為均勻細膩的紫紅色乳膏。

pH：取本品10 g，80℃加熱熔化，加純化水50mL稀釋，溶液pH應為6.0～7.0。

其他：應符合2005年版《中國藥典（一部）》軟膏劑[1]項下有關規定。

2.3 鑒別

紫草[2]：稱取供試品3.0 g、紫草對照藥材粉末2.0 g、不含紫草的陰性對照品3.0 g，分別加氯仿30 mL，超聲處理30 min后置分液漏斗中，將分液漏斗在10℃以下靜置2h，分取氯仿液，作為供試品溶液、紫草對照藥材溶液及陰性對照品溶液。取左旋紫草素對照品，加乙醇制成每1mL含1.0mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗，吸取上述4種溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，先以飽和15min的二氯甲烷－甲苯（5∶11）為展開劑上行展開，展距約為8.5 cm，取出，晾干，然后再以飽和15min的甲苯－乙酸乙酯－甲酸（5∶1∶0.1）為展開劑上行展開，展距約為3.5 cm，取出，晾干。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液和對照品溶液色譜相應位置上顯相同的紅褐色斑點，再噴以10％氫氧化鉀甲醇溶液，斑點顏色變為藍色，陰性對照品溶液色譜中則無此斑點（圖1 A）。

虎杖[3]：在2.4含量測定項高效液相下色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。

槐枝[4]：取供試品5.0 g、不含槐枝的陰性對照品5.0 g，分別加甲醇20mL，超聲處理10min，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液、陰性對照品溶液。取蘆丁對照品用甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗，吸取上述3種溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以飽和15min乙酸乙酯－甲酸－水（8∶1∶1）為展開劑上行展開，展距約為10 cm，取出，晾干，噴以三氯化鋁乙醇溶液，于105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同的淺綠色斑點，陰性對照品溶液色譜中則無此斑點（圖1 B）。

圖1 薄層色譜圖

冰片[3，5]：取本品2 g，加乙醇5mL攪拌溶解，加1％香草醛硫酸液2滴，即顯紫色。

2.4 含量測定（虎杖）[3，6－7]

2.4.1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：Agilent－C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：甲醇－0.1％磷酸溶液（80∶20）；檢測波長：254 nm；柱溫：40℃；流速：1mL/min；進樣量10μL。在該色譜條件下，對照品溶液及供試品溶液色譜峰分離良好，出峰時間合適（7.5min），陰性對照品溶液對測定無干擾（圖2）。

圖2 高效液相色譜圖

2.4.2 溶液制備

稱取供試品約3.0 g，精密稱定，加入甲醇30mL及2.5mol/L硫酸溶液20 mL，加熱回流60 min，用氯仿提取3次，每次10 mL，收集氯仿液，蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉移至25mL量瓶中，甲醇定容至刻度，即得供試品溶液。另按處方制備不含虎杖的乳膏劑對照品，同法制備陰性對照品溶液。精密稱取大黃素對照品6.4mg，置50 mL量瓶中，用甲醇充分溶解，定容至刻度，得貯備液備用，然后精密吸取貯備液1mL，置10mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，得每1mL含大黃素12.8μg的溶液，作為對照品溶液。

2.4.3 方法學考察

線性關系考察：精密吸取對照品溶液2，4，6，8，10，12μL，注入色譜儀，以峰面積（A）對溶液質量濃度（C）進行線性回歸，得回歸方程 A=13 175X+129 604，R2=0.999 9（n=6）。結果表明，大黃素進樣量在0.025 6～0.153 6μg范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗：精密吸取質量濃度為12.8μg/mL的大黃素對照品溶液10μL，注入液相色譜儀，重復進樣5次。結果大黃素峰面積的 RSD為0.65％（n=5）。

穩定性試驗：精密吸取供試品溶液10μL，分別于0，2，4，6，8，12，24h時進樣測定。結果大黃素含量的 RSD為0.22％（n=7），表明供試品溶液在24h內穩定。

表1 大黃素加樣回收試驗結果（n=6）

加樣回收試驗：精密量取已知大黃素含量的樣品6份（0.203 1 mg/g），加入一定量的大黃素對照品（按80％，100％，120％加入對照品，各加平行兩份），按樣品含量測定方法測定。結果見表1。

2.4.4 樣品含量測定

取不同批號的樣品3批，按供試品溶液制備方法制備溶液。分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μL，按上述色譜條件平行測定5次，按外標法以峰面積計算供試品中大黃素含量。結果批號為090913，090917，090919的樣品中大黃素含量分別為0.201 2，0.211 7，0.193 4mg/g。因此，暫訂每1 g本品含虎杖以大黃素計不得少于0.19mg/g。

2.5 穩定性考察

留樣觀察法：取本品3批，裝入鋁箔管內，密閉、避光、在恒溫[（25±2）℃]、相對濕度（60±10）％的條件下儲存6個月。結果樣品外觀、均勻度、稠度均無明顯變化；每月測定的大黃素含量均符合規定，說明6個月內含量穩定。

離心法：取樣品3批，各10 g，分別置離心管中，以3 000 r/min的轉速離心處理。結果樣品無分層現象。

3 討論

本乳膏劑是在原油膏劑的基礎上，通過科學的實驗設計，采用乙醇滲漉法提得藥物浸膏后，選擇適宜的賦形劑制成的乳膏劑，與原來的油膏劑相比，藥物有效成分的提取更完全，充分保證了臨床療效，制劑的外觀性狀也得到了改善，且使用方便，易于清洗，滿足了臨床患者的需要。

該制劑制備工藝簡單，含量測定準確，制劑質量穩定，使用安全、方便，較油膏劑具有明顯的優勢。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：化學工業出版社，2005：附錄IO，附錄IR，附錄VIB，附錄VID.

[2]張增巧，于 霖，吳延暉，等.復方紫歸軟膏的制備及質量控制[J].中國醫院藥學雜志，2000，20（1）：47.

[3]洪求兵，梁曉霞，張孟佑，等.復方虎杖凝膠劑的制備及質量控制[J].中國藥業，2008，17（15）：54－55.

[4]王春桃，唐于平，周 玲.槐枝皮中黃酮類成分的研究[J].江蘇中醫藥，2008，40（7）：65－66.

[5]鐘春元，黃英柱，方奕曦.復方大黃燒傷藥膜的制備與應用[J].醫藥導報，2002，21（4）：241.

[6]付艷敏，李伯軍，白 巖.等.HPLC法測定肺結核丸中大黃素的含量[J].中國藥師，2006，9（1）：20－21.

[7]陳世虎，陳瑞龍，呼延玲.HPLC測定皮膚病血毒丸中大黃素與大黃酚含量[J].中國藥師，2006，9（1）：47－48.