從一患者痰標(biāo)本中同時(shí)檢出2株銅綠假單胞菌

李杰芬

1 病歷摘要

患者，女，47歲，于2008年4月8日在外院行“胸腺瘤”手術(shù)治療，術(shù)后有創(chuàng)呼吸機(jī)通氣，曾使用多種抗生素及抗真菌藥物治療(具體治療與用量不詳)。至2008年6月18日入住我院前一直有咳痰，呈黃色粘稠狀，約20～160ml/日，無(wú)胸悶、胸痛。查體:T36.8℃，P96次/分，BP156/96mmHg，體型肥胖，雙肺扣清音，右下肺少許及左中下肺濕音，心界不大，HR96次/分，律齊，各瓣膜聽(tīng)診區(qū)未聞及病理性雜音，腹平軟，肝脾未及，雙下肢無(wú)浮腫，神智清楚。既往史:1年前診斷為重癥肌無(wú)力，行“膽囊結(jié)石”術(shù)。入院診斷:(1)雙肺肺炎；(2)Ⅰ型呼吸衰竭；(3)胸腺瘤切除術(shù)后；(4)重癥肌無(wú)力。入院后給抗感染、營(yíng)養(yǎng)支持、化痰及重癥肌無(wú)力的治療后癥狀輕微改善，于6月25日做痰細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果同時(shí)檢出兩株銅綠假單胞菌，根據(jù)藥敏結(jié)果，給予頭孢哌酮/舒巴坦，治療近3周，病人痰量減少，于8月8日病情明顯好轉(zhuǎn)出院。

2 細(xì)菌培養(yǎng)和鑒定

經(jīng)氣管導(dǎo)管吸痰，接種于血瓊脂平皿，35℃培養(yǎng)24h，觀察發(fā)現(xiàn)有兩種菌落:①灰綠色(24h)、表面粗糙、邊緣不整齊、濕潤(rùn)大菌落，約占60%，染色為革蘭陰性桿菌；②灰白色(48h呈綠色)、光滑、邊緣整齊、濕潤(rùn)中等大小菌落，約占40%，染色為革蘭陰性桿菌。

用VITEK32全自動(dòng)微生物分析儀及GNI+鑒定卡鑒定，兩株菌均為銅綠假單胞菌，鑒定編碼:①71606000440和②71406000440。生化反應(yīng):三氯新、葡萄糖氧化、陽(yáng)性控制、乙酰胺、甘露醇、木糖、丙二酸鹽、精氨酸、氧化酶均為陽(yáng)性；苯丙氨酸、七葉苷、植物尿蘭母、脲酶、多粘菌素B、乳糖、麥芽糖、棉子糖、山梨醇、蔗糖、肌醇、側(cè)金盞花醇、香豆酸、硫化氫、β-半乳糖苷酶、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖發(fā)酵、賴氨酸、鳥(niǎo)氨酸、10%乳糖均為陰性，兩株菌僅枸櫞酸鹽結(jié)果相異①陽(yáng)性和②陰性。

藥敏試驗(yàn)(GNS-506卡):兩株菌氨芐西林、阿莫西林/棒酸、替卡西林、頭孢噻吩、頭孢西叮、頭孢噻肟、奈啶酸、培氟沙星、復(fù)方新諾明、呋喃妥因均為耐藥，頭孢他啶、慶大霉素、妥布霉素、奈替米星均敏感；亞胺培南出現(xiàn)耐藥①和敏感②差異，替卡西林(①M(fèi)IC=128、R，②MIC≥256、R)和慶大霉素(①M(fèi)IC≤0.5、S，②MIC=2、S)的MIC值也出現(xiàn)差異。兩株菌對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦均為敏感(瓊紙擴(kuò)散法，紙片有輝瑞制藥提供)。

3 討論

銅綠假單胞菌在臨床標(biāo)本培養(yǎng)中，常出現(xiàn)多種菌落形態(tài)[1]，即光滑形、大腸桿菌形、膠黏形、粗糙形、侏儒形、黏液形；文獻(xiàn)[2]也描述了其在麥康凱上的5種菌落形態(tài):(1)典型菌落:菌落呈灰綠色，大小不一扁平濕潤(rùn)，邊緣不規(guī)則，呈傘狀伸展，表面常可見(jiàn)金屬光澤；(2)大腸菌樣型菌落:菌落圓形凸起，灰白色半透明，似大腸埃希樣菌落；(3)黏液型菌落:菌落光滑凸起，呈粘液樣嵌入培養(yǎng)基中，不易挑起，似肺炎克雷伯菌落，但無(wú)色；(4)侏儒型菌落:細(xì)小無(wú)光澤半透明的菌落，生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)18小時(shí)尚不見(jiàn)菌落，24小時(shí)后才有細(xì)小菌落；(5)粗造型菌落:菌落呈紐扣狀，表面粗糙，或菌落中央隆起邊緣扁平。本病例中檢出的兩株銅綠假單胞菌，根據(jù)其菌落形態(tài)特征可初步判斷為粗糙型菌落和光滑型菌落，兩株菌不但菌落形態(tài)不同，而且耐藥表型和生化反應(yīng)類型也有差異。相關(guān)文獻(xiàn)[3]報(bào)導(dǎo)同一標(biāo)本中兩種銅綠假單胞菌粗糙型菌落比光滑型菌落的耐藥率高，本病例第①株菌(粗糙型菌落菌)比第②株菌(光滑型菌落)的耐藥率要高，也證實(shí)了這一點(diǎn)。另外，本病例中兩株菌對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦均為敏感，給用該藥物治療后，病人病情明顯好轉(zhuǎn)出院，因此建議臨床治療時(shí)應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果選用適宜的藥物，使臨床用藥個(gè)體化，減少耐藥菌株的產(chǎn)生。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室人員來(lái)說(shuō)，在觀察菌落形態(tài)時(shí)要認(rèn)真仔細(xì)，以免遺漏某些重要菌種，從而導(dǎo)致某些重要藥敏信息的丟失，誤導(dǎo)臨床用藥，增加病人負(fù)擔(dān)。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜,等.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:831-833.

[2]周庭銀.臨床微生物學(xué)診斷與圖解[M].第2版.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,2007:195-225.

[3]黃露萍,向萬(wàn)忠.同一標(biāo)本中兩種銅綠假單胞菌藥敏試驗(yàn)分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(1):37-38.