中藥誘導腫瘤細胞自噬的研究

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(1.長春中醫藥大學 基礎醫學院，吉林 長春 130117；2.吉林省中醫藥科學院 婦科，吉林 長春 130021)

自噬是真核細胞利用溶酶體降解長壽命蛋白質或細胞器的一種方式。其降解過程主要表現為細胞漿中形成包裹著長壽命蛋白質或細胞器的空泡結構，這些空泡與溶酶體結合并對空泡內成分降解。研究表明，許多中藥能夠誘導腫瘤細胞發生自噬，闡述如下。

1 中藥研究

崔僑等[1]采用單丹磺酰尸胺(MDC)染色法觀察了冬凌草甲素對HeLa細胞的影響。結果發現64 μmol/L冬凌草甲素作用24 h后，HeLa細胞的自噬比率顯著提高。當使用自噬特異性抑制劑3-MA預處理后，自噬水平下降至接近正常水平。 朱傳升等[2]使用熒光顯微鏡和流式細胞儀檢測了三氧化二砷(As2O3)對肝癌細胞系HepG-2的影響。結果發現1.0，2.0，4.0，8.0 μmol/LAs2O3作用24 h后，HepG-2細胞均出現自噬，自噬百分率隨As2O3濃度增加而遞增。 占貞貞等[3]使用熒光顯微鏡和流式細胞儀檢測了紫杉醇誘導胃癌SGC-7901及BGC-2823細胞的自噬情況。結果0.1 μmol/L紫杉醇作用3,12，24 h后的SGC-7901/BGC-823細胞均發生自噬。自噬高峰期為紫杉醇作用3～6 h,且BGC-823細胞對紫杉醇誘導的自噬較為敏感。 付校等[4]應用激光共聚焦顯微鏡和流式細胞儀檢測了長春瑞濱處理肺腺癌A549細胞后自噬特異性蛋白LC3的表達情況。結果5.5 μmol/L長春瑞濱在24 h內能夠誘導肺腺癌A549細胞出現明顯的自噬性變化,自噬高峰期出現在長春瑞濱作用6～12 h。 勞鳳學等[5]應用電鏡和MDC染色熒光顯微鏡觀察了白藜蘆醇對BurkittB淋巴瘤Raji細胞的影響。結果0.23 mmol/L的白藜蘆醇處理Raji細胞48 h后，電鏡觀察到BurkittB淋巴瘤Raji細胞內出現了大量的自噬小泡;熒光顯微鏡下可見MDC標記的陽性細胞數量明顯增加，比率為38.6%；而未處理的Raji細胞只有很少部分呈MDC陽性，比率為4.2%。 張萍等[6]應用吖啶橙染色和Western印跡法觀察了環孢素A(CsA)聯合三氧化二砷對腦膠質瘤細胞U87-MG自噬性死亡的影響。結果2 μmol/LCsA+2 μmol/L ATO聯合作用72 h組與CsA、ATO單獨作用組相比，細胞內酸性自噬泡明顯增加。Western印跡法檢測結果顯示Beclin-1、LC3-Ⅱ的表達明顯上調。 高薇等[7]應用MDC熒光染色法等觀察了槲皮素(Que)對人乳腺癌MCF-7細胞的影響。結果200 μmol/LQue作用1.5 h后MCF-7細胞漿內散布少許點狀熒光顆粒,3 h后點狀熒光顆粒稍增多，24 h處理組點狀熒光顆粒減少。

2 結語

研究表明，自噬功能異常在腫瘤發生、發展中均扮演著重要角色。因此深入研究中藥誘導腫瘤細胞發生自噬將為惡性腫瘤的治療提供新的途徑。

[1]崔僑,田代真一,小野寺敏,等.冬凌草甲素通過誘導人宮頸癌HeLa細胞自噬下調凋亡的機制[J].藥學學報,2007,42(1):35-39.

[2]朱傳升,侯明,王金慎,等.三氧化二砷誘導肝癌細胞系HepG-2自噬及其機制研究[J].中國現代普通外科進展,2007,10(4):302-305.

[3]占貞貞,陳思,葉艷,等.自噬及自噬性細胞死亡抑制紫杉醇誘導的胃癌細胞凋亡[J].安徽醫科大學學報,2007,42(2):123-127.

[4]付校,潘永成,王建軍,等.自噬在長春瑞濱誘導的肺癌細胞A549死亡中的作用[J].中國肺癌雜志,2008,11(3):345.

[5]勞鳳學,商迎輝,劉端祺.白藜蘆醇誘導Raji細胞死亡的自噬途徑[J].中國生物制品學雜志,2009,22(7):654-658.

[6]張萍,陳菲,卞維鵬,等.環孢素A增強三氧化二砷誘導的膠質瘤細胞U87-MG自噬性死亡[J].腫瘤,2009,29(8):727-730.

[7]高薇,朱茉莉,李君,等.自噬在槲皮素誘導人乳腺癌MCF-7細胞死亡中的作用[J].蘇州大學學報：醫學版,2009,29(5):878-882.