防治家蠶細菌病藥物的篩選

張安啟 王瑞松 房啟祥 陳春平 何在啟 陳日林 劉發余

（①山東省莒縣畜牧獸醫局 276500 ②山東省莒縣蠶藥廠）

為篩選出防治家蠶細菌病的理想藥物，依據正在使用、相對較新、殺菌廣普、適用于口服、價格相對低廉、與傳統防治藥物有一定的衍生關系等原則，從人用藥和獸用藥品種中定性選擇出了鹽酸環丙沙星、諾氟沙星、紅霉素、氟苯尼考等藥物。在此基礎上，進行了目的藥物的篩選試驗。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 供試蠶種 9202×魯七，青州蠶種場生產。

1.1.2 供試病原 山東農業大學蠶病室繼代培養，主要種類是黑胸敗血菌和靈桿敗血菌。

1.1.3 供試藥物 鹽酸環丙水洗星、諾氟沙星、恩諾沙星、紅霉素均為市售原粉。

1.1.4 培養基成分 牛肉膏3g、蛋白凍10g、NaCI5g、瓊脂15g、定容1L、pH=7.5。

1.2 試驗方法

1.2.1 濃度設置 藥敏試驗藥劑濃度為3%的原液，藥效試驗藥劑濃度均為180mg/L。

1.2.2 試驗設區 每個處理設3個重復，每個重復均為20頭蠶。

1.2.3 體外抑菌試驗方法（1）細菌準備：將培養好的細菌每管倒入20ml無菌水，將菌膜充分刮起后倒入三角瓶中，然后充分攪拌。（2）培養基的準備：將制好的培養基放入沸水中溶化，備用。（3）接種：在無菌條件下，吸取菌液分別放入已消毒的培養皿中，每個培養皿放入2ml菌液，然后將冷卻后的培養基倒入培養皿中，用量以蓋過培養皿底為佳，適當搖勻后，將直徑6mm濾紙片放入已配好的藥液中，濾紙片被藥液浸透后，再放入相應濃度編號的培養皿中間，30℃下培養48h，觀察抑菌圈大小。

1.2.4 藥效試驗方法（1）病菌接種：在無菌條件下用接種環刮取細菌，用昆蟲針蘸取，從節間膜處穿刺，將病原接種于蠶體。（2）藥物添食法：從4齡起蠶開始各處理每天添食1次相應的藥物，到5齡第3天蠶兒接種細菌，后繼續進行藥物添食，直到毒對照蠶兒發病止，調查發病率。（3）發病調查方法：待毒對照蠶兒明顯表現出病癥時，用肉眼觀察法調查各區蠶的發病情況。

2 藥物的初選結果與分析

2.1 體外藥敏試驗（結果見表1）

從表1中可以看出，試驗藥劑對黑胸敗血桿菌，靈桿菌均有抑制作用。在所有的藥劑中氟苯尼考對黑胸桿菌和靈桿敗血菌的抑制作用最好，抑菌圈直徑分別是48.5mm、32.6mm。其抑菌效果明顯好于其它藥物，特別是對靈桿菌效果更明顯。其次是鹽酸環丙沙星，抑菌圈直徑分別是42.7mm、7.6mm。

表1 治療細菌藥物篩選體外藥敏試驗(抑菌圈直徑) (mm)

2.2 不同藥劑藥效對比試驗（結果見表2）

從表2可以看出，3種藥劑對黑胸敗血病治療效果均較好，但氟苯尼考效果最佳，發病率為0。比鹽酸環丙沙星低12%，比氯霉素低9%。3種藥劑對靈桿菌敗血病治療效果差別較大，氟苯尼考效果最佳，發病率為26%，而鹽酸環丙沙星、氯霉素的治療效果均較差、發病率分別為88%和64%，比氟苯尼考分別高62%和38%。

表2 治療細菌病藥物篩選藥效試驗(發病率) (%)

2.3 小結

經體外藥敏試驗和藥效對比試驗，氟苯尼考對黑胸敗血病和靈菌敗血病的治療效果均比鹽酸環丙沙星和氯霉素好，尤其對靈菌敗血病的治療效果最突出。

3 討論

（1）長期以來，家蠶細菌病一直是影響蠶業生產的一重要因素。傳統的做法是通過消毒和使用普通藥物氯霉素。而消毒具有局限性，傳統藥物由于長期使用已產生抗藥性，選擇有效的抗菌藥物已是蠶業生產的重要任務。

（2）最近幾年，人用藥和獸用藥的發展速度很快，從人用藥和獸用藥中選擇有效的抗菌藥物，而且使之與傳統防治藥物有一定的衍生關系，這是治療家蠶細菌性疾病行之有效的辦法。

（3）科學試驗的結果表明，氟苯尼考是治療家蠶黑胸桿菌和靈桿敗血菌病的有效藥物。同時更加經濟、更加安全地使用新的抗菌藥物，也是今后研究的方向。