一例雞新城疫的診斷與防制報告

王 鵬 郝慎文 （山東省萊蕪市畜牧獸醫局 271100）

新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起禽的一種急性高度接觸性傳染病。臨床上該病常呈敗血癥經過，主要特征是呼吸困難、下痢、神經機能紊亂、黏膜和漿膜出血。該病是目前嚴重危害我國養禽業、必須通過疫苗進行防控的重大動物疫病之一。

NDV屬于副粘病毒科(Paramyxo-viridae)副粘病毒亞科(Paramyxovi-rinae)禽腮腺炎病毒(Avulavirus)，為單股負鏈RNA病毒，基因組大小約為15kb，編碼6種主要的結構蛋白，分別是血凝素一神經氨酸酶(HN蛋白)、融合蛋白(F蛋白)、核衣殼蛋白(NP蛋白)、基質蛋白(M蛋白)、磷酸化蛋白(P蛋白)和大蛋白(L蛋白)。雖然近年來已引起專業技術人員和養雞戶的高度重視，并且采取了相應的措施，但由于雞新城疫病毒毒力的增強，尤其因環境污染、消毒不嚴，往往在某些雞群中出現免疫失敗的情況，造成嚴重的經濟損失。

某大型雞場，在2010年3月份分別引進不同品種的商品代雛雞各2000只，雞在7周前均生長良好，成活率達97%。但自第8周左右出現發病情況，呼吸困難，下痢者漸多，飼料消耗量相對降低，產蛋率上升緩慢，最高產蛋率僅60%。經尸體剖檢及實驗室診斷，確診為雞新城疫。

1 流行特點

本病不受季節的影響，一年四季均可發生，但以冬春兩季多發。雞發病急，傳播快，有的突然死亡。各種日齡的雞均有易感性，大多3～5d死亡，發病率與死亡率主要由雞的免疫抵抗力和病毒的毒力決定。在免疫雞群中，可散在發生非典型性新城疫。

2 臨床癥狀

2.1 外觀檢查 先觀察群體病禽的營養狀況；羽毛是否蓬亂、污穢及有無脫毛等現象；皮膚有無瘀血、出血、腫脹、結痂等；再檢查天然孔有無分泌物流出，分泌物的顏色、性狀如何，數量多少等；還要個別檢查可視黏膜的色澤，是否有充血、瘀血、出血、貧血等病變；觀察泄殖腔周圍的羽毛有無糞便污染，糞便顏色、氣味如何；關節、腿、爪(蹼)有無 腫脹、扭曲、粗大、變形或其它異常。

2.2 觀察結果 開始時無明顯的癥狀，突然死亡。隨著病情的發展，病雞出現精神沉郁，羽毛松亂，伏地不動，翅下垂，呆立，嗜睡，食欲不振或拒食，手觸嗉囊空空無物，低頭采食或倒提時從口腔中流出酸臭的液體，排綠色或黃綠色稀便。少數病雞出現勾頭，跛行。病雞張口呼吸發出“咕嚕”聲，常有神經癥狀，表現有甩頭和吞咽動作， 雞冠及肉垂紅或青紫。運動失調轉圈，扭頸，不能站立。大約半天時間即倒地死亡。

3 病理變化

3.1 剖檢方法 將病死禽或處死禽浸于常水或消毒水中使羽毛浸濕，洗去塵垢、污物，先將腹壁和大腿內側的皮膚切開，用力將大腿按下，使髖關節脫臼，將兩大腿向外展開，從而固定尸體。再于胸骨末端后方將皮膚橫切，與兩側大腿的豎切口連接，然后將胸骨末端后方的皮膚拉起，向前用力剝離到頭部，使整個胸腹及頸部的皮下組織和肌肉充分暴露，以便檢查皮下組織和肌肉是否存在病變(如水腫、出血、結節、變性、壞死等)。然后在胸骨后腹部橫切穿透腹壁，從腹壁兩側沿肋骨頭關節處向前方剪斷肋骨和胸肌，然后握住胸骨用力向上向前翻拉，去掉胸骨露出體腔，觀察內部情況(如位置、顏色、腹水性狀、有無腫脹、充 血、出血、壞死等)。剖檢術應由表及里先實質器官，后腔性器官進行檢查。剖檢時，要仔細檢查各組織器官的病變，并逐一做好 記錄，以便歸類分析，做出正確的病理學診斷。

3.2 剖檢變化 全身黏膜和漿膜出血，以呼吸道和消化道最為嚴重；腺胃黏膜水腫，乳頭和乳頭間有出血點；腺胃兩端黏膜出血，潰瘍；盲腸扁桃體腫大、出血、壞死；肌胃角質膜下游條紋狀出血，脾臟腫脹，有嚴重出血；整個腸道發生卡他性炎癥，腸腔內充滿粘液，十二指腸和直腸黏膜出血，部分可見纖維素性壞死病變；十二指腸近末端，回腸起始部局部黏膜腫脹，充血，出血性壞死；腸淋巴濾泡腫脹出血，直腸點狀，條紋狀出血。腦膜充血和出血；鼻道、喉、氣管黏膜充血，增厚，偶有出血，肺可見淤血和水腫，腹腔脂肪廣泛性點狀出血。如圖1、2：

圖1 脾臟腫脹，有大面積出血

圖2 小腸彌漫性出血，淋巴濾泡腫脹出血

3.3 組織學病變 根據上述臨床癥狀、病勢發展速度及病理剖檢變化特點，初步診斷為雞新城疫。后采病料送實驗室診斷，最終確診為新城疫

（1）石蠟切片器材：切片機、切片刀、磨刀具、容蠟及包埋工具。（2）石蠟切片方法。①取材：盡量選用新鮮病料，組織塊大小一般為0.5。②固定：采取的組織塊立即投入10%中性福爾馬林你固定液中，固定24hr即可。③脫水：已固定好的組織塊進行適當修整后經流水沖洗12～24hr。然后用梯度酒精使組織塊充分脫水，脫水用的酒精梯度和所需時間是：70%酒精(過夜)，80酒精(2hr)，95%酒精1(30min)，95%酒精2(30min)，100%酒精1(30min，100%酒精2(30min)。④透明：脫水的組織塊需要用二甲苯透明，將組織塊中的無水酒精置換出來，為浸蠟作準備。透明分2次進行，在二甲苯1中停留10min，二甲苯2中停留10min。⑤浸蠟：將透明好的組織塊浸入熔化的石蠟燒杯內，已熔化好的石蠟分裝在2個蠟杯內，每個蠟杯停留時間約30min。以上步驟均需在石蠟熔化狀態下進行。⑥包埋：將浸好石蠟的組織塊放入盛有熔化石蠟的包埋框里，使組織埋于石蠟中。待蠟塊冷卻后進行適當修整，并將去粘附于臺木上。⑦切片：將制成的組織蠟塊用切片機按需要的厚度切成薄片(一般5～7um，先粗切后細切)。⑧展片和貼片：將切下的切片用毛筆 托起放入展片槽內的水面，讓其自然伸展(水溫要求40～45攝氏度，溫度過低不易伸展，過高則可將切片熔化)。切片展開，取一潔凈載玻片在切片附近垂直插入水中，緩緩上提，切片可自動貼附于載玻片上，然后將其置溫箱中烘干。⑨脫蠟、進水、染色及封藏：將組織切片放入二甲苯中20min，然后無水酒精中停留3min，90%酒精2中3min，80%酒精中3min，70%酒精中3min，蒸餾水中3min，蘇木素染液中5～7min，常水沖洗至不脫色為止，然后再1%的鹽酸酒精中分化(迅速)，自來水藍化(20～30min)，然后在伊紅染液中停留0.5min，在無水酒精1中停留2min，在無水酒精2中停留2min，然后在二甲苯中停留10min，然后取出滴加中性樹膠，蓋上蓋玻片，待干燥鏡檢即可。切片觀察如下：

圖3 十二指腸出血，淋巴濾泡壞死、崩解

圖4 非化膿性腦炎的血管袖套現象

多種臟器的血管充血、出血，消化道黏膜血管充血、出血，喉氣管、支氣管黏膜纖毛脫落，血管充血、出血，有大量淋巴細胞浸潤；中樞神經系統可見非化膿性腦炎，神經元變性，血管周圍有淋巴細胞和膠質細胞浸潤形成的血管套。

多數在腺胃和肌胃交界處的黏膜上有輕微潰瘍，有的只在心臟，腸黏膜等處有少數散在出血點。

4 預防措施

雞新城疫是雞的烈性傳染病，是養雞業最大的危害，無季節、年齡、性別、品種之分，應引起高度重視。有的養殖戶以為定期進行了免疫接種就萬無一失，從而掉以輕心，應該知道，免疫時間、疫苗的優劣及操作等諸多因素都會影響免疫效果甚至引起免疫失敗。為此，要做好新城疫的預防工作。

4.1 一般預防措施（1）杜絕病原侵入雞群控制和消滅新城疫流行，最根本措施是杜絕新城疫病毒侵入易感雞群，這就需要有嚴格的衛生防疫制度，防止帶毒雞(包括鳥類)和污染物品進入雞群，進出雞場的人員和車輛必須經過消毒，飼料來源要安全，嚴禁從疫區引進種蛋和雛雞。新購進的雞需經檢疫，并嚴格隔離飼養2周以上，再經新城疫疫苗免疫接種后，證明健康者，方可與原有雞合群飼養，隨時觀察雞群的健康情況，發現有可疑病雞，立即隔離，并采取緊急措施。為了杜絕傳染源傳入，有條件的雞場盡可能做到自繁自養，種雞場、孵化廳、育雛、育成和生產雞群須分區域飼養，加強種雞群疫病的監測。（2）嚴格執行消毒措施消毒是防止新城疫傳播的一項重要措施，其目的是切斷病原的傳播途徑，特別是大型養雞場，應該有完善的消毒設施，雞場進出口應設消毒池。飼養員和工作人員進入飼養區要經消毒后，更換工作服和鞋靴方可進入，進入場區的車輛和用具也要經消毒，應該形成一個制度，做到臨時性和定期消毒相結合。（3）肉用雞場可以采用全進全出的飼養法，在進雞前對雞舍進行1～2次嚴格消毒，待全群雞出售完畢再進行1～2次雞舍清潔和徹底消毒，這樣可避免雞群疾病的傳播機會，但平時對雞舍周圍環境也應定期進行消毒。

4.2 免疫接種（1）常用的疫苗種類。大致可分為兩類，即弱毒菌和油乳劑滅活苗。I系疫苗用中等毒力的病毒制成，一般用于70日齡以上(體重大于0.75kg)的雞。接種途徑為肌肉注射或飲水。系疫苗的特點為注射后迅速產生免疫力(3～4d)，維持時間長(240～365d)，但不能用于幼齡雛雞。III和IV系苗毒力較弱，常用于雛雞的免疫，可飲水、滴鼻和點眼。用后7d左右產生免疫力，免疫期為1～2個月。此外，Clone-30也是目前常用的弱毒疫苗。油乳劑滅活苗不含活病毒，由于加入了乳劑，注射后可延緩吸收，延長抗原的作用時間，增進效果。油乳劑疫苗的突出特點為可突破母源抗體的干擾，并能產生強而持久的免疫力(用于成年雞免疫期可達1a)，目前已被廣泛用于養雞生產中。（2）常用的免疫程序。①蛋雞：7～10日齡、30日齡用Ⅳ系苗或Clone-30點眼滴鼻；60日齡用I系苗肌肉注射；120日齡用I系苗和新城疫油乳劑滅活苗肌肉注射，半年后再用3倍量Ⅳ系苗或I系苗飲水免疫。②肉仔雞：7～10日齡、30日齡用Ⅳ系苗滴鼻點眼免疫2次，新城疫嚴重污染區20日齡可補防1次，也可7～10日齡一免時同時進行新城疫油乳劑滅活苗注射。合理做好雞群預防接種免疫接種是增強雞群的特異免疫力，使雞群保持堅強的免疫狀態，抵抗新城疫病毒的感染，因此給雞群合理進行疫苗接種，是防制雞新城疫關鍵措施之一。做好免疫接種應根據當地疫病流行情況，雞場衛生防疫制度嚴密與否，飼養類型，雞的種類(肉雞或蛋雞)，雛雞母源抗體效價的高低以及前次免疫的HI抗體情況等，來確定采取疫苗種類、免疫日齡、免疫次數和免疫的方法。近年來我國對新城疫的免疫程序進行大量研究，積累了許多經驗，使新城疫的免疫程序更加科學化和合理化，這對控制和消滅新城疫起著重要作用。（3）建立免疫監測制度。為了保證各次免疫接種獲得良好免疫效果，避免免疫接種工作的盲目性，必須通過免疫監測的方法，檢查免疫雞群中HI抗體效價。根據HI抗體水平確定首免和再次免疫時間，是最科學的方法。免疫監測也是制訂免疫程序的依據。HI抗體測定，會受到許多因素的影響，同一份抗血清在不同實驗室測定其結果不同，為了獲得準確結果，一方面對操作人員進行訓練，另一方面應設立標準抗血清做對照，從而使HI抗體測定標準化。一般在首免后10～14d，抽檢免疫雞HI抗體水平。抽樣比例大雞群按0.2%，500羽雞群按3%～5%。以后每間隔3～4周抽檢1次，使用I系疫苗免疫的雞群，每隔2個月抽檢1次，通過免疫監測手段，可以判定疫苗的免疫效果，當發現HI抗體沒有上升，應及時檢驗疫苗的品質，或檢查是否有其他的疾病影響，并及時采取補救措施，改換疫苗或改變免疫方法以及同時注意其他病免疫接種。免疫監測還能判定該雞場是否受到新城疫強毒的感染。因為各類疫苗免疫雞后，正常情況HI抗體效價保持一定的水平，當發現該雞群HI抗體突然上升很高，比原來的抗體效價增加了3個滴度以上，說明該雞群可能感染了新城疫強毒，那么必須注意其他雞群防疫措施。

加強飼養管理，提高雞群抵杭力。保證飼料配方的合理、飼養密度均勻、通風良好、減少應激等。接種操作技術要規范，使用疫苗質量要保證。做到早發現、早確診、早采取有效措施。