2-甲氧雌二醇對食管癌細胞系的數目、形態、細胞周期以及誘導凋亡方面的作用

2-甲氧雌二醇（2－ME）是體內雌二醇的正常代謝產物之一，大量研究表明2－ME在各種腫瘤和非腫瘤細胞中能夠抑制細胞增殖并誘導凋亡，是一種細胞分裂拮抗劑和微管蛋白毒素。因此，這種內源性的雌二醇代謝物有可能是一種潛在的抗癌藥物。由于2－ME的作用機制是多方面的，并且隨細胞種類的不同而不同，因此本研究的目的是通過檢測2－ME對細胞數目、形態、細胞周期以及凋亡誘導等方面的影響來探討它對食管癌細胞系（WHCO3）的作用機制。

WHCO3 細胞與不同濃度的 2-ME（10-6、10-7、10-8、10-9mol/L）作用72 h后，細胞數目表示為占對照組的百分數。結果為在10-6mol/L時，2-ME使細胞數目顯著降低至對照組的60%，而其他濃度組的細胞數目與對照組比較差異并無統計學意義。

本實驗采用PI和HO染色法來檢測2-ME（10-6mol/L）處理后的凋亡細胞。結果顯示大部分細胞被染成淡藍色，變圓，并且顯示出細胞皺縮發泡以及凋亡小體等特征。HE染色也出現了以上結果。透射電子顯微鏡在亞細胞水平上也出現了染色質皺縮、不規則核膜及線粒體向核方向聚集等現象。為確定經10-6mol/L的2-ME處理24 h后的WHCO3細胞其細胞周期進程的變化情況，實驗采用流動細胞計數法來定量的分析DNA。結果顯示在G2/M相的細胞數目明顯增多，阻止了細胞周期的進程。

由于之前的研究表明2-ME在其他細胞系是通過破壞微管和將細胞周期止于中期而致使細胞死亡的，因此本實驗對微管蛋白進行免疫熒光染色來探討2-ME在WHCO3細胞中對紡錘體形成的影響。結果表明經2-ME處理后的細胞變圓，處于細胞中期細胞累積并且紡錘體的形成被破壞。為了檢驗經2-ME處理后，是否觸發了外源性凋亡通路，本實驗選DR5作為標志物，進行免疫熒光染色檢測后，DR5的表達上調，說明2-ME誘導的凋亡機制的確是通過外源性凋亡通路。

已有的研究表明2-ME在誘導凋亡中起到了非常重要的作用，特別是在一些活躍增殖的癌細胞中。本實驗得出以下結論：2-ME對于WHCO3食管癌細胞系具有抗增殖活性。