鈣調磷酸酶的抑制促進腎小球旁細胞分泌腎素

為檢測鈣/鈣調蛋白依賴的鈣調磷酸酶在腎素釋放上的調節作用，本研究采用全細胞膜片鉗記錄單個培養的腎小球旁細胞腎素的分泌。在單個腎小球旁細胞中，鈣調磷酸酶抑制劑環孢菌素A（CsA）顯著增加了腎小球旁細胞的膜電容，即確定細胞表面區域腎素分泌的檢測方法。這種作用的誘導可以通過細胞內給予鈣調磷酸酶抑制肽，鈣螯合劑乙二醇雙（2－氨基乙基）四乙酸（EGTA）或鈣調蛋白抑制劑W-13。同時給予EGTA和CsA無疊加作用。蛋白激酶A（PKA）阻斷劑RpcAMPs對CsA引起的膜電容增加無影響。細胞內或細胞外給予他克莫司無膜電容的改變。在培養的腎小球旁細胞，卡米達佐（calmidazolium，一種鈣調蛋白拮抗劑）和CsA可以顯著地刺激腎素分泌，但是卡米達佐和他克莫司沒有此作用。腎小球旁細胞表達鈣調磷酸酶同工型A-β和A－γ，但是沒有A－α。血漿腎素濃度在野生型、敲除鈣調磷酸酶A-α或A-β的小鼠中無差異，但是敲除鈣調磷酸酶A-α的小鼠經CsA治療后，血漿腎素濃度增加，而腎素mRNA的表達受到抑制。研究結論是鈣調磷酸酶和鈣/鈣調蛋白不依賴PKA抑制腎小球旁細胞分泌腎素。