內皮素-1與腫瘤壞死因子在分泌性中耳炎中的表達研究

張立杰 彭軍

內皮素-1與腫瘤壞死因子在分泌性中耳炎中的表達研究

張立杰 彭軍

目的 探討內皮素-1(ET-1)、腫瘤壞死因子(TNF-α)在分泌性中耳炎(OME)中的表達及相互關系。方法 檢測63例(76耳)OME患者血漿與中耳積液中ET-1、TNF-α的含量，同時選擇28例健康人血漿作對照。結果 OME患者血漿中ET-1、TNF-α的含量高于對照組(P＜0.05)，黏液性積液組ET-1、TNF-α的含量高于漿液性積液組(P＜0.05)，且 ET-1含量與 TNF-α含量呈正相關(r=0.567，P＜0.05)。結論 ET-1、TNF-α可能參與分泌性中耳炎的致病過程，是OME發(fā)病過程中重要的致炎因子之一，其含量可能預示病變的轉歸。

腫瘤壞死因子-α;內皮素-1;中耳炎，伴滲出液;中耳積液

分泌性中耳炎(otitis media with effusion，OME)是中耳的常見病及多發(fā)病，其發(fā)病機制十分復雜。本研究通過觀察分泌性中耳炎(OME)患者不同病變期中耳積液中內皮素(ET-1)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的變化，來探討致炎因子在OME發(fā)病中的作用，從而為OME的預防和治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本文選擇2006年3月至2007年3月于我院就治的OME患者63例，男36例，女27例;年齡18～55歲，平均年齡41.7歲;單耳50例，雙耳13例。鼓膜穿刺抽出液均＞0.1 ml，黏液性積液29耳22例(黏液組)，漿液性積液47耳4

例(漿液組)。OME患者的診斷均符合:均有聽力下降和耳悶塞感;聽力損失氣骨導差距15～32 dB;中耳分析均呈“B”型鼓室圖，排除研究前2個月使用腎上腺皮質激素、抗組胺及抗生素藥物，不伴變應性鼻炎、支氣管哮喘及嚴重全身疾病。另選擇同期門診體檢健康28例作為對照組，其性別比、年齡與病變組患者有可比性。

1.2 標本收集、制備和檢測方法 清晨抽取3組受檢者空腹肘靜脈血3 ml，置于含肝素抗凝劑的離心管中，搖勻、離心、分離血清，-20℃低溫保存?zhèn)錂z。中耳積液標本在嚴格無菌下鼓膜穿刺抽出積液，均行封口、標記，存放-30℃凍存待測。采用ELISA、法國DIACLONE公司提供的試劑盒檢測血清TNF-α;放射免疫法、福建邁新公司提供的試劑盒檢測ET-1。

1.3統(tǒng)計學分析應用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，組間比較采用方差分析和 q檢驗，相關性檢驗采用Spearman分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 2組血漿ET-1和TNF-α比較 漿液組和黏液組血漿中ET-1、TNF-α含量均高于對照組(P ＜0.05)。見表1。

表1 3組血漿TNF-a和ET-1含量比較±s

表1 3組血漿TNF-a和ET-1含量比較±s

注:與對照組比較，*P＜0.05

組別 ET-1(ng/L) TNF-α(ng/ml)漿液組(n=41) 40±5* 0.55±0.13*粘液組(n=22) 40±7* 0.56±0.20*對照組(n=28) 22±7 0.24±0.11

2.2 2組中耳積液中ET-1和TNF-α比較 黏液組中耳積液ET-1和TNA-α含量高于漿液組(P＜0.01)。見表2。黏液組

ET-1與TNF-α含量呈正相關(r=0.567，P ＜0.05)。

表2 2組中耳積液中ET-1和TNF-α含量比較±s

表2 2組中耳積液中ET-1和TNF-α含量比較±s

注:與漿液組比較，*P＜0.01

組別 耳數(shù) ET-1(ng/L) TNF-α(ng/ml)漿液組(n=41) 47 72±8 0.79±0.13粘液組(n=22) 29 94±11* 1.19±0.20*

3 討論

內皮素是目前已知的最強的縮血管物質之一，包括三種異構肽。其中ET-1由內皮細胞產生，ET-1除表達于非血管細胞外，是惟一存在于血管內皮細胞的內皮素［1］。而引起ET-1分泌的確切機制尚不明確，但缺氧、腫瘤壞死因子(TNF)、白介素-1(IL-1)等［2］因素可促進ET-1的釋放。有報道其與呼吸系統(tǒng)的變態(tài)反應密切相關。其參與OME的作用機制鮮有報道［3］。

Demaria等［4］在對中耳積液的細胞學分析中發(fā)現(xiàn)其內部存在大量的單核巨噬細胞，可能是中耳局部產生TNF-α的細胞學基礎，另一個可能的來源是巨細胞，這種細胞在OME患者的中耳黏膜中數(shù)量增加。研究表明，TNF-α的生物學作用主要通過兩種細胞表面受體介導，即TNFR1及TNFR2，前者起主要作用。TNF的細胞毒性作用可能是通過這兩種受體由多種信號途徑介導的，包括蛋白激酶和磷脂酶A2途徑。通過氧自由基產生引起DNA斷裂，導致靶細胞凋亡［5］。在體內，低水平的TNF-α在組織修復、炎癥應答中起作用，對機體有利;高水平TNF-α的慢性刺激和釋放可引起組織免疫病理及炎性介質的瀑布樣連鎖反應，使血管通透性增加、局部黏膜水腫，從而導致中耳積液形成。而黏液性中耳積液中高濃度的TNF可能是分泌性中耳炎經久不愈的一個因素。本文研究結果與國外文獻報道大致相同［6-8］。

本研究中，分泌性中耳炎患者的血漿中ET-1和TNF-α含量均高于健康人;同時黏液性中耳積液中ET-1和TNF-a均高于漿液性中耳炎，且ET-1與TNF-α呈正相關(r=0.567，P ＜0.05)。由此推測其可能的作用機制為:(1)中耳內存在ET受體，在缺氧狀態(tài)下及腫瘤壞死因子的作用下ET與效應細胞上的ET受體結合，激活磷脂酶A2產生花生四烯酸，刺激內皮細胞前ET-源的mRNA基因表達，促進ET-1的釋放。(2)強烈的縮血管作用又抑制了中耳黏膜對積液的再吸收，從而致分泌物增多。

綜上所述，ET-1及TNF-α作為炎癥介質參與了中耳炎的發(fā)生，并是OME中重要的致炎因子。在分泌性中耳炎發(fā)生時，中耳黏膜在病毒或細菌的作用下，大量的單核巨噬細胞浸潤后釋放TNF-α，致局部黏膜水腫、血管通透性增加，咽鼓管水腫阻塞，中耳積液潴溜;TNF-α及缺氧促進ET-1的釋放，致黏膜內血管收縮，抑制中耳積液的吸收，形成惡性循環(huán)，進一步使黏液分泌增多［9］。因此，ET-1和TNF-α在OME的發(fā)生發(fā)展中具有重要的臨床意義。

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R 764.21

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1002-7386(2010)03-0322-02

063001 河北省唐山市人民醫(yī)院耳鼻喉科

2009-08-09)