膠體金快速檢測陰道毛滴蟲的臨床運用分析

周青云

陰道毛滴蟲感染導致的陰道炎,是婦科常見病、多發病。陰道毛滴蟲主要寄生在女性泌尿生殖道，引起滴蟲性陰道炎和尿道炎，是一種全球分布，以性傳播為主的疾病。目前臨床實驗室檢測主要采用直接濕片高倍鏡法,但由于受溫度、涂片厚薄及檢驗者水平的影響，其陽性診斷率較低(約占50%)[1],易發生漏診和誤診。為快速準確檢測陰道毛滴蟲感染，我們分別用膠體金法和培養方法及濕片直接鏡檢法對陰道分泌物標本進行對比檢測，現介紹如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源 381份陰道分泌物標本來源于2008年4月～2009年3月我院婦科門診患者，均為毛滴蟲感染疑似病例，年齡16～45歲，平均28歲。患者有白帶增多，呈白色泡沫狀，稀薄有臭味，外陰瘙癢與腰痛，部分患者有尿痛、尿急、尿頻等尿路感染癥狀。

1.2 試劑材料 膠體金法試劑為陰道滴蟲(T.V)檢測試劑盒(膠體金法)，濟南杏恩生物科技有限公司提供。培養法所用培養基為大豆蛋白胨液體培養基，嚴格依照配方說明配制[2]。

1.3 膠體金法原理 膠體金法利用雙抗體夾心法檢測標本中是否含有相應的待測抗原。將抗陰道滴蟲的分泌性蛋白純化后包被在膠體金上成為金標抗體，檢測時，當樣品中含有陰道滴蟲的分泌性蛋白時，在檢測區(T區)時，形成金標抗體-抗原-抗體復合物顯示紅色線條，呈陽性反應。培養法是依據陰道毛滴蟲的生物學特性，給以合適的營養條件，利于少量滴蟲大量繁殖提高檢出率。

1.4 測定方法 (1)膠體金法用消毒棉拭子從陰道后穹隆及陰道壁取分泌物，移入含1mL樣品稀釋液小管中，并且旋轉混合約30s～1min，將棉拭子取出丟棄。將試紙條插入小管，在規定時間讀取結果。(2)培養法用消毒棉拭子從陰道后穹隆及陰道壁取分泌物移入液體培養基中，37℃溫箱培養，24～48h后吸取管內沉淀物檢查有無原蟲生長[2]。(3)濕片直接鏡檢法采用奧林巴斯顯微鏡直接鏡檢，嚴格按照檢驗標準操作規程進行。

1.5 統計學處理 采用SPSS13.0統計軟件分析，資料比較應用x2檢驗，P＜0.05為差異有顯著性。

2 結果

見表1。經統計學分析，膠體金法與培養法比較，x2=1.81，P＞0.05，無顯著性差異；濕片直接鏡檢法與培養法比較，x2=4.82，P＜0.05，有顯著性差異。

表1 381份陰道分泌物標本采用三種不同方法檢測的結果比較[例(%)]

3 討論

培養法以其高靈敏和高特異被譽為陰道滴蟲病原學診斷的“金標準”。實驗中經常采用的培養基為液體培養基，有肝-胨-麥芽糖培養基、半胱氨酸-肝-胨-麥芽糖培養基和大豆-肝-胨-麥芽糖培養基等幾種。但操作復雜費時，可用于疑難病例診斷。

陰道毛滴蟲是一種常見的性傳播疾患病原體，可引起女性陰道炎、尿道炎和男性的尿道炎、前列腺炎等病癥。本病的診斷主要依靠實驗室診斷，傳統的濕片法由于其簡便價廉，仍為大多數醫院所采用，但其敏感性低。

熒光定量PCR被認為是檢測陰道毛滴蟲較快速、準確、高效的方法之一。這是一種對陰道毛滴蟲的DNA進行定量測定的方法，敏感性和特異性分別為90.1%和100%[3]。但設備要求條件高、價格昂貴，臨床常規難以應用。

近年來，新型免疫學方法的出現為陰道毛滴蟲病的診斷提供了新的發展途徑。方法類型有酶免疫法(EIA)、直接熒光抗體實驗(DFA)、膠乳凝集試驗(LAT)及斑點金免疫層析試驗即膠體金法(DICA)。膠體金法以其簡便、快速、試劑穩定及較高準確性適合臨床推廣使用。

[1]羅春麗.臨床檢驗基礎[M].第2版.北京:人民衛生出版社,2004:240-241.

[2]仇錦波.寄生蟲學檢驗[M].第2版.北京:人民衛生出版社,2002:101-102,165.

[3]Hardick J,Yang S,Lin S.Use of the Roche LightCycler instrument in a real-time PCR for Trichomonas vaginalis in urine samples from females and males[J].J Clin Microbiol,2003,41(12):5619-5622.