昆明地區(qū)豬戊型肝炎病毒感染的血清學(xué)調(diào)查

嚴(yán)玉霖,高 洪,李文貴,陳 玲,高利波,趙 汝

(云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,云南昆明650201)

戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的急性病毒性肝炎,該病主要經(jīng)糞-口途徑傳播,也有報(bào)道可以通過(guò)口-鼻和血液傳播,有流行和散發(fā)兩種形式,HE的病死率較甲型、乙型、丙型和丁型肝炎高,孕婦的病死率可高達(dá)21%。自1995年印度由于水污染發(fā)生了第一次HE大暴發(fā)流行以來(lái),先后在印度、尼泊爾、蘇丹、吉爾吉斯斯坦等國(guó)有流行。我國(guó)自1980年以來(lái),新疆、遼寧、吉林、內(nèi)蒙古和山東等省均有HE的流行。近年來(lái),HE的發(fā)病率呈現(xiàn)不斷上升的趨勢(shì),作為一種重要的人獸共患病,HE已在動(dòng)物中廣泛存在,尤其是在家畜中的分布,是不可回避的事實(shí)[1]。在20世紀(jì)90年代早期,Balayan和其同事首先報(bào)道了前蘇聯(lián)豬、羊和鼠中的HEV感染[2-3]。1997年美國(guó)Meng等由美國(guó)本土的一頭豬身上分離出1株野生型HEV病毒,發(fā)現(xiàn)其與人類HEV具有極高的同源性,并發(fā)現(xiàn)其可感染黑猩猩和恒河猴,從而首次證實(shí)了HEV種間傳播的可能性[4-5]。世界上其他地區(qū)豬HEV的陸續(xù)分離及血清學(xué)調(diào)查,表明豬的HEV感染是一種普遍存在的現(xiàn)象[6]。為了解昆明地區(qū)豬HEV感染情況,本研究對(duì)昆明地區(qū)的12個(gè)規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)和部分散養(yǎng)戶的270只不同月齡段的生豬進(jìn)行了HEV血清學(xué)調(diào)查,以期為豬戊型肝炎的防控提供資料。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣本 2008年從昆明市及周邊地區(qū)(包括五區(qū)一市八縣)的12個(gè)規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)及部分散養(yǎng)戶隨機(jī)采集豬血清樣品270份,其中規(guī)模化豬場(chǎng)血清235份、散養(yǎng)戶血清35份;仔豬血清92份、育肥豬血清108份、后備種豬血清70份。血清樣品于—20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 檢測(cè)試劑 豬HEV IgG抗體檢測(cè)試劑盒(ELISA)購(gòu)自北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)方法 間接ELISA方法,按照檢測(cè)試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,通過(guò)配制洗滌液,稀釋樣品,加樣,溫育,洗板,加酶標(biāo)二抗,顯色,終止等操作步驟,最后于450 nm處測(cè)定孔的A值。

1.2.2 結(jié)果判定 以空白孔調(diào)零,當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照孔平均值A(chǔ)450≥0.8,陰性對(duì)照孔平均值A(chǔ)450≤0.1時(shí)試驗(yàn)成立。被檢血清樣品A450≥0.2時(shí)判為陽(yáng)性,A450＜0.2時(shí)判為陰性。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)分析 不同時(shí)間或不同分組間抗體陽(yáng)性率的比較采用Pearson χ2檢驗(yàn),以P＜0.05時(shí)差異顯著,P＜0.01差異極顯著,統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS10.0。

2 結(jié)果

2.1 HEV的感染情況調(diào)查結(jié)果

由表1可知,2008年從昆明市的12個(gè)規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)共采集的235份血清樣本,通過(guò)間接ELISA方法檢測(cè),檢出HEV抗體陽(yáng)性血清139份,陽(yáng)性率為59.15%。在被檢的35份散養(yǎng)豬群的血清樣本中,檢出HEV抗體陽(yáng)性血清26份,陽(yáng)性率為74.29%。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,規(guī)模化豬場(chǎng)HEV感染陽(yáng)性率顯著低于散養(yǎng)戶HEV感染陽(yáng)性率(P＜0.01)。

表1 規(guī)模化豬場(chǎng)與散養(yǎng)戶豬群HEV的感染情況Table 1 HEV infection in scale pig farm and scatter-feed pigs

2.2 不同年齡段豬HEV的感染情況

由表2可知,在采集的270份血清樣品中,仔豬血清92份,其中HEV抗體陽(yáng)性血清56份,陽(yáng)性率為60.87%;育肥豬血清108份,其中HEV抗體陽(yáng)性血清81份,陽(yáng)性率為75%;后備種豬血清70份,其中HEV抗體陽(yáng)性血清28份,陽(yáng)性率為40%。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,不同年齡階段豬感染HEV的陽(yáng)性率差異顯著(P＜0.01或P＜0.05),育肥豬陽(yáng)性檢出率最高,其次是仔豬,后備種豬陽(yáng)性率相對(duì)較低。

表2 不同年齡段豬HEV的感染情況T able 2 HEV infection in different age pig

3 討論

目前尚未見(jiàn)到關(guān)于昆明地區(qū)豬HEV感染情況的報(bào)道,本研究通過(guò)2008年的血清學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),昆明地區(qū)規(guī)模化豬場(chǎng)HEV抗體陽(yáng)性率高達(dá)59.15%,飼養(yǎng)條件和衛(wèi)生條件相對(duì)較差的散養(yǎng)戶豬群中HEV抗體的陽(yáng)性率更高,為74.29%,兩者差異顯著(P＜0.01),這可能與豬戊型肝炎的流行規(guī)律有關(guān),HEV感染的豬群通過(guò)糞便、分泌物等污染周圍的飼料及飲水,從而通過(guò)消化道感染健康豬群[7-8]。目前沒(méi)有相應(yīng)的豬用HEV疫苗問(wèn)世,因此本文所測(cè)得抗體陽(yáng)性的豬群是由野毒自然感染所引起,其抗體總陽(yáng)性率高達(dá)61.11%,表明昆明地區(qū)豬HEV的自然感染普遍存在且情況較為嚴(yán)重,應(yīng)當(dāng)引起有關(guān)部門(mén)和養(yǎng)豬場(chǎng)的高度重視,必須盡快制定并采取有效措施進(jìn)行預(yù)防和控制。

根據(jù)不同年齡段豬HEV的感染情況(表2),表明昆明地區(qū)仔豬和育肥豬的HEV感染率較高,這與在美國(guó)、臺(tái)灣地區(qū)和日本報(bào)道的大多數(shù)豬在2月齡～3月齡感染HEV結(jié)果一致[9-12]。育肥豬HEV抗體的陽(yáng)性率顯著高于仔豬(P＜0.05),表明此年齡段豬群較易感。此次調(diào)查結(jié)果與人類戊型肝炎的發(fā)病特點(diǎn)相一致,即人類的HEV感染與年齡有關(guān),幼年時(shí)感染HEV多為亞臨床型,青壯年時(shí)期感染HEV多為臨床型,且較易感[13-14]。

豬HEV的感染不僅影響了豬只的生長(zhǎng)性能,給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)直接的經(jīng)濟(jì)損失,而且還對(duì)動(dòng)物性食品安全和公共衛(wèi)生安全帶來(lái)隱患。已有研究表明,與豬密切接觸的職業(yè)人群血清HEV抗體高于非職業(yè)人群[6,7],豬HEV與人源HEV在基因序列上具有高度的同源性[10-11],且豬HEV引起的組織病理學(xué)病變與人類HEV引起的病變類似[15]。提示HE是一種重要的人獸共患病,豬源HEV可能是引起人類HEV感染的主要病原,與豬密切接觸的職業(yè)人群應(yīng)定期進(jìn)行HEV抗體及肝功能的檢測(cè)。中國(guó)人傳統(tǒng)的飲食習(xí)慣在肉食品方面主要以豬肉及其內(nèi)臟為主,因此有必要深入研究豬HEV的分子流行病學(xué)特點(diǎn)和豬HEV的致病機(jī)理,在此基礎(chǔ)上研發(fā)相應(yīng)的豬用HEV疫苗,定期監(jiān)測(cè)豬群HEV抗體,對(duì)于保障動(dòng)物性食品安全和公共衛(wèi)生安全,有效預(yù)防和控制豬戊型肝炎具有重要意義。

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