平板凝集反應(yīng)預(yù)防新生騾駒溶血病的臨床應(yīng)用

徐定群,夏桂林,張勝貴,譚建春

(1.云南省永勝縣三川鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,云南 永勝 674207;2.云南省永勝縣動物疫病預(yù)防控制中心,云南 永勝 674200;3.云南省永勝縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所,云南 永勝 674200)

新生騾駒溶血病是由公驢和母馬雜交所產(chǎn)幼駒,吮食高效價(jià)抗體初乳后引發(fā)的一種急性、免疫性、溶血性疾病。臨床上以貧血、黃疸、血紅蛋白尿?yàn)橹饕卣鳌Ｐ律咇x溶血病時(shí)有發(fā)生,給飼養(yǎng)戶造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。發(fā)病后目前多以停喂母馬初乳、輸血、補(bǔ)充造血物質(zhì)為主的治療方法,但治愈率不高。2005年以來,筆者采用凝集反應(yīng)測定初乳和血清抗體效價(jià),根據(jù)測定結(jié)果提示母馬初乳和騾駒血液的抗體效價(jià),凝集價(jià)在1∶16以上者,7 d內(nèi)不能讓其吃母乳;1∶8以上者,4 d內(nèi)不能吃母乳;1∶4以下者可以吃母乳。應(yīng)用這種預(yù)防性診斷方法,經(jīng)臨床上94例新生騾駒的應(yīng)用,效果良好,報(bào)告如下。

1 臨床癥狀

騾駒出生后幾小時(shí)內(nèi)正常,吃初乳后不久開始發(fā)病,最急性的出生后8～36 h出現(xiàn)嚴(yán)重的血尿,尿液呈醬油色,并出現(xiàn)排尿困難,黏膜有輕度黃染。急性的出生后2～4 d發(fā)病,黃疸明顯,并出現(xiàn)血尿。慢性的出生后約4～5 d發(fā)病,癥狀較輕,并有時(shí)能自愈。全身癥狀表現(xiàn)為:體溫一般在37.5℃,騾駒精神沉郁,一旁呆立,呻吟,頭下垂,四肢無力,衰弱,不愿吸乳,長時(shí)間臥地,肌肉震顫,心跳加快,呼吸急促,后期出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,多因無法搶救而死亡。

2 凝集反應(yīng)操作方法

2.1 試驗(yàn)材料 青霉素藥劑空瓶6個(gè)及15×20 cm玻璃板1塊。空瓶用生理鹽水洗凈瀝干后分別貼上“1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、2%紅細(xì)胞、初乳”字樣的標(biāo)簽以防混亂。同時(shí)準(zhǔn)備好注射器、滴管、消毒藥棉等。

站立保定騾駒,頸靜脈溝中部剪毛常規(guī)消毒后,用注射器靜脈采血2mL;母馬站立保定,用清潔水洗凈乳頭并擦干后,擠棄少許初乳后收取2mL乳汁于小瓶中備用。

2.2 初乳稀釋液與2%紅細(xì)胞懸液的制備 將青霉素小瓶按“1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、2%紅細(xì)胞”標(biāo)記從左到右排好,然后用吸管由左向右在前4瓶中依次分別加入生理鹽水1.5mL、1.0mL、1.0mL、1.0mL;在第5個(gè)安瓶中加人生理鹽水2.0mL。用吸管吸取初乳0.5mL加入“1∶4”的小瓶中,混勻即成為1∶4稀釋倍數(shù)的初乳稀釋液。再用吸管吸取1∶4的初乳稀釋液1.0mL加入“1∶8”的小瓶中,混勻即成為1∶8稀釋倍數(shù)的初乳稀釋液。以此用2倍遞增稀釋法即制成1∶4、1∶8、1∶16、1∶32的初乳稀釋液。取騾駒血液2～3滴加入“2%紅細(xì)胞”的小瓶中,混勻好成為2%紅細(xì)胞懸液。

凝集反應(yīng)操作方法:將玻璃平板置于墊有白紙的桌面上,用吸管分別吸取上述初乳稀釋液各1滴等距離加入玻璃板上為診斷列;同樣,用生理鹽水也加入一列為對照列。然后用吸管吸取2%紅細(xì)胞懸液等量分別加入初乳稀釋液與生理鹽水中,用火柴棒或牙簽逐一混勻,并輕輕搖動玻板,在室溫條件下靜置30 min后即可判定結(jié)果。

2.3 結(jié)果判定 自然光下肉眼仔細(xì)觀察診斷列,凡是在“1∶16”或“1∶32”處出現(xiàn)液體內(nèi)澄清,并有顆粒狀凝集物出現(xiàn)者,診斷檢查結(jié)果判定為陽性,記為(+);凡是“1∶16”處沒出現(xiàn)凝集物,而是液體呈淡紅色混濁,診斷檢查結(jié)果判定為陰性,記為(一);凡是在“1∶16”處液體凝集反應(yīng)結(jié)果不明顯者,診斷檢查結(jié)果判定為可疑,記為(±)。

應(yīng)用前述方法在臨床上對94例新生騾駒出生后進(jìn)行了初乳-血液凝集反應(yīng)診斷檢查。凝集價(jià)在1∶4,1∶8,1∶16,1∶32的馬匹依次為 18,32,23,21,檢查結(jié)果陽性39例,占總例數(shù)的41.5%,可疑5例,占總例數(shù)5.3%,其余50例為陰性,占總例數(shù)的53.2%。

3 預(yù)防措施

對診斷檢查結(jié)果為陰性的新生騾駒,準(zhǔn)許喂母馬初乳,并進(jìn)行常規(guī)出生護(hù)理。對陽性和可疑的44例騾駒禁止吃初乳,喂給代乳品7 d后再吃常乳,同時(shí)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,做到保溫、通風(fēng)、防止騾駒舔食馬糞、胎衣、泥石等異物。加強(qiáng)獸醫(yī)臨床監(jiān)護(hù),及時(shí)注意騾駒的精神、食欲、糞尿、體溫、呼吸等。結(jié)果除發(fā)生胃腸道感染和膿毒敗血癥死亡3例外,其余全部成活,存活率93.2%。

4 討論與小結(jié)

4.1 新生騾駒溶血病,主要是騾駒吮食初乳中的抗體進(jìn)入血液循環(huán),與騾駒自身血液中的特異抗原結(jié)合,呈現(xiàn)出破壞紅細(xì)胞的毒性作用而引起溶血,導(dǎo)致發(fā)病。據(jù)臨床統(tǒng)計(jì)顯示,該病多發(fā)生于2～3胎騾駒,且發(fā)病率隨母馬的生產(chǎn)次數(shù)的增加而上升。

4.2 初乳中抗體成分對騾駒的抗病力十分重要,分泌型免疫球蛋白有抗腸道感染的作用,所以在喂人工乳而尚未得到母馬初乳抗體的免疫保護(hù)時(shí),應(yīng)注重騾駒腸道感染的防治。

4.3 應(yīng)用平板凝集反應(yīng)測定母馬初乳和騾駒血液的抗體效價(jià),根據(jù)抗體效價(jià)提示,采取相應(yīng)措施,能有效預(yù)防新生騾駒溶血病的發(fā)生,本方法簡便易行,可應(yīng)用于基層獸醫(yī)站。

[1]孟凡生.凝集反應(yīng)在預(yù)防新生騾駒溶血病的臨床應(yīng)用報(bào)告[J].廣西畜牧獸醫(yī),2004,20(1):21-22.

[2]李景斌.新生騾駒溶血病的防治[J].中國獸醫(yī)雜志,2000,26(10):27.

[3]王貴波,扈桂珍,邵喜武.新生騾駒溶血病防治措施的探討[J].吉林畜牧獸醫(yī),2004,12:45.

[4]周增祿.應(yīng)用凝集反應(yīng)測定抗體效價(jià)預(yù)防幼駒溶血病[J].云南畜牧獸醫(yī),2006,1:44.