中藥麻黃根的化學成分研究

楊艷芳， 陸 毅， 吳高峰， 肖夢媛， 吳和珍＊

(1.湖北中醫學院“中藥資源與中藥復方”省部共建教育部重點實驗室，湖北武漢430065;2.湖北福人藥業股份有限公司，湖北通城437400)

麻黃根來源于麻黃科植物草麻黃Ephedra sinica Stapf或中麻黃Ephedra intermedia Schrenk et C.A.Mey.的干燥根及根莖，為傳統中藥，收載于《中國藥典》2005年版一部。麻黃根具有止汗功效，臨床上常用于治療自汗、盜汗等證。現代藥理試驗研究表明，麻黃根具有抗高血壓作用［1］，但其抗高血壓作用的物質基礎尚不明確。為了闡釋麻黃根抗高血壓作用的物質基礎，作者以自發性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats，SHR)為受試對象，對麻黃根乙醇提取液的石油醚萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位以及水液4個部位進行藥理篩選研究，確定乙酸乙酯部位和正丁醇部位為麻黃根抗高血壓作用活性部位。在此基礎上，對其中的活性部位乙酸乙酯部位的化學成分進行了初步研究，從中分離并鑒定了7種化合物，分別為 β－谷甾醇(1)、豆甾醇－3－O-β-D－吡喃葡萄糖苷(2)、麻黃寧 D(3)、麻黃寧 E(4)、麻黃酚A(5)、表阿夫兒茶精(6)、辛酸乙酯(7)。其中化合物 1、2、6、7 均為首次從該種中藥中分離得到。

1 儀器與材料

Varian INOVA S－600核磁共振譜儀(TMS為內標);Bruker Daltonics公司 ESI－q－TOF－MS 質譜儀(負離子模式);Agilent 1100半制備高效液相色譜儀;柱色譜硅膠及薄層硅膠GF254為青島海洋化工廠出品;Sephadex LH－20柱色譜材料為Pharmacia公司產品;Toyopearl HW－40F柱色譜材料為日本TOSOH公司產品;所用試劑為化學純或分析純。

麻黃根藥材采自山西大同，經湖北中醫學院藥學院生藥學教研室吳和珍副教授鑒定為麻黃科植物草麻黃(Ephedra sinica Stapf)的干燥根和根莖。標本保存在湖北中醫學院“中藥資源與中藥復方”省部共建教育部重點實驗室。

2 提取與分離

麻黃根藥材5.5 kg，以10倍量85%乙醇滲漉提取，提取液減壓濃縮至無醇味。濃縮液依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液分別減壓回收溶劑，干燥，得到各部位浸膏。其中，乙酸乙酯部位浸膏181 g。取該浸膏167 g，加入硅膠(100～200目)220 g拌勻，充分干燥后轉至硅膠柱(2 kg，100～200目)上，以二氯甲烷－甲醇系統(9∶1～1∶4)梯度洗脫。收集各部分洗脫液，每份500 mL。洗脫液以TLC檢識，合并相似流份，共收集得到9個流分Fr.1～Fr.9。采用反復硅膠柱層析從Fr.1中得到化合物1(7 mg);采用反復硅膠柱層析、三氯甲烷－甲醇(2∶1)Toyopearl HW－40F柱色譜從Fr.3中得到化合物2(40 mg);采用反復硅膠柱層析、三氯甲烷－甲醇(1∶1)Sephadex LH－20柱色譜、制備薄層色譜以及半制備高效液相色譜等分離純化方法從Fr.4 中得到化合物3(90 mg)、4(12 mg)、5(56 mg)、6(33 mg);采用反復硅膠柱層析從Fr.5中得到化合物7(30 mg)。

3 結構鑒定

化合物 1:白色針晶(氯仿)，Liebermann－Burchard反應呈陽性，提示該化合物具有甾體母核。其1H－NMR譜數據與 β－谷甾醇一致;與β－谷甾醇對照品共硅膠薄層色譜展開比較，兩者色譜行為一致。因此鑒定該化合物為β－谷甾醇(β－sitosterol)。

化合物2:白色無定形粉末(吡啶)，mp 281～283 ℃。ESI－MS m/z:395［M－Glu－H］－，分子式為:C35H58O6;1H－NMR(C5D5N，600 MHz)δ:5.36(1H，s，H－6)，5.22(1H，m，H－22)，5.10(1H，m，H－23)，5.08(1H，d，J=7.80 Hz，C1′－H)，4.59 ～ 3.97(7H，m，H－3 及 C2′～6′－H)，2.76(2H，m，H－4)，2.49(2H，t，H－2)，1.00(3H，d，J=6.0 Hz，H－21)，0.90(3H，s，H－19)，0.68(3H，s，H－18);13C－NMR(C5D5N，150 MHz)δ:140.9(C－5)，135.8(C－22)，123.2(C－23)，122.0(C－6)，102.6(C－1′)，78.7(C－3′)，78.5(C－3)，78.1(C－5′)，75.4(C－2′)，71.7(C－4′)，62.9(C－6′)，56.9(C－14)，56.3(C－17)，50.4(C－9，C－24)，46.1(C－13)，42.5(C－20)，39.4(C－12)，37.0(C－1，C－4)，36.4(C－10)，32.2(C－8，C－25)，32.1(C－7)，30.3(C－2)，29.5(C－16)，26.4(C－28)，23.4(C－15)，21.3(C－21)，20.0(C－11)，19.5(C－27)，19.3(C－19)，19.0(C－26)，12.2(C－18)，12.0(C－29)。以上波譜數據與文獻［2］報道基本一致，故鑒定該化合物為豆甾醇－3－O-β-D－吡喃葡萄糖苷(stigmasterol－3－O-β-D－glucopyranoside)。

化合物3:無色粉末(氯仿－甲醇)。ESI－MS m/z:527［M－H］－，分子式為:C30H24O9，在甲醇中的旋光度為［α］D－104°;1H－NMR(Acetone－d6，600 MHz)δ:7.59(2H，d，J=8.4 Hz，H－2?，H－6?)，7.53(2H，d，J=8.4 Hz，H－2′，H－6′)，6.90(2H，d，J=8.4 Hz，H－3′，H－5′)，6.89(2H，d，J=8.4 Hz，H－3?，H－5?)，6.22(1H，s，H－6″)，2.18(2H，d，J=3.0 Hz，H－3)，6.04(1H，d，J=2.4 Hz，H－8)，5.98(1H，d，J=2.4 Hz，H－6)，5.03(1H，brs，H－2″)，4.32(1H，s，H－3″)，4.38(1H，s，H－4)，2.97(2H，d，J=4.8 Hz，H－4″);13C－NMR(Acetone－d6，150 MHz)δ:158.5(C－4′)，158.2(C－4?)，158.0(C－8a)，155.8(C－5″)，155.4(C－7)，154.2(C－5)，152.2(C－7″)，151.6(C－8″a)，134.0(C－1′)，130.3(C－1?)，130.0(C－2?，C－6?)，127.8(C－2′，C－6′)，115.7(C－3′，C－5′)，115.6(C－5?)，115.5(C－3?)，107.1(C－8″)，106.8(C－4a)，102.0(C－4″a)，99.1(C－2)，97.8(C－6″)，96.9(C－8)，96.3(C－6)，81.6(C－2″)，66.0(C－3″)，34.6(C－3)，30.6(C－4″)，21.0(C－4)。以上波譜數據與文獻［3］報道的麻黃寧D的波譜數據一致，故鑒定該化合物為麻黃寧D(Mahuannin D)。

化合物4:無色針晶(氯仿－甲醇)。ESI－MS m/z:527［M－H］－，分子式為:C30H24O9;1H－NMR(Acetone－d6，600MHz)δ:7.52(2H，d，J=7.8 Hz，H－2?，H－6?)，7.38(2H，d，J=7.8 Hz，H－2′，H－6′)，6.88(2H，d，J=7.8 Hz，H－3′，H－5′)，6.88(2H，d，J=7.8 Hz，H－3?，H－5?)，6.18(1H，s，H－6″)，6.01(1H，d，J=2.4 Hz，H－8)，5.89(1H，d，J=2.4 Hz，H－6)，4.81(1H，brs，H－2″)，4.28(1H，s，H－4)，4.22(1H，d，J=4.8 Hz，H－3″)，2.59(2H，dd，J=6.6 Hz，15.6 Hz，H－4″)，2.20(2H，dd，J=3.0 Hz，19.2 Hz，H－3);13C－NMR(Acetone－d6，150 MHz)δ:157.9(C－4′)，157.8(C－4?)，157.4(C－7)，154.7(C－5″)，154.6(C－5)，153.6(C－8a)，151.7(C－7″)，150.0(C－8″a)，133.4(C－1′)，129.3(C－1?)，129.2(C－2?，C－6?)，127.3(C－2′，C－6′)，115.4(C－3?)，115.0(C－3′，C－5′)，106.2(C－8″)，106.0(C－4a)，102.0(C－4″a)，98.6(C－2)，97.0(C－6″)，96.3(C－6)，95.8(C－8)，83.0(C－2″)，67.2(C－3″)，33.8(C－3)，29.9(C－4″)，20.6(C－4)。以上波譜數據與文獻［4］報道的麻黃寧E的波譜數據一致，故鑒定該化合物為麻黃寧E(Mahuannin E)。

化合物5:淺黃色針晶(氯仿－甲醇)，mp＞360℃。ESI－MS m/z:555［M－H］－，分子式(含水結晶)為:C30H20O11· 2H2O;1H－NMR(Acetone－d6，600 MHz)δ:8.53(2H，d，J=9.0 Hz，H－2?，H－6?)，7.59(2H，d，J=9.0 Hz，H－2′，H－6′)，7.02(2H，d，J=9.0 Hz，H－3?，H－5?)，6.90(2H，d，J=9.0 Hz，H－3′，H－5′)，6.32(1H，s，H－6″)，6.12(1H，d，J=2.4 Hz，H－8)，6.07(1H，d，J=2.4 Hz，H－6)，5.06(1H，d，J=3.0 Hz，H－4)，4.35(1H，s，H－3);13C－NMR(Acetoned6，150 MHz)δ:176.5(C－4″)，160.1(C－5″)，159.3(C－4?)，158.6(C－7″)，158.0(C－8a)，157.4(C－5，C－7)，154.0(C－8″a)，152.6(C－4′)，147.5(C－2″)，136.7(C－3″)，131.1(C－2?，C－6?)，130.7(C－1′)，129.2(C－2′，C－6′)，123.4(C－1?)，116.1(C－3′，C－5′)，115.4(C－3?，C－5?)，107.4(C－4″a)，105.1(C－4a)，102.6(C－8″)，100.6(C－2)，98.9(C－6″)，97.2(C－6)，95.9(C－8)，67.2(C－3)，29.1(C－4)。以上波譜數據與文獻［5］報道的麻黃酚A(ephedrannin A)的數據一致，故鑒定該化合物為麻黃酚A(ephedrannin A)。

化合物6:無色針晶(甲醇)，mp 246℃。ESIMS m/z:273［M－H］－，分子式為:C15H14O5;該化合物在227 nm、274 nm處有強吸收，與FeCl3反應呈陽 性，顯 示 有 酚 羥 基。1H－NMR(Acetone－d6，600 MHz)δ:7.34(2H，d，J=8.4 Hz，H－2′，H－6′)，6.79(2H，d，J=8.4 Hz，H－3′，H－5′)，6.00(1H，d，J=2.4 Hz，H－8)，5.90(1H，d，J=2.4 Hz，H－6)，4.91(1H，s，H－2)，4.20(1H，dd，J=3.6 Hz，4.8 Hz，H－3)，2.94(1H，s，C3－OH)，2.87(1H，dd，J=16.2 Hz，4.8 Hz，H－4α)，2.74(1H，dd，J=16.2 Hz，3.6 Hz，H－4β);13C－NMR(Acetone－d6，150 MHz)δ:157.0(C－4′)，156.9(C－7，C－8a)，156.5(C－5)，130.8(C－1′)，128.5(C－2′，C－6′)，114.8(C－3′，C－5′)，99.1(C－4a)，95.5(C－6)，95.0(C－8)，78.8(C－2)，66.2(C－3)，28.5(C－4)。以上波譜數據與文獻［6］報道的(2R，3R)(－)表阿夫兒茶精的波譜數據一致，故鑒定該化合物為表阿夫兒茶精(epiafzelechin)。

化合物7:無色油狀液體。ESI－MS m/z:171［MH］－，分子式為:C10H20O2;1H－NMR(CDCl3，600 MHz)δ:4.12(2H，q，J=7.2 Hz，H－9)，2.05(2H，s，H－2)，1.26(3H，t，J=7.2 Hz，H－10)，1.25 ～ 1.32(10H，m，H－3 ～ 7)，0.85(3H，t，J=6.0 Hz，H－8);13C－NMR(150 MHz，CDCl3)δ:171.1(C－1)，60.4(C－9)，31.9(C－2)，29.7(C－6)，29.6(C－4)，29.3(C－5)，22.6(C－3)，21.0(C－7)，14.1(C－8)，14.1(C－10)。以上波譜數據與文獻［7］對照基本一致，故鑒定該化合物為辛酸乙酯。

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