貯藏溫度對中國南瓜花粉生活力的影響

趙麗麗，李國強，劉愛群，王國政

（遼寧省農業科學院蔬菜所，遼寧沈陽，110161）

中國南瓜屬于雌雄同株異花授粉作物。在制種實踐中常因花期不遇、遠距離雜交以及親本選配等問題而導致花粉生活力在自然狀態下迅速下降，因此必須采用一定的貯藏方法保持花粉的生活力或者減緩花粉生活力下降的速度。許多學者研究表明，利用低溫干燥的方法貯藏花粉可以大幅度地延長花粉的壽命[1～3]，但國內外關于中國南瓜花粉生活力的測定及貯藏方法的報道還甚少。因此，本試驗研究不同貯藏溫度對中國南瓜花粉生活力的影響，以期為南瓜制種技術提供科學的依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗于2009年6月中旬至7月上旬，在遼寧省農業科學院蔬菜所試驗基地進行，供試品種為中國南瓜砧木遼砧1號。在南瓜盛花期，早晨8：00，摘取健壯植株相近節位上的雄花，去掉萼片、花瓣，用鑷子和刀片將花藥上的花粉取下來，然后在不同的條件下貯藏。

1.2 試驗處理

①不同貯藏溫度對新鮮花粉生活力的影響 將新鮮花粉放在鋪有濾紙的5個培養皿中，密封保存。然后分別放在-15℃，0℃，5℃，10℃，25℃的光照培養箱中黑暗貯藏。每隔1 d觀察1次，測定花粉生活力。連續觀察15 d。

②不同干燥方式對花粉生活力的影響 將新鮮花粉一部分用硫酸紙包好，放在加入硅膠干燥劑的干燥器中，瓶口用凡士林密封，放在室內；一部分花粉放在室內自然風干。每隔1 d觀察1次，測定花粉生活力。連續觀察15 d。

③貯藏溫度對干燥花粉生活力的影響 將新鮮花粉用硅膠干燥劑干燥24 h后取出，分裝在5個青霉素小瓶中，密封保存。將這5個小瓶的花粉分別放在-15℃，0℃，5℃，10℃，25℃的光照培養箱中黑暗貯藏。每隔2 d觀察1次，測定花粉生活力，連續觀察15 d。

1.3 試驗方法

采用醋酸洋紅（1%）染色法測定花粉生活力，參照梁建萍等[4]、莊飛云[5]的方法。用毛筆蘸取花粉，散落在載玻片上，滴入2～3滴醋酸洋紅溶液，用鑷子輕輕攪拌使花粉粒均勻散開后蓋上蓋玻片，幾分鐘后將制片置于顯微鏡（采用OLYMPUS 70S顯微鏡，物鏡10×10）下觀察。有活力的花粉被染成深紅色，沒有活力的花粉呈現淺紅色或無色。每個處理5朵花，將5朵花花粉混合均勻，取30個視野，10個視野為一次。分別統計各個視野中的花粉粒總數和花粉萌發粒數，計算花粉的生活力，花粉生活力（%）＝有活力的花粉粒數/花粉粒總數×100%。

2 結果與分析

2.1 不同貯藏溫度對新鮮中國南瓜花粉生活力的影響

由圖1可知，中國南瓜花粉在25℃條件下貯藏，花粉生活力下降最快，貯藏5 d生活力就下降到5.63%；其次是10℃和5℃條件下貯藏的花粉活力，貯藏11 d和15 d，其生活力就下降到10%以下；生活力下降比較緩慢的是在0℃和-15℃條件下貯藏的花粉，貯藏15 d，花粉生活力分別下降至50.22%和79.51%。說明溫度與花粉活力呈負相關，貯藏溫度越低，花粉生活力下降也越慢。

圖1 不同貯藏溫度對新鮮花粉生活力的影響

2.2 不同干燥方式對中國南瓜花粉生活力的影響

由圖2可知，在整個花粉貯藏期間，自然風干處理花粉的生活力始終高于硅膠干燥處理花粉的生活力，隨貯藏期的延長，花粉生活力均緩慢下降，二者差異呈加大趨勢。表明自然風干處理較硅膠干燥處理有利于花粉的貯藏。

2.3 不同貯藏溫度對干燥處理后的中國南瓜花粉生活力的影響

在不同溫度條件下貯藏的干燥花粉生活力總體呈緩慢下降趨勢，其中貯藏15 d時，-15℃和0℃貯藏條件的花粉生活力下降較大，達到77.0%和75.33%，顯著低于 5℃、10℃和 25℃條件下貯藏的花粉生活力（80.65%，83.88%和 82.65%）（圖3）。 表明中國南瓜花粉經硅膠干燥后，其生活力對貯藏溫度不是很敏感，但長期在-15℃和0℃的低溫條件下貯藏，花粉生活力下降明顯。

3 結論與討論

圖2 不同干燥方式下的花粉生活力

圖3 不同貯藏溫度對干燥花粉生活力的影響

本試驗結果表明，不論哪種貯藏方法，花粉的生活力都隨貯藏天數的增加而下降。對新鮮花粉來說，在貯藏初期，花粉生活力下降的幅度比較大，隨貯藏期的延長，花粉生活力的變化較平緩。且低溫條件下（-15℃和0℃）貯藏的花粉生活力的變化較其他貯藏條件下變化小。這可能是由于在低溫條件下，花粉的一切生理活動幾乎停止，最大限度地減少了營養的消耗，所以有利于花粉貯藏壽命的延長。這與李光等[6]在關于溫度對黃瓜花粉生活力方面的看法一致。而對于用硅膠干燥24 h后的干燥花粉來說，常溫貯藏又有利于減緩花粉生活力的下降。常溫條件下，自然風干干燥后的花粉萌發率明顯強于硅膠干燥后的花粉萌發率。同時還發現在貯藏期間，隨貯藏期的延長，中國南瓜花粉生活力同其他作物一樣，除受自身遺傳差別外，還受溫度、濕度、光照、雄花采摘時間[6～8]等多種因素的相互作用，但花粉生活力的喪失機理、如何減緩或控制花粉生活力快速下降等，還有待于進一步研究。

[1]董偉.不同花齡及貯藏條件對辣椒花粉萌發與授粉的影響[J].中國蔬菜，1990（2）：11-12.

[2]王進忠，云曉鵬，康榮芹，等.地錦和五葉地錦花粉生活力及其貯藏特性研究[J].北京農學院學報，2006，21（1）：10-13.

[3]張義，王亞莉，陳俊杰.低溫及藥劑處理對李花粉生活力的影響[J].湖北農學院學報，2003，23（4）：248-250.

[4]梁建萍，韓有志，梁勝發，等.丁香花粉生活力及貯藏性的研究[J].山西林業科技，2000（1）：10-11，19.

[5]莊飛云.黃瓜屬種間雜種（Cucum is hytivus Chen and Kirkbride）的細胞分子遺傳及其系統分子親緣關系[D].南京：南京農業大學，2003.

[6]李光，鄧強，魏愛民，等.貯藏溫度對黃瓜花粉生活力的影響[J].中國蔬菜，2007（9）：22-24.

[7]姜輝.沙棘花粉生活力測定和貯藏試驗[J].沙棘，2006（2）：7-9.

[8]Hanson C H,Compbell T A.Vacuum dried pollen of alfalfa(Medicago SativalL.)viable after eleven years[J].Crop Science,1972,12:874.