黑骨藤追風活絡膠囊質量控制的研究

耿亞 馬永明

（漯河醫學高等?？茖W校第二附屬醫院 河南漯河 462002）

黑骨藤追風活絡膠囊是根據苗族醫藥理論,選取苗族治療風濕病的經典藥材,按現代制藥技術制成的苗藥。本試驗采用薄層色譜法對處方中的青風藤、黑骨藤、追風傘進行定性鑒別,用高效液相色譜(HPLC)法測定膠囊中青藤堿的含量。

1 臨床資料

Agilent1100高效液相色譜儀、G2170AA色譜工作站(美國安捷倫公司)、黑骨藤追風活絡膠囊（貴州老來福藥廠生產）、青藤堿對照品(成都曼思特生物科技有限公司),槲皮素（中國藥品生物制品檢定）追風傘對照藥材由貴州大學生化所提供，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 定性

2.1.1 黑骨藤的鑒別 取本品內容物10g，研細，加氯仿超聲輔助提取1h,濾過，濾液揮干，加甲醇10mL超聲波催溶，為供試品溶液；另取黑骨藤對照藥材5g研細，50mL氯仿提取，濾液蒸干，殘渣加甲醇10mL使溶解，作為對照藥材溶液;再取槲皮素2g,加甲醇10mL，催溶，得對照品溶液；陰性樣品對照(除黑骨藤外,其他藥材按比例進行提取)溶液。

2.1.2 青風藤的鑒定 取本品內容物10g,研細，pH為5.7鹽酸水溶液提取2h,氨水調pH8.1,離心，沉淀物氯仿萃取，過濾，濾液揮干，加10mL甲醇催溶，為供試品溶液;另取青風藤10g，研細，參照上述方法，得對照藥材溶液；另取青藤堿2g溶解于10mL的甲醇中作為對照品溶液，陰性樣品對照(除青風藤外,其他藥材按比例進行提取)溶液。毛細管吸取上述3種溶液各2μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-甲酸甲酯(18∶5)為展開劑,展開,晾干,碘化鉍鉀顯色。供試品與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。陰性對照無干擾，Rf為0.65、0.64、0.64。

2.1.3 追風傘鑒定 取本品內容物10g,研細，加甲醇超聲輔助提取2h,過濾，為供試品溶液，另取追風傘10g，研細，參照上述方法，得對照藥材溶液；陰性樣品對照(除追風傘外,其他藥材按比例進行提取)溶液。毛細管吸取上述3種溶液各2μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲醇-醋酸-水(10:5:2)為展開劑,展開,晾干,置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。陰性對照無干擾。

2.2 含量測定

2.2.1 青藤堿 色譜柱：Agilent C18柱（150mm×4.6mm5μm），流動相：乙腈-水-三乙胺(21:79:0.05)，檢測波長為262nm[1]，流速1.0mL/min，柱溫30℃，進樣量：20μL。

2.2.2 線性范圍試驗 分別吸取青藤堿溶液0.1,1.5,2.5,3.5,4.5mL,分別置于5mL量瓶中,加70%甲醇稀釋至刻度,分別精密吸取該對照品溶液20μL,按“2.2.1”項下色譜條件進樣,測定青藤堿峰面積,以濃度峰面積(Y)對(X)作線性回歸,得回歸方Y=3907423X-78229（r=0.9998)。青藤堿在2～90μg.mL-1范圍內呈良好的線性關系。

2.2.3 穩定性試驗 取青藤堿供試品溶液20μL,按照2.1.2項下條件在(2、8、14、20、24)h時進行測定，以考察其穩定性，結果RSD值為2.32%表明青藤堿在24h內穩定。

2.2.4 精密度試驗 對照品溶液20μL注入液相色譜，重復5次,結果測定峰面積積分值得RSD值為1.33%，表明儀器精密度良好。

2.2.5 重現性試驗 取同一批樣品,按2.1.2項下方法平行制備5份供試品溶液,測定測得峰面積，計算其含量,平均RSD值為1.73%，表明該方法重現性良好。

2.2.6 加樣回收率試驗 取已知含量的樣品5份,準確稱定各1.0g,加入不同劑量青藤堿對照品，按上述方法制備，參照2.2.1項下條件測定其含量并計算回收率,結果平均回收率99.25%，RSD1.27%。

2.2.7 樣品測定 對3批樣品依“2.2.1”項下方法制備供試液,按外標法測定含量,測定三次，含量分別為（0.2873、0.2871、0.2891）mg.mL-1平均含量0.2878mg.mL-1,平均RSD1.27%。

3 討論

青藤堿具有肯定的鎮痛鎮靜、鎮咳局麻、降血壓、抗炎作用[2]，因此選擇青風藤中有效成分青藤堿為含量控制標準,從而更好地控制產品質量。本實驗采用采用檢測波長262nm，流動相條件擬定如下:乙腈-水-三乙胺(21:79:0.05)，在該條件下,供試品分離情況較好。

[1]李可強,劉威,張振秋.HPLC法測定北豆根藥材中粉防己堿和青藤堿[J].中草藥，2008，4:607～610.

[2]劉志國,王艷艷.青風藤中青藤堿的提取工藝及分析方法研究進展[J].時珍國醫國藥,2006,17(5):116～117.