夏枯草果穗的化學(xué)成分研究

許道翠，劉守金，俞年軍，方成武

(安徽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院 安徽省現(xiàn)代中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽 合肥 230038)

化學(xué)成分

*劉守金，Tel(0551)5169036，E-mailliushjin@hotmail.com

夏枯草果穗的化學(xué)成分研究

許道翠，劉守金*，俞年軍，方成武

(安徽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院 安徽省現(xiàn)代中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽 合肥230038)

目的研究夏枯草PrunellavulgarisL.果穗中的化學(xué)成分。方法乙醇總提取物經(jīng)醋酸乙酯萃取，萃取物經(jīng)反復(fù)硅膠柱和Sephadex LH-20柱色譜分離和純化得到單體化合物，根據(jù)理化性質(zhì)和波譜分析數(shù)據(jù)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果從夏枯草中分離并鑒定了9個(gè)化合物，其結(jié)構(gòu)分別為大黃酚(1)、2-羥基-3-甲基蒽醌(2)、漢黃芩素(3)、烏蘇酸(4)、β-香樹(shù)脂醇(5)、α-菠甾醇(6)、α-菠甾酮(7)、β-胡蘿卜苷(8)、β-谷甾醇(9)。結(jié)論化合物1～3、7是從該屬植物中首次分離得到。

夏枯草；化學(xué)成分

中藥夏枯草為唇形科植物夏枯草PrunellavulgarisL.的干燥果穗，味辛、苦，性寒，入肝、膽經(jīng)。具有清火、明目、散結(jié)、消腫的功能，用于目赤腫痛、目珠夜育，頭痛眩暈，瘰疬，癭瘤，乳癰腫痛；甲狀腺腫大，淋巴結(jié)結(jié)核，乳腺增生，高血壓[1]。有關(guān)夏枯草的化學(xué)成分國(guó)內(nèi)外已有研究報(bào)道[2]，主要有三萜、皂苷、甾醇、苯丙素、黃酮、香豆素、蒽醌、有機(jī)酸等成分。本研究從夏枯草果穗中分離得到了9個(gè)化合物，2個(gè)蒽醌類(lèi)：大黃酚(1)和2-羥基-3-甲基蒽醌(2)，1個(gè)黃酮類(lèi)：漢黃芩素(3)，2個(gè)三萜類(lèi)：烏蘇酸(4)、β-香樹(shù)脂醇(5)，4個(gè)甾體類(lèi)：α-菠甾醇(6)、α-菠甾酮(7)、β-胡蘿卜苷(8)和β-谷甾醇(9)。其中化合物1～3、7是從該屬植物中首次分離得到。

1 儀器與材料

XRC-1型顯微熔點(diǎn)儀(四川大學(xué)科學(xué)儀器廠)，溫度未校正；BruckerAV-400MHz和BruckerDRX-500MHz核磁共振光譜儀；MicromassQauttro質(zhì)譜儀；ZF-2型三用紫外儀(上海安亭電子儀器廠)；柱色譜硅膠(200～300目)和薄層色譜硅膠GF254(青島海洋化工廠)，化學(xué)試劑均是化學(xué)純和分析純。夏枯草果穗于2008年6月采于安徽省亳州市栽培基地，原植物經(jīng)安徽中醫(yī)學(xué)院中藥與資源教研室劉守金教授鑒定為夏枯草PrunellavulgarisL.。

2 提取分離

夏枯草的干燥果穗30kg，分別用90%和50%乙醇分別加熱回流提取2次，合并提取液，回收乙醇得浸膏2.5kg；浸膏用醋酸乙酯萃取，減壓回收溶劑得醋酸乙酯部分326.7g；將醋酸乙酯部分進(jìn)行反復(fù)硅膠柱色譜及SephadexLH-20柱色譜分離純化，得到化合物1(8mg),2(12mg),3(10mg),4(40mg),5(20mg),6(17mg),7(15mg),8(11mg),9(16mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

3.1化合物1

橙紅色粉末(醋酸乙酯)，遇氫氧化鈉溶液變紅色，遇0.5%醋酸鎂溶液變橙紅色；mp198～199℃。ESI-MSm/z：255.4[M+H]+。1H-NMR(CDC13,500MHz)δ：12.14(1H,Ar-OH)，12.03(1H,Ar-OH)，7.84(1H,dd,J=8.1,1.1Hz,H-5)，7.69(1H，t,J=13.4Hz,8.0Hz,H-6)，7.66(1H,d,J=1.0Hz,H-4)，7.29(1H,dd，J=8.1,8.0Hz，H-7)，7.11(1H,d,J=1.0Hz,H-2)，2.47(3H,s,Ar-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3]報(bào)道的一致，鑒定該化合物為大黃酚(chrysophano1),為該屬植物首次分離得到的化合物。

3.2化合物2

黃色粉末(甲醇)，遇氫氧化鈉溶液變紅色，遇0.5%醋酸鎂溶液變橙紅色；mp302～304℃。ESI-MSm/z：237.4[M+H]+，1H-NMR(DMSO-d6,500MHz)δ：8.14(2H,m,H-5,8)，8.00(1H,s,H-1)，7.90(2H,m,H-6,7)，7.63(1H,s,H-4)，2.26(3H,s,CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]報(bào)道的一致，鑒定該化合物為2-羥基-3-甲基蒽醌(2-hydroxyl-3-methyanthraquinone),為該屬植物首次分離得到的化合物。

3.3化合物3

黃色針晶(氯仿)，鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽(yáng)性；mp301～302℃。ESI-MSm/z：285.3[M+H]+，1H-NMR(DMSO-d6，500MHz)δ：12.50(1H,s,5-OH)，10.85(1H,s,7-OH)，8.07(2H,t,H-2′,6′),7.63(3H,m,H-3′,4′,5′)，7.00(1H,s,H-3),6.31(1H,s,H-6)，3.86(3H,s,-OCH3)。核對(duì)波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]漢黃芩素基本一致，鑒定該化合物為漢黃芩素(wogonin),為該屬植物首次分離得到的化合物。

3.4化合物4

白色粉末(甲醇)，Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽(yáng)性；mp260～262℃。ESI-MSm/z：457.4[M+H]+,1H-NMR[pyridine-d5,500MHz]δ：5.49(1H,t,J=3.3Hz,H-12)，3.45(1H,dd,J=6.0,10.1Hz,H-3)，2.63(1H,d,J=11.0Hz,H-18)，1.24(3H,s,H-27)，1.22(3H,s,H-25)，1.05(3H,s,H-23)，1.02(3H,s,H-24)，0.87(3H,s,H-26)，0.99(3H,d,J=6.0Hz,H-29)，0.94(3H,d,J=6.0Hz,H-30)。核對(duì)波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]烏蘇酸基本一致，確定該化合物為烏蘇酸(ursolic acid)。

3.5化合物5

無(wú)色羽毛狀晶體(石油醚-醋酸乙酯)，Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽(yáng)性，mp196～198℃。ESI-MSm/z：427.7[M+H]+，1H-NMR(CDC13，400MHz)δ：5.2(1H,t,J=10.1Hz,H-12)，0.79(3H,s,H-24)，0.80(3H,s,H-28)，0.83(3,s,H-29)，0.87(3,s,H-30)，0.94(3H,s,H-25)，0.99(3H,s,H-26)，1.01(3H,s，H-23)，1.13(3H,s,H-27)。波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]中β-香樹(shù)脂醇基本一致，鑒定該化合物為β-香樹(shù)脂醇(β-amyrin)。

3.6化合物6

白色針晶(石油醚-醋酸乙酯)，mp152～153℃。ESI-MSm/z：414.4[M+H]+，1H-NMR[CDCl3,500MHz]δ：5.16，5.02(各1個(gè)H，都為dd，J=10.8,17.0Hz,H-22,23),5.16(1H,d,J=4.7Hz，H-7)，3.06(1H,m,H-3)，1.02(3H,d,J=8.3Hz,H-21)，0.85(3H,d,J=10.0Hz,H-26)，0.81(3H，t，J=12.5Hz，H-29)，0.80(3H,d,J=11.5Hz,H-27)，0.80(3H,s,H-19)，0.55(3H,s,H-18)，核對(duì)波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]α-菠甾醇基本一致，鑒定該化合物為α-菠甾醇(α-bessisterol)。

3.7化合物7

白色晶體(丙酮)，Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽(yáng)性，mp172～175℃，ESI-MSm/z：413.2[M+H]+，1H-NMR[CDCl3,500MHz]δ：5.17(1H,brs,H-7)，5.15(1H,dd,J=15.1,8.7Hz,H-22)，5.02(1H,dd,J=15.1,8.7Hz,H-23)，1.83,1.53(各1個(gè)H,都為s,H-11)，1.03(3H,d,J=6.7Hz,H-21)，1.01(3H,s,H-19)，0.84(3H,d,J=7.3Hz,H-27)，0.80(3H,d,J=6.0Hz,H-26)，0.57(3H,s,H-18)核對(duì)波譜數(shù)據(jù)與α-菠甾酮的數(shù)據(jù)[9]基本一致，鑒定該化合物為α-菠甾酮(α-spinasterone)，為該屬植物首次分離得到的化合物。

3.8化合物8

白色粉末(甲醇)，mp298～300℃，Liebermann-Burchard和Molish反應(yīng)呈陽(yáng)性，用不同的展開(kāi)劑薄層展開(kāi)，Rf值均與胡蘿卜苷對(duì)照品一致，與對(duì)照品混合熔點(diǎn)也不下降，故確定該化合物為β-胡蘿卜苷(β-daucosterol)。

3.9化合物9

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(一部)[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：197-198.

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StudyonChemicalConstituentsofSpicaPrunellae

Xu Daocui, Liu Shoujin, Yu Nianjun, Fang Chengwu

(PhamacySchoolofAnhuiUniversityofTraditionalChineseMedicine,KeyLaboratoryofAnhuiModernTraditionalChinesemedicine,HefeiAnhui230038,China)

Objective:To study the chemical constituents of Spica Prunellae.MethodsThe ethanol extract of Spica Prunellae was extracted by ethyl acetate. The extract was separated repeatedly by silica gel and Sephadex LH-20column chromatography. Compounds structures were identified on the basis of physical and chemical properties and spectral data.ResultsNine compounds were isolated from Spica Prunellae, and their structures were identified as：chrysophano1(1),2-hydroxyl-3-methyanthraquinone(2)，wogonin(3), ursolic acid(4),β-amyrin(5),α-bessisterol(6), α-spinasterone(7),β-daucosterol(8),β-sitostero1(9).ConclusionCompounds1-3，7were isolated from this genus for the first time.

Prunellavulgaris; Chemical constituents

2009-12-09)