細胞周期蛋白D1在卵巢子宮內膜異位癥中的表達及意義

張愛群 孫富國

細胞周期蛋白D1在卵巢子宮內膜異位癥中的表達及意義

張愛群 孫富國

子宮內膜異位癥 卵巢 細胞周期蛋白D1 細胞周期 免疫組織化學

子宮內膜異位癥多發生于生育期女性，目前發病機制仍然不十分清楚。細胞周期蛋白D1（cyclinD1）是重要的細胞周期調控因子，與腫瘤的形成密切相關。本研究采用免疫組織化學的方法檢測子宮內膜異位癥中cyclinD1蛋白表達，分析其在卵巢子宮內膜異位癥發病過程中的作用及與臨床分期的關系。

1 對象與方法

1.1研究對象 異位癥組選自我院婦產科2006年1月—2008年1月住院行腹腔鏡手術或開腹手術治療的卵巢子宮內膜異位癥患者 43例，年齡 23～45歲，平均（33.10±5.10）歲。經腹腔鏡手術33例，開腹手術10例；其中異位內膜淺層浸潤12例，深層浸潤31例；異位囊腫<3 cm者11例,異位囊腫≥3 cm者32例。分期標準依據1985年美國生育協會（American Fertility Society）的修正分期法（revised American Fertility Society AFS-r），Ⅰ期 2例，Ⅱ期 9例，Ⅲ期 27例，Ⅳ期5例，對照組為其他婦科疾病同期來院手術者，平均年齡（36.30±5.90）歲，與異位癥組比較，差異無統計學意義（t=2.198，P＞0.05）。全部患者均經組織病理學證實，術前3個月未進行過激素治療。卵巢子宮內膜異位癥患者均做HE染色挑選有典型內膜及間質的組織標本為入選患者。

1.2主要試劑 鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶（SP）試劑盒、cyclinD1鼠抗人單克隆抗體均購自北京中山生物技術公司。

1.3實驗方法 異位癥組取卵巢子宮內膜異位囊腫囊壁組織，對照組取正常子宮內膜組織，10%福爾馬林固定，石蠟包埋，組織切片厚4 μm,免疫組化步驟按試劑盒說明操作。

1.4陽性結果判定標準 cyclinD1陽性產物均主要定位于細胞核上。根據著色強度及范圍分為:陰性（-），無陽性染色細胞或細胞著色率＜5%；弱陽性（＋），陽性細胞數5%～25%；陽性（＋＋），陽性細胞數 26%～50%；強陽性（+++），陽性細胞數>50%，由2名有經驗的病理科醫師雙盲讀片。

1.5統計學處理 所有數據經Excel數據庫整理，采用SPSS 11.5軟件進行統計分析。計量資料用±s表示，組間比較行t檢驗。2組之間陽性率比較用χ2檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.12組中cyclinD1陽性表達情況的比較 cyclinD1在異位癥組中的表達明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表 1。

表1 2組cyclinD1陽性表達的比較 （例）

2.2cyclinD1與異位癥組臨床病理特征的關系 異位癥組患者有無痛經、月經是否異常、是否不孕cyclinD1陽性例數差異均無統計學意義（P>0.05），而不同囊腫大小、異位內膜浸潤深度及盆腔浸潤情況的cyclinD1陽性例數差異有統計學意義（P＜0.05），見表 2。

3 討論

cyclinD1基因定位于染色體11q13上，蛋白含295個氨基酸，是細胞周期素家族中與細胞增殖周期關系最為密切的成員，是啟動細胞周期通過關鍵限速卡點即從G1期到S期的重要調節因子。cyclinD1與CDK4/CDK6結合后,作用于Rb蛋白,使其磷酸化為pRb,導致pRb與E2F脫離,游離的E2F可進入細胞核內，啟動S期相關基因的轉錄，從而使細胞由G1期進入S期，促進DNA合成而發揮加速細胞增殖的正性調控作用。在生理狀態下，細胞進入S期后，cyclinD迅速分解。如果cyclinD持續高表達，G1期將縮短，提前進入S期，使細胞增殖失控，最終形成腫瘤[1]。許多人類腫瘤組織中均發現染色體在11q13區域cyclinD1基因擴增和cyclinD1基因的過度表達，其表達異常與多種腫瘤的發生、發展密切相關[2]。cyclinD1過表達可使細胞G1期縮短，體積變小，降低細胞對促細胞分裂劑的依賴性[3]。如果抑制cyclinD1在G1期表達，細胞將不能進入S期。正常情況下，cyclinD1在G1期是恒定的或保持極低水平，G1期的cyclinD1過度表達可加速細胞周期進程，使細胞逃避監測點，進而發生細胞失控性增殖，與許多惡性腫瘤發生有關。本研究結果顯示，cyclinD1在異位癥組陽性表達率高于對照組，提示其高表達可能與疾病的發生關系密切。cyclinD1過表達主要與周期蛋白依賴性蛋白激酶（CDK）4或CDK6、CDK2結合成復合物，加快細胞通過G1檢查點，具有推動細胞周期進程的作用，與異位子宮內膜的不正常生長、增殖、浸潤、轉移及復發等惡性生物學表現有關。本研究表明，cyclinD1的高表達可能加速了細胞周期進程，使其更快地進入S期，并使異位內膜細胞具有更強的種植及侵襲性，提示cyclinD1與異位內膜增殖、浸潤關系密切，可能對判斷疾病的預后有一定的價值。

表2 cyclinD1與卵巢子宮內膜異位癥臨床癥狀及病理指標的關系 例（%）

[1] 吳鑫,楊鐘莉,宦晴,等.cyclinD、P16在子宮內膜異位癥中的表達及意義[J].醫學與哲學,2008,29(7B):41-42,45.

[2] 王顯艷,王坤,李林,等.PTEN、P27及cyclinD1在胃癌中的聯合表達及臨床意義[J].齊齊哈爾醫學院學報,2009,30(19):2353-2355.

[3] 王前,鄧晶,蔣永新.cyclinD1的研究進展 [J].現代腫瘤醫學,2009,17(2):350-353.

050041 河北省石家莊市，白求恩軍醫學院附屬第260醫院婦產科（張愛群）；白求恩軍醫學院（孫富國）

（2010-01-13收稿 2010-05-13修回）

（本文編輯 魏杰）