食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉測定方法的改進

徐宜宏 蔣 施 金 雁 趙 穎 劉 瑜 曾 凡 鐘 鈺 李曉東

（沈陽出入境檢驗檢疫局綜合技術中心，沈陽 110016）

·食品分析·

食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉測定方法的改進

徐宜宏*蔣 施 金 雁 趙 穎 劉 瑜 曾 凡 鐘 鈺 李曉東

（沈陽出入境檢驗檢疫局綜合技術中心，沈陽 110016）

對目前采用的測定食品中甜蜜素的國標方法GB/T 5009.97-2003進行了改進。將不銹鋼填充柱改為毛細管柱，將恒溫檢測改為采用程序升溫進行分離檢測，并對標準曲線的制作方式進行了改進。結果表明，采用改進的國標方法，得到的環(huán)己基氨基磺酸鈉峰形尖銳，色譜峰與溶劑峰和雜質峰的分離效果更好，且大大降低了方法檢出限，由原來的4 μg降至10 ng，同時，標準曲線的線性更好，方法準確度和精確度更高，定量更準確。

環(huán)己基氨基磺酸鈉；食品；方法改進

環(huán)己基氨基磺酸鈉（C6H12O3NSNa），俗名甜蜜素,是一種人工合成甜味劑，為白色結晶或白色晶體粉末，無臭，味甜，易溶于水。其甜度是蔗糖的30～40倍。因其口感好、價格低廉，是目前我國食品行業(yè)中應用最多的一種甜味劑。但是經常食用甜蜜素含量超標的食品,會對人體的肝臟和神經系統(tǒng)造成損害，特別是對代謝排毒能力較弱的老人、孕婦、小孩危害更加明顯。

目前國家衛(wèi)生標準GB/T 5009.97-2003采用的GC-FID的最小檢出限為4 μg。由于日本要求我國出口食品中甜蜜素不得檢出，日方控制的檢出限為0.2 μg，原檢測方法的靈敏度遠遠不能滿足日常出口檢驗工作需要。因此，我們對國家標準方法第一法——氣相色譜法在儀器條件及標準曲線制作方面進行了改進，并以果汁飲料、白酒、啤酒、調料、咸菜、雞肉串6種空白樣品作為試驗基質，取得了較滿意的結果。

1 實驗部分

1.1 儀器設備

Agilent6890GC氣相色譜，附氫火焰離子檢測器（FID）；LD5-2B型離心機，北京醫(yī)用離心機廠；KQ-600DV型超聲機，昆山市超聲儀器有限公司；分析天平；渦混器。

1.2試劑

正己烷（AR），氯化鈉（AR），50 g/L亞硝酸鈉溶液，100 g/L硫酸溶液，甜蜜素（中國農業(yè)部天津環(huán)保所，含量＞99 g/100 g）。

1.3 實驗方法

1.3.1 色譜條件

毛細管柱DIKMA-FFAP（30 m×0.32 mm×0.25 μm），柱溫：35 ℃ （3 min） ～170 ℃ （2 min），15℃/min，檢測器溫度250℃，汽化室200℃。氮氣流速：1.0 mL/min；氫氣流速：40 mL/min；空氣流速：450 mL/min；尾吹：30 mL/min；采用分流模式：分流比10∶1。

1.3.2 樣品前處理

標準曲線的制作:準確吸取0.1 mg/mL的環(huán)己基氨基磺酸鈉標準溶液0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL（相當于含 0.05 mg、0.10 mg、0.20 mg、0.30 mg、0.4 mg環(huán)己基氨基磺酸鈉） 于100 mL帶塞比色管中，加水至20 g。置冰浴中，加入5 mL 50 g/L亞硝酸鈉溶液，5 mL 100 g/L的硫酸溶液，搖勻，在冰浴上放置30 min，并經常搖動，然后準確加入10 mL正己烷，搖勻，加入5 g氯化鈉，然后置旋渦混合器上振動1 min（或振搖80次），靜置30 min。取各濃度標準系列上清液1 μL注入氣相色譜儀，繪制環(huán)己基氨基磺酸鈉質量一峰面積標準曲線。

樣品溶液的測定：取20 g空白樣品溶液，添加0.1mg/mL甜蜜素標液1.00mL（添加水平5mg/kg），按標準曲線制作同樣處理，取上清液1 μL注入氣相色譜儀，測得峰面積響應值，從標準曲線查出相應的含量。

固體樣品的測定：取2 g空白固體樣品，添加0.1mg/mL甜蜜素標液0.10mL（添加水平5mg/kg），超聲10 min～20 min，置振蕩器中搖動1 h后過濾，收集濾液同上處理。

2 實驗結果

2.1 色譜條件的改進

本試驗將不銹鋼填充柱改為毛細管柱，結果表明：用填充柱得到環(huán)己基氨基磺酸鈉峰形半峰寬較寬，靈敏度低，用DIKMA-FFAP柱得到的環(huán)己基氨基磺酸鈉峰形尖銳，且大大降低了樣品檢出限，由原來的4 μg降至10 ng（信噪比3∶1），并且采用程序升溫進行分離檢測，出峰時間由原來的3.2 min～3.3 min控制到5.3 min～5.4 min，標準峰與溶劑峰和雜質峰的分離效果更好。

2.2 標準曲線的改進

國標中標準曲線的制作只取一種濃度作處理，取1 μL～5 μL進樣。本法取5個濃度作處理，進樣量均為1 μL，很好的消除了儀器的系統(tǒng)誤差。同時，由于試樣液進樣量與標準進樣量相同，相對來說定量更準確，出現(xiàn)失誤的概率更低，操作更科學規(guī)范。

2.3 方法的準確度和精密度

對果汁飲料、白酒、啤酒、調料、咸菜、雞肉串的空白樣品分別按改進的方法和國標方法進行添加回收測定，添加水平5 mg/kg，所得結果見表1。

通過表1可以看出，采用改進的方法得到6種樣品基質的標準曲線線性均好于國標方法，添加回收率更高，測得的結果更加平行，重現(xiàn)性好。

2.4 樣品測定

采用該方法檢測了實際樣品133批，分別為果汁飲料10批，白酒、啤酒、清酒等酒類81批，辣醬、大蒜調味粉、醬油等調料類23批，辣白菜等咸菜類5批，榆皮豆等小食品類2批，雞肉串等肉制品12批，但從這些樣品中均未檢出甜蜜素（檢出限 10 ng）。

表1 改進方法與國標方法測定結果比較（n=5）

3 討論

本試驗將不銹鋼填充柱改為毛細管柱，相對于填充柱而言，毛細管柱具有理論塔板數高、分析速度快的特點。大大降低了樣品檢出限，并且通過采用程序升溫進行分離檢測，使甜蜜素的色譜峰與溶劑峰和雜質峰的分離的更好，有效地解決了國標方法中甜蜜素峰架在溶劑峰和雜質峰拖尾上，使得分離效果不好的問題。

由于果汁飲料、啤酒等液體基質本身具有一定的黏度，進樣過程中常會產生黏針的現(xiàn)象，采用國標方法進行標準曲線的制作時，很容易由于黏針造成曲線進樣不準確，尤其是后兩針 （4 μL、5 μL），從而影響曲線的線性，造成結果不準確。采用改進的標準曲線制作方式，進樣量均為1 μL，很好的消除了儀器的系統(tǒng)誤差。同時，由于試樣液進樣量與標準液進樣量相同，相對來說定量更準確，出現(xiàn)失誤的概率更低，操作更科學規(guī)范。

通過對現(xiàn)有國標方法的一些改進，使得操作更加簡便，準確性高，重現(xiàn)性好；同時大大降低了樣品的檢出限，可以更好地滿足進出口食品的檢測要求。

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Improvement ofSodium N-cyclohexylsulfamate determination method in food

XUYi-hong*JIANGShi JINYan ZHAOYing LIUYu ZENGFan ZHONGYu Li Xiao-dong
（Technologycenter，Shenyangentry-exit inspection and quarantine bureau，Shenyang 110016，China)

Improved the national standard method GB/T 5009.97-2003 which used to determinatesodium cyclamate in fruit juice drinks currently.Changed the stainless steel filled column to capillary column,instead of using constant temperature detection to temperature programming，and the standard curve drawing method was improved. The results showed that the chromatographic peak of Sodium N-cyclohexylsulfamate was sharper which using the improved method of GB，the target chromatographic peak was separated better to solvent peak and impurities peak,and the method Detection limit was lower,which had reduced from 4 ug to 10 ng， while the linear of stand curve was better，recovery rate and accuracy of method was better，and have more accurate quantitative.

sodium n-cyclohexylsulfamate； food；method improvement

*徐宜宏，女，1980年出生，2006年畢業(yè)于沈陽農業(yè)大學，農藥學專業(yè)，碩士，工程師。

2010-10-11