野生紫平菌絲生長營養物質優化研究

摘 要:采用單因素試驗方法，研究野生紫平菌絲在不同營養條件下的生長狀況。結果表明: 培養基中適宜菌絲生長的碳源是麥芽糖，其次是蔗糖和淀粉;氮源是蛋白胨，其次是酵母浸粉;適宜的碳氮比是25∶1;母種培養基中需添加復合維生素B 10～15 mg/L，硫酸鎂3.0～4.5 g/L。最適培養基配方為:麥芽糖20.36 g，蛋白胨2.64 g，硫酸鎂4 g，復合維生素B 15 mg，瓊脂20 g，加水至1 000 ml。

關鍵詞:平菇;野生紫平;菌絲生長;營養物質;優化

中圖分類號:S646.1+4 文獻標識號:A 文章編號:1001-4942(2010)05-0075-03

作者于2005年7月，在山東省農業科學院植物保護研究所溫室內枸樹下采集到一株旺盛生長的野生紫色平菇狀真菌子實體。采集地環境空氣溫度28℃左右，當天平均氣溫27℃，晝夜溫差為9℃，可見其適合在高溫環境中生長。目前，國內尚未有類似特性食用菌品種報道。經初步鑒定，該菌屬真菌門、擔子菌綱、傘菌目、側耳科、側耳屬平菇(Pleurotus ostreatus)，暫定名為紫平[1]。菌絲分離培養成功后，經活體(雞)長期飼喂試驗，確定該菌無毒可食。該菌株的發現對于豐富食用菌品種資源，彌補高溫季節食用菌品種稀少，提供新的育種材料，具有重要意義。為了馴化栽培該菌株，本試驗對其菌絲生長所需要的營養物質進行了優化研究。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

野生紫平，本所采集、分離、培養、保存菌株。

1.2 供試基礎培養基

1.2.1 薩市(Sabouraud’s)培養基 蛋白胨10 g，瓊脂20 g，麥芽糖40 g，復合維生素B 1片(含維生素B1 3 mg，維生素B2 1.5 mg，維生素B6 0.2 mg，煙酰胺10 mg，右旋泛酸鈣1 mg)，加水至1 000 ml，1.3×105 Pa滅菌40 min。

1.2.2 復合培養基 葡萄糖20 g，蛋白胨3 g，磷酸二氫鉀2 g，瓊脂粉20 g，加水至1 000 ml，1.3×105 Pa滅菌40 min。

1.3 試驗方法

1.3.1 接種 從試管斜面菌落邊緣挑取紫平菌絲，接種到PDA培養基平板上，25℃恒溫培養，長滿平板后，用打孔器在菌落邊緣，打成直徑5 mm的菌塊，接種到供試培養基上進行試驗。

1.3.2 營養物質對菌絲生長的影響試驗

①碳源:分別用含有相同含碳量的葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、淀粉代替1.2.1薩市基礎培養基中的麥芽糖，對紫平菌絲進行培養、觀察。

②氮源:分別用相同含氮量的硫酸銨、尿素、酵母浸粉和硝酸鉀代替1.2.2培養基中的蛋白胨，在相同培養條件下，對紫平菌絲進行培養、觀察。

③碳氮比:在1.2.2基礎培養基中，以1 000 ml培養基中葡萄糖與蛋白胨(蛋白胨含碳量對試驗處理碳氮比的影響忽略不計)的總質量23 g不變，添加不同量的葡萄糖與蛋白胨，使培養基的碳氮比分別為10∶1、15∶1、20∶1、25∶1、30∶1，接種后在相同培養條件下，觀察對比不同碳氮比對紫平菌絲生長的影響。

④復合維生素B:在1.2.2的培養基中，使用復合維生素B的添加量分別為0、5、10、15、20 mg，在相同培養條件下，對紫平菌絲進行培養、觀察。

⑤硫酸鎂:在1.2.2的培養基中，分別加入0、1.5、3.0、4.5、6.0 g的硫酸鎂，在相同培養條件下，對紫平菌絲進行培養、觀察。

⑥根據試驗結果進行數據分析，得出最佳配方，其中碳源和氮源的數據應該滿足以下要求:

a.碳源和氮源的總質量與食用菌常用培養基1.2.2相同，為23 g;

b.碳氮比為1.3.2中得出的結論，用C代替。

設碳源為X，含碳量為A;氮源為Y，含氮量為B，聯立方程如下:

X+Y=23，AX/BY=C

1.3.3 菌絲長速及生長勢觀察 各處理平板培養5 d，分別用十字交叉法測量菌落直徑，計算菌絲日均生長速率，同時觀察記錄菌絲生長勢，主要依據為菌絲粗細、濃密程度、菌落完整性等。

2 結果與分析

2.1 碳源

由表1可以看出，紫平菌絲在6種碳源中都能生長，菌落完整，但長勢不同。在碳源為麥芽糖的培養基上長勢最好、生長速度最快，與其它處理之間差異極顯著;在碳源為蔗糖和淀粉的培養基上菌絲長勢較好，二者長速差異不顯著;碳源為葡萄糖和果糖的培養基上長勢較差，二者差異不顯著。可見，紫平菌絲適宜的碳源是麥芽糖，其次為淀粉和蔗糖。

2.2 氮源

由表2可以看出，紫平菌絲在5種氮源中均能生長，菌落完整，但長勢不同。在氮源為蛋白胨的培養基中長勢最好、生長速度最快，與其它處理比較，差異極顯著;其次為酵母浸粉培養基;氮源為硫酸銨和硝酸鉀的培養基中菌絲長勢較差，氮源為尿素的培養基中菌絲長勢最差。可見，紫平菌絲適宜的氮源是蛋白胨，其次是酵母浸粉，其它氮源則不適合紫平菌絲生長。

2.3 碳氮比

由表3可以看出，菌絲在不同碳氮比的培養基中都能生長，保持了完整的菌落形態，但是長勢不同。碳氮比為25∶1時長勢最好，生長速度最快，與其它處理相比，差異極顯著，碳氮比為10∶1、15∶1、20∶1、30∶1時菌絲長勢較差，它們之間差異不顯著。可見，紫平菌絲適宜的碳氮比是25∶1，與一般栽培平菇的經驗碳氮比要求相似。

2.4 復合維生素B

復合維生素B是食用菌母種培養基中需要添加的重要成分，其添加量對不同的食用菌種類生長差異很大。由表4可以看出，菌絲在不同含量復合維生素B的培養基中都能生長，保持了完整的菌落形態，但是長勢不同。復合維生素B 為15 mg和10 mg時菌絲長勢最好、生長速度最快，與其它處理相比，差異顯著;5 mg和20 mg時長勢較好于對照，但與對照差異不顯著。可見，紫平菌絲適宜的復合維生素B濃度為10～15 mg/L。

2.5 硫酸鎂

由表5可以看出，菌絲在含有不同濃度硫酸鎂的培養基上都能生長，保持了完整的菌落形態，但是長勢不同。在3.0g/L和4.5 g/L濃度時，菌絲長勢最好，生長速度最快，二者差異不顯著，但與其它處理差異極顯著;為6 g/L時菌絲長勢較好，1.5 g/L長勢較差。可見，在母種培養基上加入3～4.5 g/L硫酸鎂對紫平菌絲生長促進作用最為顯著，這和弓建國等(2009)[5]的研究結果相似。

3 結論與討論

試驗結果表明，培養基中最適合野生紫平菌絲生長的碳源是麥芽糖，其次是淀粉和蔗糖;氮源是蛋白胨，其次是酵母浸粉;碳氮比為25∶1;添加復合維生素B 10～15 mg/L，硫酸鎂3～4.5 g/L，能夠明顯促進菌絲生長。

綜合得出其最適培養基配方為:蛋白胨2.64 g，麥芽糖20.36 g，硫酸鎂4 g，復合維生素B 15 mg，瓊脂20 g，加水至1 000 ml。

本試驗中，適合紫平菌絲生長的碳氮比是25∶1，這和傳統上側耳屬真菌生長所要求的碳氮比相差不大[2，3]，對下一步栽培配方研究具有重要的參考價值;同時，該設計方案考慮到培養基中營養物質的條件一致問題[4]，使試驗結果能夠正確反映碳氮比對紫平菌絲的影響[2]，對今后碳氮比的試驗具有借鑒意義;從試驗結果可以看出，碳氮比對紫平菌絲生長影響比較大。

試驗2.1和2.2可以相互驗證，蛋白胨就是紫平的最適氮源，麥芽糖就是紫平的最適碳源，蛋白胨使麥芽糖更有利于紫平菌絲的生長。

參 考 文 獻:

[1] 卯曉嵐. 中國經濟真菌[M].北京:科學出版社，1998，1-762.

[2] 萬魯長，黃春燕，單洪濤，等.不同營養條件對白靈側耳菌絲生長的影響[J].食用菌學報， 2005，12(4):27-32.

[3] 宮志遠，任海霞，李 瑾，等. 白靈菇菌絲生長營養物質優化試驗[J].山東農業科學，2008，7:74-76.

[4] 馮改靜，李守勉，李 明，等. 不同碳氮比栽培料對猴頭菌菌絲及子實體生長的影響[J]. 華北農學報，2007，22(增刊): 131-35.

[5] 弓建國， 徐松鶴. 石頭菇母種培養基優化研究[J]. 北方園藝，2009，11:224-226.